一种葡萄果实糖分HPLC-ELSD测定方法技术

本发明专利技术公开了葡萄果实糖分HPLC-ELSD测定方法，属于食品糖分检测技术领域。首先将葡萄榨汁匀浆，再用超声波提取，然后离心取上清液，过滤后用作供试样品；再分别配制葡萄糖、果糖和蔗糖的系列浓度标准工作液；色谱条件为：聚苯乙烯-二乙烯基苯键合的氨基糖柱为色谱柱；流动相为乙腈和水以体积比为70-80:30-20的混合物，流速1mL/min；柱温：30℃-35℃；检测器选用ELSD，检测池温度40℃-80℃，进样量10μL；然后进行线性相关性和精密度考察、稳定性检测和样品回收率检测。本发明专利技术提供的方法操作简便，耗时短，测量结果重复性好，精密度高；能准确、快速的同时测定葡萄果实中果糖、葡萄糖、蔗糖的含量。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种葡萄果实糖分HPLC?ELSD测定方法，其特征在于，包括如下步骤：?1）样品处理?取大小均匀、色泽一致的洗净晾干的葡萄，用榨汁机打碎并混匀，迅速精确称取匀浆1.00g，用90%的乙醇定容到25mL容量瓶中，称重；然后用超声波提取20?40min，取出、室温冷却后，加90%的乙醇补充到之前定容25mL时液体的重量；将提取样品常温下8000?12000r/min离心15?30min，取上清液，经0.25μm滤膜过滤后用作供试样品；?2）标准溶液的配制?分别用超纯水配制浓度为0.1mg/mL、0.3mg/mL、0.6mg/mL、0.9mg/mL、1.2mg/mL、1.5mg/mL的葡萄糖、果糖和蔗糖的系列浓度标准工作液；?3）色谱条件?色谱柱为聚苯乙烯?二乙烯基苯键合的氨基糖柱；流动相为乙腈和水的混合物，其中，乙腈和水的体积比为70?80:30?20；流动相流速为1mL/min；柱温：30℃?35℃；检测器选用蒸发光散射检测器，检测池温度40℃?80℃，进样量10μL；?4）线性相关性和精密度考察?以步骤2）配制的0.1mg/mL、0.3mg/mL、0.6mg/mL、0.9mg/mL、1.2mg/mL、1.5mg/mL的葡萄糖、果糖、蔗糖的系列标准工作液，按步骤3）所述的色谱条件进样分析并计算，得标准曲线回归方程；?吸取同一样品溶液，重复进样3?7次，按步骤3）所述的色谱条件进样分析，以果糖、葡萄糖和蔗糖峰面积计算精密度；?5）稳定性检测?吸取同一样品溶液，分别于室温下贮放0、2、4、6、8、16和24h后，按步骤3）所述的色谱条件进样分析，重复进样3?7次；测试果糖、葡萄糖和蔗糖峰面积并计算其相对标准偏差；?6）样品回收率检测?在制备好的多份同一葡萄样品提取液中，加入葡萄糖、果糖、蔗糖标样，另有1份葡萄样品提取液不加葡萄糖、果糖、蔗糖标样；按步骤1）所述的样品处理方法进行预处理，按步骤3）所述的色谱条件进样分析，连续进样5次，计算其回收率。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邓群仙，李梦鸽，董礼，吕秀兰，廖明安，刘健，程雪丽，李康宁，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：