禽流感H7N9病毒RT-PCR检测试剂盒及检测方法技术

技术编号:9110051 阅读:212 留言:0更新日期:2013-09-04 23:57
本发明专利技术涉及禽流感H7N9病毒RT-PCR检测试剂盒及检测方法。目的是提供的检测试剂盒应具有使用方便、检测准确的特点,提供的方法应具有检测准确性高、检测简单方便的特点。技术方案是:禽流感H7N9病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒,包括脱氧三磷酸核苷、MgCl2、RT-PCR缓冲液、禽流感H7N9病毒基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶;其特征在于所述检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针;一种禽流感H7N9病毒荧光定量RT-PCR检测方法,按以下步骤进行:(1)提取待测样品RNA;(2)进行RT-PCR反应;(3)对RT-PCR反应产物进行荧光检测。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
禽流感H7N9病毒荧光定量RT?PCR检测试剂盒,包括脱氧三磷酸核苷、MgCl2、RT?PCR缓冲液、禽流感H7N9病毒基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶;其特征在于所述检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针,所述上游引物、下游引物和特异性探针的序列如下:上游引物H7?FP:5’?CACTGCARAATAGAATACAGATWGAC?3’;下游引物H7?RP:5’?GTGCACYGCATGTTTCCATT?3’;特异性探针H7?P:5’?FAM?TTATGGTTTAGCTTCGGGGCATCATG?BHQ1?3’,其中FAM?为荧光报告基团,BHQ1为荧光淬灭基团;上游引物N9?FP:5’?ACAATACACGATAGRTCCCAGTA?3’;下游引物N9?RP:5’?CTAGTACTTGACCACCCAATGC?3’;特异性探针N9?P:5’?HEX?CTRTCATCACCRCCCACAGTGTA?BHQ1?3’,其中FAM?为荧光报告基团,BHQ1为荧光淬灭基团;所述禽流感H7N9病毒基因标准品的序列如下:TGCAGAATAGAATACAGATAAACCCAGTGAAGTTGAGTAGTGGATACAAA?GACATAATCTTATGGTTTAGCTTCGGGGCATCATGTTTCCTTCTTATAGCCAT?TGCAATGGGATTGGTTTTCATTTGCATAAAGAATGGAAACATGCGGTGGTT?CTATGCTCTCAGCCAAGGAACAACAATCAGAGGGAAACACTCAAACGGAA?CAATACACGATAGGTCCCAGTATCGCGCCCTGATAAGCTGGCCACTATCATC?ACCGCCCACAGTGTACAATAGCAGGGTGGAATGCATTGGGTGGTCAAGTA?CTAGTTGCCATGATGG。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张严峻李辉茅海燕
申请(专利权)人:浙江省疾病预防控制中心
类型:发明
国别省市:

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