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聚酰胺-胺型树枝状大分子包载miR-21基因抑制剂的制备方法技术

技术编号:9133900 阅读:221 留言:0更新日期:2013-09-11 21:31
本发明专利技术为聚酰胺-胺型树枝状大分子包载miR-21基因抑制剂的制备方法;PAMAM用TE缓冲液(10mmol/L,pH8.0Tris-HCl)稀释至20mg/L浓度,as-miR-21(20μmol/L)1mmol/L乙二胺四乙酸稀释至50nM。根据预先设计好的N/P比将50nM的as-miR-21与20mg/L的PAMAM在TE缓冲液体系中混合。室温孵育20min后得到两者的复合物。当N/P为16:1-64:1时,as-miR-21能与PAMAM完全结合,形成稳定复合物,且粒径均匀的PAMAM包载miR-21抑制剂应用于恶性脑胶质瘤的临床体内外研究,成为治疗胶质瘤细胞的新方法。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
聚酰胺?胺型树枝状大分子包载miR?21基因抑制剂的制备方法,其特征是步骤如下:1)PAMAM用含10mmol/L,pH8.0三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris?Hcl)及1mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)的TE缓冲液稀释至20mg/L;2)20μmol/L的as?miR?21,用10mmol/L,pH8.0Tris?Hcl及1mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)的TE缓冲液稀释至50nM;3)选用N/P比64:1?16:1将100pmol?as?miR?21与PAMAM在TE缓冲液体系中混合;4)室温孵育20?30min后得到两者的复合物;其中,N/P比是根据PAMAM中末端氨基正电荷与miR?21中磷酸根负电荷的比值来计算的:FDA00003330497100011.jpg

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:孟玉斌龙丽霞任玉原续波康春生
申请(专利权)人:天津大学
类型:发明
国别省市:

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