检测螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素的试纸条制造技术

本实用新型专利技术提供了一种检测螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素的试纸条，试纸条包括微孔试剂和试纸，试纸由底板、附着在底板上依次紧密相连的样品吸收垫、反应膜、吸水垫和保护膜组成，螺旋霉素单克隆抗体-胶体金标记物、链霉素单克隆抗体-胶体金标记物、庆大霉素单克隆抗体-胶体金标记物、新霉素单克隆抗体-胶体金标记物冻干在微孔试剂中，反应膜上具有包被有螺旋霉素半抗原-载体蛋白偶联物、链霉素半抗原-载体蛋白偶联物、庆大霉素半抗原-载体蛋白偶联物、新霉素半抗原-载体蛋白偶联物构成的四条检测线印迹和包被羊抗鼠抗抗体构成的质控线印迹。本实用新型专利技术试纸条具有便携性好，灵敏度高，检测时间短等特点。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

检测螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素的试纸条
本技术涉及一种检测牛奶中螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素的试纸条。技术背景链霉素、庆大霉素、新霉素属于氨基糖苷类抗生素，被广泛应用于动物疾病的治疗，由于这些药物具有神经毒性和肾脏毒性，在动物食品中的残留会影响人类健康，欧美国家及我国均要求其限量使用。螺旋霉素为大环内酯类抗生素，可用于治疗由革兰氏阳性菌和某些革兰氏阴性菌引起的耳、鼻、喉和呼吸道感染。由于肝胆系统是乙酰螺旋霉素排泄的主要途径，故严重肝功能不全患者慎用该品。农业部第235号文件《动物性食品中兽药最高残留限量》中规定链霉素在牛奶中残留限量为200yg/L，庆大霉素在牛奶中残留限量为 200 μ g/L，新霉素在牛奶中残留限量为500μ g/L。欧盟在动物源性食品最高残留限量规定 2377/90/EC规定螺旋霉素在牛奶中最大残留限量为200 μ g/kg。目前，氨基糖甙类抗生素、大环内酯类抗生素残留监控中免疫测定法仍是最常见的分析手段，免疫分析方法与仪器检测方法相比，样品前处理过程较简单，适合进行大规模现场检测等。胶体金免疫层析试纸条已广泛用于药物残留检测中，具有 操作简便、快速、不需要任何设备等优点，目前已成为免疫学检测发展方向之一。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种灵敏度高、成本低、操作简单、检测时间短的检测螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素的试纸条。本技术的试纸条，其包括冻干有螺旋霉素单克隆抗体-胶体金标记物、链霉素单克隆抗体-胶体金标记物、庆大霉素单克隆抗体-胶体金标记物、新霉素单克隆抗体-胶体金标记物的微孔试剂和试纸，试纸由底板、附着在底板上依次紧密相连的样品吸收垫、反应膜、吸水垫和保护膜组成，所述反应膜上具有包被羊抗鼠抗抗体构成的质控线印迹“ I ”，包被有螺旋霉素半抗原-载体蛋白偶联物、链霉素半抗原-载体蛋白偶联物、庆大霉素半抗原-载体蛋白偶联物、新霉素半抗原-载体蛋白偶联物构成的四条检测线印迹， 这四条检测线印迹平行。样品吸收垫位于底板始端，吸水垫位于底板末端，四条检测线和质控线平行，均呈与试纸的长相垂直的条带状，质控线位于距离吸水垫末端(底板末端)3.7cm 处，距离质控线由近及远分别为四条检测线TpTyI^T1,四条检测线间距分别为0.5cm。试纸样品吸收垫为检测端，粘贴有保护膜，保护膜上有MAX标记线，微孔试剂上具有微孔塞。为了便于运输和使用，试纸条盛装于具有密封盖的试剂桶中，试剂桶放置于具有固定用具的盒体中。本技术试纸条中试纸底板可为PVC底板或其他硬质不吸水的材料；样品吸收垫可为吸滤纸或全血滤膜；吸水垫为吸水纸；反应膜可为硝酸纤维素膜；保护膜为PE材质保护膜；试剂桶为塑料试剂桶；固定用具为硬质支撑材料；盒体为硬纸盒。本技术试纸条具有如下有益效果:1.灵敏度高。螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素快速检测试纸条以胶体金标记 高亲和力的单克隆抗体为基础制备而成，金标抗体中金颗粒与抗体分子之间无价健形成， 二者通过异性电荷间的范德华力相结合，胶体金对单克隆抗体特异性和亲和力影响很小， 且具有较高的标记率。将螺旋霉素单克隆抗体-胶体金标记物、链霉素单克隆抗体-胶体 金标记物、庆大霉素单克隆抗体-胶体金标记物、新霉素单克隆抗体-胶体金标记物冻干在 微孔试剂中，在检测过程中，能够使金标抗体与待检样品液充分接触，充分反应，从而减少 误差，增加整个体系的反应灵敏度。因此，本技术试纸条具有较高的特异性和灵敏度。 本试纸条对牛奶中螺旋霉素检测限为20 μ g/L、链霉素检测限为80 μ g/L、庆大霉素检测限 为20 μ g/L、新霉素检测限为500 μ g/L。2.显示检测结果形象、直观准确。检测时试纸以检测线是否显示红色线“ I ”印 迹作为阳性和阴性标记，即当硝酸纤维素膜上的质控线和检测线显示红色线“ I ”印迹表示 在被检测样本液中药物含量低于试纸条对药物的最低检测限，当质控线显示红色线“ I ”印 迹，而检测线不显示红色线“ I ”印迹，表示被检测样本液中药物含量高于或等于试纸条对 药物的最低检测限；结果判定形象、直观、准确、简单明了，不容易出现结果误判。[0011 ] 3.成本低，投资少。使用本技术试纸条，使现场检测一步到位，成本低廉，投资 少，见效快。4.易于大范围推广应用。试纸条操作简单，能较好满足牛奶检测的需求，具有广阔 的市场前景和较大的经济、社会效益。附图说明图1为本技术试纸结构示意图；图2为本技术试纸俯视图；图3为本技术微孔试剂图；图4a_4k为本技术试纸检测结果判定图；图5为本技术试剂桶结构示意图；图6为本技术固定用具俯视图；图7为本技术盒体与固定用具侧视图。具体实施方式一、螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素检测试纸条的组装制备I)试纸样品吸收垫1、反应膜2、吸水垫3和保护膜7依次按顺序黏贴在所述底板6上， 样品吸收垫位于底板始端，吸水垫位于底板末端，样品吸收垫的末端与反应膜始端相连，反 应膜的末端与吸水垫相连，样品吸收垫的始端与底板的始端对齐，吸水垫的末端与底板的 末端对齐，试纸样品吸收垫为检测端，粘贴有保护膜，保护膜上印有MAX标记线，检测线4-1 包被有螺旋霉素半抗原-载体蛋白偶联物，检测线4-2包被有链霉素半抗原-载体蛋白偶 联物，检测线4-3包被有庆大霉素半抗原-载体蛋白偶联物，检测线4-4包被有新霉素半抗 原-载体蛋白偶联物，质控线5包被有羊抗鼠抗抗体。底板为PVC底板，样品吸收垫为全血滤膜，反应膜为硝酸纤维素膜，吸水垫为吸水纸，保护膜为PE材质保护膜。2)微孔试剂微孔试剂8具有微孔塞9，微孔试剂中冻干有螺旋霉素单克隆抗体-胶体金标记物、链霉素单克隆抗体-胶体金标记物、庆大霉素单克隆抗体-胶体金标记物、新霉素单克隆抗体-胶体金标记物。3)将I)试纸和2)微孔试剂组装成试纸条，装入具有密封盖的塑料试剂桶10，将塑料试剂桶放置于盒体12内的固定用具11中。二、试纸条的使用待检牛奶样品溶液滴加200 μ I到微孔中，混匀后，室温(20°C -25°C)孵育5min， 将印有“MAX”线端朝下插入孵育后的微孔试剂后计时，室温孵育5min，观察结果。三、检测结果分析药物在样本中的含量高于或等于试纸条对其的最低检测限时，药物单克隆抗体-胶体金标记物分别与药物结合，金标抗体上的抗原结合位点被封闭，从而因为竞争反应，不会与药物半抗原-载体蛋白偶联物结合检测线不出现红色条带。阴性样本在检测过程中由于缺少抗原抗体竞争反应，将会在检测线和质控线上出现红色条带。如图4a_4k所/Jn ο阴性:当质控线C显示一条红色条带，检测线T1-T4均显示出红色条带，判为阴性， 如图4a所示。阳性:当质控线C显示一条红色条带，而检测线T1-T4不显色，表示牛奶中螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素浓度分别等于或高于试纸条对螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、 新霉素的检测限，判为阳性，如图4b所示。螺旋霉素阳性:当质控线C显示一条红色条带，而检测线T1不显色，表示牛奶中螺旋霉素浓度等于或高于试纸条对螺旋霉素的检测限，判为阳性，如图4c所示。链霉素阳性:当质控线C显示一条红色条带，而检测线T2不显色，表示牛奶中链霉素浓本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素的试纸条，其特征在于试纸条包括微孔试剂和试纸，试纸由底板、附着在底板上依次紧密相连的样品吸收垫、反应膜、吸水垫和保护膜组成，所述样品吸收垫位于底板始端，吸水垫位于底板末端，所述反应膜上建立的质控线印迹位于距离吸水垫始端3.7cm处，距离质控线由近及远分别为四条检测线印迹T4、T3、T2、T1，四条检测线间距分别为0.5cm。

【技术特征摘要】
1.一种检测螺旋霉素、链霉素、庆大霉素、新霉素的试纸条，其特征在于试纸条包括微 孔试剂和试纸，试纸由底板、附着在底板上依次紧密相连的样品吸收垫、反应膜、吸水垫和 保护膜组成，所述样品吸收垫位于底板始端，吸水垫位于底板末端，所述反应膜上建立的质 控线印迹位于距离吸水垫始端3.7cm处，距离质控线由近及远分别为四条检测线印迹T4、 T3、T2、T1,四条检测线间距分别为0.5cm。2.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于所述反应膜上具有包被羊抗鼠抗抗体构成 的质控线印迹“ I ”，包被有螺旋霉素半抗原-载体蛋白偶联物、链霉素半抗原-载体蛋白偶 联物、庆大霉素半抗原-载体蛋白偶联物、新霉素半抗原-载体蛋白偶联物构成的四条检测 线印迹，这四条检测线印迹平行。3.如权利要求2所述的试纸条，其特征在于所述四条检测线和质控线平行，均呈与试 纸的长...

【专利技术属性】
技术研发人员：何方洋，冯才伟，杨秀贤，刘叶，吴小胜，赵正苗，汪善良，
申请(专利权)人：北京勤邦生物技术有限公司，
类型：实用新型
国别省市：