一种高效表达生产内吗啡肽2的方法及其应用技术

本发明专利技术属于生物基因技术领域，目前未见利用人源性的神经生长因子前导肽实现对内吗啡肽-2的高效分泌的相关文献报道。本发明专利技术提供了一种高效表达生产内吗啡肽2的方法，包括：设计一个含有人源神经生长因子信号肽序列和内吗啡肽2表达序列的融合基因；然后将其插入表达载体，再转化宿主细胞，筛选并鉴定阳性重组子，诱导培养并外分泌表达蛋白，最后经纯化收集产物。本方法制备所得表达产物内吗啡肽2在制备治疗慢性疼痛及癌痛药物中的应用。由于该产物是内源性阿片肽，不存在成瘾、耐受等反应，而且在体内可长期表达，达到长时间治疗疼痛的目的。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种高效表达生产内吗啡肽2的方法，其具体步骤为：(a)设计并合成一个含有人源神经生长因子信号肽序列和内吗啡肽2表达序列的融合基因，该融合基因的序列如SEQ?ID?NO:1所示；(b)将(a)所述的融合基因序列插入一表达载体，使该融合基因序列处于表达载体启动子的控制之下，通过PCR扩增，筛选出阳性重组子，构建表达载体；(c)将(b)所构建的表达载体转化宿主细胞，诱导培养内吗啡肽2的外分泌表达；(d)收集表达产物内吗啡肽2，并采用硅胶柱层析法纯化内吗啡肽2。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴飞翔，俞卫锋，孙玉明，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：