动物食品中阿散酸、硝苯砷酸及洛克沙砷的测定方法技术

一种动物食品中阿散酸、硝苯砷酸及洛克沙砷的测定方法，其特征在于，所述测定方法包括以下步骤为：称取待测样品A克于研钵中，加入弗罗里硅土3A克充分拌匀后，用甲醇比水的体积比为3∶7的甲醇水溶液做提取剂，用加速溶剂萃取仪提取，提取完成后，再用水定容到体积5A毫升；经滤膜过滤后，供液相色谱-原子荧光光谱测定；所述A为不为零的整数。与现有技术相比，本发明专利技术的优点在于：本实施例研究并建立了加速溶剂萃取-液相色谱-原子荧光同时测定动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量的方法；优化了加速溶剂萃取技术的提取溶剂比例、提取温度、提取时间和提取次数，提取溶剂用量少，快速，基体影响小，萃取效率高，选择性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸与洛克沙砷残留量的测定方法。
技术介绍
近年来，作为动物抗病原微生物和促生长类的饲料添加剂——有机砷类制剂在世界范围内广泛使用。其种类主要有阿散酸(ASA)、洛克沙砷(ROX)、硝苯砷酸(NIT)。现有技术中，关于它们的检测方法主要是色谱和检测器联用技术:如采用高效液相色谱-紫外检测器测定了饲料中的阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷，但此法仅适用于饲料样品的检测；另如低检出限、低溶剂消耗量、少量固定相的液相色谱-质谱法测定有机砷兽药的方法，特别是色谱与电感耦合等离子体质谱联用技术。该法灵敏度高，样品前处理简单。但由于其价格昂贵，运行成本高，目前很难普及，而且样品中的盐分对ICP-MS测定砷时的干扰较大。另外，HPLC的流动相中通常会含有一定比例的有机溶剂，有机溶剂在ICP中所产生的碳可造成ICP-MS的进样管堵塞和采样锥、截取锥两锥孔变得越来越小甚至堵塞，从而导致ICP-MS的信号不稳定；再如现有的改进方案中，利用液相色谱-氢化物发生-原子荧光联用同时检测，砷化合物在一定的浓度范围内与荧光峰面积呈良好的线性关系，但该类方案对于复杂基质样品的溶剂提取和萃取效率低，因此，有必要对动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸与洛克沙砷残留量的测定方法作进 一步的改进。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对上述现有技术现状而提供一种提取溶剂用量少，快速，基体影响小，萃取效率高且检测准确度高的。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为:本专利技术的测定动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸与洛克沙砷残留量的方法，其特征在于，所述方法为:称取质量A的试样于研钵中，加入质量B的弗罗里硅土充分拌匀后，用体积比为3: 7的甲醇-水溶液做提取剂，用加速溶剂萃取仪提取，提取完成后，再用水定容到体积C。经滤膜过滤后，供液相色谱-原子荧光光谱测定；上述的质量A与质量B的质量比为1: 3。作为改进，所述试样选取猪肝或鸡肝，动物源性样品种类繁多，其中动物的肝脏和肾由于对砷有富集作用，因而有机砷绝大多数都残留在这两个部位，因此，我们选择肝脏作为实验样品。再改进，通过实验的优化，所述加速溶剂萃取条件优选为:提取温度80°C ;压强1500psi，静态萃取时间为4分钟；冲洗体积60% ;提取次数为3次；氮气吹扫60秒。再改进，所述滤膜的滤孔大小优选为0.45 μ m。再改进，所述液相色谱条件为:色谱柱采用C18柱(250_Χ4.60_，5μπι);流速为1.2mL/min ;进样量为100 μ L ;在反相色谱流动相中添加缓冲盐，有助于改善色谱峰形并且提高色谱峰的分离度，因此流动相优选为5%甲醇-0.1%三氟乙酸-0.05mol/L磷酸二氢钾；再改进，所述原子荧光工作条件为:综合考虑灵敏度、灯的使用寿命、发射谱线的自蚀现象等因素，选择总电流为100mA，负高压为330V;为达到灵敏度最高，载气流速优选为300mL/min,屏蔽气流速优选为900mL/min ；与现有技术相比，本专利技术的优点在于:本实施例研究并建立了加速溶剂萃取-液相色谱-原子荧光同时测定动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量的方法；优化了加速溶剂萃取技术的提取溶剂比例、提取温度、提取时间和提取次数，提取溶剂用量少，快速，基体影响小，萃取效率高，选择性好；研究了液相色谱流动相和原子荧光的工作条件；在O 2.0mg/L范围内内阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷的线性关系良好，线性相关系数大于0.999，阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷检出限(S/N = 3)分别为2.4μ g/L、7.4μ g/L、4.1 μ g/L0附图/表说明附图说明图1为专利技术的阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷混合标准溶液(lmg/L的LC-AFS谱图)；图2为载气流量对砷形态荧光信号强度的影响的折线图。具体实施例方式以下结合附图实施例对本专利技术作进一步详细描述。如图1至2所示，本实施例的，所述方法包括以下步骤:称取2g(精确到0.0lg)试样于研钵中，加入6.0OOg弗罗里硅土充分拌匀后，用体积比为3: 7的甲醇-水溶液做提取剂，用加速溶剂萃取仪提取。提取完成后，用水定容到10mL。此溶液过0.45 μ m滤膜后，供液相色谱-原子荧光光谱测定。所述试样选取猪肝或鸡肝。所述加速溶剂萃取条件为:提取温度80°C ;压强1500psi ;静态萃取时间为4分钟；冲洗体积60% ;提取次数为3次；氮气吹扫60秒。所述滤膜的滤孔大小为0.45 μ m。所述液相色谱条件为:色谱柱采用C18柱(250mmX4.60mm,5 μ m);流速为1.2mL/min ;进样量为100 μ L ;流动相为5%甲醇-0.1 %三氟乙酸-0.05mol/L磷酸二氢钾。所述原子荧光工作条件为:总电流为IOOmA ;负高压为330V ;载气流速为300mL/min ;屏蔽气流速为 900mL/min。 以下结合实施例对本专利技术作进一步说明:I实验部分1.1仪器、试剂与样品液相色谱/原子荧光光谱仪(LC-AFS9800):北京海光仪器公司；高速均质器(德国IKA公司)；超声波水浴器(美国Ney公司)；LD4_2型离心机(北京医用离心机厂)；涡旋混合器(美国Fisher公司)；超纯水仪(美国Millipore公司)；加速溶剂萃取仪(ASE300):美国戴安公司；0.45μπι滤膜(直径47mm，美国Millipore公司)。甲醇为色谱纯；盐酸为优级纯；三氟乙酸、氢氧化钠、硼氢化钾、磷酸二氢钾均为分析纯；阿散酸标准品(纯度99%，Dr.Ehrenstorfer GmbH，德国)；硝苯砷酸标准品(纯度95%，日本和光纯药工业株式会社)；洛克沙砷标准品(纯度97.5%,Dr.Ehrenstorfer GmbH,德国)；实验用水为超纯水。猪肝、鸡肝均为市售。1.2溶液的配制载流:5%盐酸(优级纯)；还原剂(0.5%氢氧化钠-2.0%硼氢化钾):称取氢氧化钠5g，硼氢化钾20g溶于水中，并稀释至IOOOmL混匀；提取剂:取甲醇300mL，倒入700mL水中，混匀；流动相(5%甲醇-0.1%三氟乙酸-0.05mol/L磷酸二氢钾):取甲醇50mL，三氟乙酸lmL，磷酸二氢钾3.9g溶于水中，并稀释至IOOOmL混匀；标准储备液:准确称取阿散酸、洛克沙砷、硝苯砷酸标准品各IOOmg于IOOmL容量瓶中，用超纯水在超声波水浴中溶解，配制成1000mg/L的标准储备液；标准工作液:使用前将上述储备液以超纯水稀释至所需浓度。1.3实验条件LC 条件:色谱柱:C18 柱(250_X4.60mm, 5 μ m);流速:1.2mL/min ;进样量:IOOyL ;流动相:5%甲醇-0.1 %三氟乙酸-0.05mol/L磷酸二氢钾。原子荧光工作条件:总电流:100mA ;负高压:330V ;载气流速:300mL/min ;屏蔽气流速:QOOmT ,/mi η。1.4样品处理称取2g(精确到0.0lg)试样于研钵中，加入6.0OOg弗罗里硅土充分拌匀后，用体积比为3: 7的甲醇- 水溶液做提取剂，用加速溶剂萃取仪提取。提取温度80°C，压强1500psi，静态萃取时间为4分钟，冲洗体积60%，提取次数为3次，氮气吹扫60秒。提取完成后，用水定容到10mL。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种动物食品中阿散酸、硝苯砷酸及洛克沙砷的测定方法，其特征在于，所述测定方法包括以下步骤为：称取待测样品A克于研钵中，加入弗罗里硅土3A克充分拌匀后，用甲醇比水的体积比为3∶7的甲醇水溶液做提取剂，用加速溶剂萃取仪提取，提取完成后，再用水定容到体积5A毫升；经滤膜过滤后，供液相色谱?原子荧光光谱测定；所述A为不为零的整数。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：肖亚兵，张霞，王伟，崔颖，
申请(专利权)人：天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心，
类型：发明
国别省市：