白喉毒素突变体CRM197的制备方法技术

技术编号:9084825 阅读:225 留言:0更新日期:2013-08-28 21:09
本发明专利技术涉及白喉毒素突变体CRM197的制备方法,其是对重组白喉毒素突变体CRM197在大肠杆菌中表达后对其进行纯化,纯化方法包括如下步骤:将包涵体变性、复性后,先经饱和硫酸铵沉淀,然后超滤换液浓缩后,利用阴离子交换层析进行纯化,最后过分子筛,收集目的蛋白峰,即可得到高纯度的蛋白样品。本方法具有纯化周期短、操作简便、产品纯度高、工艺稳定性强等特点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
白喉毒素突变体CRM197的制备方法,包括白喉毒素突变体CRM197在大肠杆菌中表达及纯化的步骤,其特征在于,蛋白纯化的步骤包括:1)采用大肠杆菌以包涵体形式表达的重组蛋白CRM197,包涵体经过变性和复性后,得到含有目的蛋白的复性液;2)复性液经硫酸铵沉淀后,离心取上清,通过超滤进行分离和浓缩,得到超滤浓缩液;3)将上述超滤浓缩液过离子交换层析柱进行纯化,得到含有目的蛋白CRM197的分级组分;4)将上述分级组分通过分子筛系统,得到含白喉毒素突变体CRM197的目的蛋白液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:林福玉肖钾钙镁魏文进
申请(专利权)人:北京民海生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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