【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种绵羊myostatin基因donor载体的构建方法，其包括如下步骤：以绵羊基因组DNA为模板，使用上游引物gggcccgtgacacggcagaggttttaat和下游引物进行PCR扩增；经PCR扩增出含有ApaI和BamHI酶切位点的同源左臂序列SEQ?ID?NO.1；以绵羊基因组DNA为模板，使用上游引物ggtaccaggtaacagacacaccaaaaag和下游引物gggcccctactaccatgcctggaatctt进行PCR扩增，经PCR扩增出含有KpnI和ApaI酶切位点的同源右臂SEQ?ID?NO.2；将同源左臂序列和含有同样酶切位点的骨架载体pEGFP?C1分别进行BamHI单酶切，经凝胶回收后用T4连接酶进行连接，再经ApaI单酶切后，回收较大的片度进行T4连接酶连接，获得含有左臂的载体pEGFP?C1?L；将pEGFP?C1?L载体同带有KpnI和ApaI酶切位点的右臂分别进行KpnI和ApaI双酶切位，再经胶回收后，用T4连接酶连接，即完成绵羊myostatin基因载体的构建。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李万利，李文清，王二耀，徐照学，曹文广，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：
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