一种测量糖化血红蛋白的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种测量糖化血红蛋白的试剂盒，包括盒体、试剂瓶、瓶垫、合页和盒盖，盒体通过合页与盒盖连接，试剂瓶为至少四个，分别放置磁性粒子悬液，红细胞裂解液，冲洗液和信号。本实用新型专利技术使用能够定量捕捉样本中的糖化血红蛋白和非糖化血红蛋白的磁性颗粒，只需要检测磁性颗粒上糖化血红蛋白的含量，再与标准工作曲线做对照就能计算出样本中糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比。本实用新型专利技术操作简单只需一个动作即可完成糖化血红蛋白百分含量的定量检测。本实用新型专利技术可以不需使用抗体等生物原料，价格低廉，容易实现检测仪器小型化。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及血液检测试剂盒，更具体地讲，涉及离体血液中糖化血红蛋白的检测试剂盒。
技术介绍
目前临床上常用的糖化血红蛋白检测方法有:高效液相色谱、免疫法、酶法、离子交换层析、化学发光法等。高效液相色谱、离子交换层析需要使用大型仪器，且仪器价格昂贵；免疫法需要使用大量抗体，且需要使用大型仪器才能进行检测，如生化分析仪等；酶法需要使用多种酶配合进行反应才能得到最终结果，最终结果也需要大型仪器检测。以上各种方法均需要分别检测总血红蛋白和糖化血红蛋白两个指标后，通过计算糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比才能得到最终结果，两次检测带来的直接后果就是检测结果准确性不高，且现有技术操作复杂，必须有专业人士操作才能进行。另外，现有技术使用的仪器价格昂贵且体积庞大。磁微粒分离酶联免疫检测技术是一种以磁性微粒为固相分离载体，将免疫磁微粒分离技术与酶联免疫检测技术 相结合而建立的一种新型免疫检测方法。传统ELISA方法，抗原、抗体的结合反应是在固相(ELISA板反应孔)表面进行的，而磁微粒分离酶联免疫检测方法，抗原、抗体的结合反应也是在近似液相的条件下进行，因而反应快速、彻底，与传统ELISA相比具有灵敏度高、检测用时少的优点。中国专利申请:糖化血红蛋白定量测定试剂盒及其检测方法(申请号:201110257757.5)即是利用了传统的磁微粒分离酶联免疫检测技术，磁性粒子标记抗糖化血红蛋白抗体，测量糖化血红蛋白总量，而糖化血红蛋白总量在临床上并没有意义，临床上需要的是糖化血红蛋白与总血红蛋白的比值。
技术实现思路
本技术所要解决的技术问题是，提供一种操作简单、只需一个动作即可检测出糖化血红蛋白百分含量的试剂盒。为了解决上述技术问题，本技术提供了测量糖化血红蛋白的试剂盒，其特征在于，包括盒体、试剂瓶、瓶垫、合页和盒盖，盒体通过合页与盒盖连接，所述试剂瓶为至少四个。作为一个优选方案，所述试剂瓶为四个，分别放置磁性粒子悬液，红细胞裂解液，冲洗液和信号，所述磁性粒子悬液吸附血红蛋白，所述红细胞裂解液为纯水或者表面活性剂溶液，所述冲洗液是磷酸盐缓冲液，所述信号为经过荧光标记的可特异性识别糖化血红蛋白的物质，所述荧光标记的标记物是罗丹明B、硒化镉量子点、镧配合物中的一种，所述可特异性识别糖化血红蛋白的物质是指抗糖化血红蛋白抗体或者间氨基苯硼酸中的一种或两种。作为又一个优选方案，所述试剂瓶为六个或七个，分别放置磁性粒子悬液，红细胞裂解液，冲洗液、信号、底物和终止液，所述磁性粒子悬液吸附血红蛋白，所述红细胞裂解液为纯水或者表面活性剂溶液，所述信号为经过酶标记的可特异性识别糖化血红蛋白的物质，所述底物为特异的针对信号的放大系统，根据酶标的不同可以有不止一样底物，所述酶标记的标记物是辣根过氧化物酶或者碱性磷酸酶中的一种，当标记物是辣根过氧化物酶时，底物为过氧化氢溶液和四甲基联苯胺溶液，终止液为硫酸溶液，当标记物是碱性磷酸酶时，底物为对硝基苯磷酸盐溶液，终止液为碳酸钠溶液，所述可特异性识别糖化血红蛋白的物质是指抗糖化血红蛋白抗体或者间氨基苯硼酸中的一种或两种。所述磁性粒子表面为高分子聚合物，通过静电吸附血红蛋白，所述高分子聚合物指聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚乙烯基甲苯、纤维素、琼脂糖中的一种；或者磁性粒子表面为官能团，磁性粒子预先包被抗血红蛋白抗体之后再加入样本中，通过抗血红蛋白抗体捕获血红蛋白，所述官能团指羧基、巯基、环氧基、氨基或者醛基中的一种。包被有抗血红蛋白抗体的磁珠只能捕获血红蛋白，包括糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白总量；而不包被的磁珠能捕获样本中的所有蛋白包括血红蛋白和样本中其他蛋白，其他蛋白含量较少。所以，不管包被与否的磁性粒子，只要能捕获血红蛋白均能实现本技术目的，但是包被后的灵敏度与抗干扰性要比不包被的好，这样准确度也会提高。磁珠在本技术中是以悬浮液的形式存在，只要加入固定体积固定浓度磁珠悬浮液就可以保证加入的磁珠量是固定的。试剂盒中所使用的磁性粒子悬液，红细胞裂解液，冲洗液、信号、底物和终止液均是市售常规材料。本技术的优点在于，本技术可以称为“一步法”，基于这样一个全新的思路，由于样本中游离的糖化血红蛋白和非糖化血红蛋白的比例是固定的，这样载体与样本反应时就能够将样本中的糖化血红蛋白和非糖化血红蛋白按比例捕获到载体表面。本技术使用能够定量捕捉样本中的糖化血红蛋白和非糖化血红蛋白的磁性颗粒，只需要检测磁性颗粒上糖化血红蛋白的含量，再与标准工作曲线做对照就能计算出样本中糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比。操作简单只需一个动作即可完成糖化血红蛋白百分含量的定量检测。本技术可以不需使用抗体等生物原料，价格低廉，容易实现检测仪器小型化。附图说明图1为本技术试剂盒的连接图。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本技术。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。应理解，这些实施例仅用于说明本技术而不用于限制本技术的范围。实施例1.试剂盒组成:如图1所示,试剂盒包括盒体、试剂瓶、瓶垫、合页和盒盖,盒体通过合页与盒盖连接，试剂瓶的个数根据信号选择的不同可以有4-7个，分别放置包被有抗血红蛋白抗体的磁珠悬液、红细胞裂解液、冲洗液、酶标抗体(抗糖化血红蛋白抗体与辣根过氧化物酶的偶联物溶液)、底物A (过氧化氢溶液)、底物B (四甲基联苯胺溶液)、终止液(硫酸溶液)。试剂盒中所使用的磁性粒子悬液，红细胞裂解液，冲洗液、信号、底物和终止液均是市售常规材料。试剂盒使用步骤:a、全血样本的裂解:将IOOul压积红细胞加入IOml裂解液中裂解以释放出红细胞中的血红蛋白。b、磁珠与样本反应:将IOul裂解后的样本加入到IOul包被有抗血红蛋白抗体的磁珠悬液中，混合均匀后温37摄氏度温育2分钟后，用配套冲洗液冲洗。C、加入酶标抗体:将IOul酶标抗体溶液加入到吸附有血红蛋白的磁珠重悬液中。温育2分钟。用配套冲洗液冲洗后。d、加入50ul底物A、50ul底物B为温育2分钟后加入50ul终止液终止反应。e、完成反应后,放入酶标仪进行读数。实施例2.试剂盒组成:试剂盒包括盒体、试剂瓶、瓶垫、合页和盒盖，盒体通过合页与盒盖连接，试剂盒为四个，分别放置包被有抗血红蛋白抗体的磁珠悬液、红细胞裂解液、冲洗液和信号溶液(罗丹明与抗糖化血红蛋白抗体的偶联物溶液)。试剂盒使用步骤:a、全血样本的裂解:将IOOul压积红细胞加入IOml裂解液中裂解以释放出红细胞中的血红蛋白。b、磁珠与样本反应:将IOul裂解后的样本加入到IOul包被有抗血红蛋白抗体的磁珠悬液中，混合均匀后温37摄氏度温育2分钟后，用配套冲洗液冲洗。C、加入信号溶液:将IOul信号溶液加入到吸附有血红蛋白的磁珠重悬液中。温育2分钟。用配套冲洗液冲洗后重悬至原体积。e、完成反应后，放入荧光仪进行读数。实施例3试剂盒组成:试剂盒包括盒体、试剂瓶、瓶垫、合页和盒盖，盒体通过合页与盒盖连接，试剂盒为四个，分别放置磁珠悬液(表面为聚苯乙烯的磁珠)、红细胞裂解液、冲洗液、信号溶液(罗丹明与抗糖化血红蛋白抗体的偶联物溶液)。试剂盒使用步骤:a、全血样本的裂解:将IOOul压积红细胞加入I本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测量糖化血红蛋白的试剂盒，其特征在于，包括盒体、试剂瓶、瓶垫、合页和盒盖，盒体通过合页与盒盖连接，所述试剂瓶分别放置磁性粒子悬液，红细胞裂解液和冲洗液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：江应玲，肖江群，王保丹，钟乾兴，曹大烨，汪大明，
申请(专利权)人：英科新创厦门科技有限公司，
类型：实用新型
国别省市：