VEGF结合分子制造技术

本发明专利技术涉及一种VEGF结合分子，优选VEGF结合的免疫球蛋白单一可变域(如VHH及域抗体)，含有其的药物组合物及其在治疗与VEGF所介导血管发生的效应相关的疾病中的用途。编码VEGF结合分子的核酸、宿主细胞及其制备方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及人治疗的领域，尤其是癌症治疗的领域，以及适于该治疗中的药物和组合物。现有技术如US2008/0014196及W02008101985中所概述，血管生成涉及于大量疾病(包括实体瘤及转移)及眼病的发病机制中。最重要的促血管生成因子之一为血管内皮生长因子(VEGF)，亦称作VEGF-A或血管渗透因子(VPF)。VEGF属于包括胎盘生长因子(PlGF)、VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, VEGF-E 及 VEGF-F 的基因家族。人 VEGF 的单一基因的 mRNA 的交替剪接产生至少六种同种型(VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF183、VEGF189 及 VEGF206)，VEGF165系最丰富的同种型。已识别两种与VEGF相互作用的VEGF酪氨酸激酶受体(VEGFR)，即VEGFR-1 (亦称作FIt-1)及VEGFR-2 (亦称作KDR或FIK-1)。VEGFR-1对VEGF具有最高亲和性，而VEGFR-2 对 VEGF 具有稍微较低亲和性。Ferrara (Endocrine Rev.2004，25:581-611)提供VEGF的详细说明，与其受体的相互作用及其在正常及病理过程中的功能可参见Hoeben等人 Pharmacol.Rev.2004,56:549-580。已报导VEGF为正常及异常两种血管发生的关键调控子(Ferrara及Davis-Smyth,Endocrine Rev.1997,18:4-25 ；Ferrara J.MoL Med.1999，77:527-543)。与促进血管形成过程的其它生长因子相比，VEGF在对血管系统内的内皮细胞的高特异性中是独特的。VEGF mRNA由大多数人肿瘤过表达。在肿瘤生长的情形下，血管发生似乎对自增殖至赘瘤形成的转变、及 为肿瘤的生长及转移提供营养至关重要(Folkman等人，1989，Nature339-58)，其容许肿瘤细胞与正常细胞相比获得生长优势。因此，抗血管发生疗法已成为若干类型肿瘤的重要治疗选择。所述疗法聚焦于阻断VEGF途径(Ferrara等人，NatRev Drug Discov.2004 年 5 月；3(5):391-400)。VEGF亦与眼病有关。VEGF在眼液中的浓度与患有糖尿病及其它缺血相关性视网膜病变的患者中的血管的活性增殖的存在高度相关。此外，最近研究已证实VEGF在受年龄相关性黄斑变性(AMD)侵袭的患者中的脉络膜新生血管膜中的定位。亦在各种炎性病症中观察到VEGF上调。VEGF与RA(血管发生在其中起到显著作用的一种炎性疾病)的致病机理相关。VEGF及其在血管发生及不同过程中的作用的阐明，已提供治疗性干预的潜在新目标。VEGF的功能受阻断或防止VEGF受体酪氨酸激酶活化的小分子抑制(Schlaeppi及Wood, 1999, Cancer Metastasis Rev.，18:473-481)且因此干扰 VEGF 受体信号转导途径。含有细菌或植物毒素的细胞毒性缀合物(conjugate)可抑制VEGF对肿瘤血管发生的刺激效应。例如，VEGF-DT385毒素缀合物(与VEGF165融合或化学缀合的白喉毒素域)有效抑制活体内肿瘤生长。肿瘤生长抑制亦可由逆转录病毒通过递送FIk-1突变体或可溶性VEGF受体而达成。已开发中和VEGF的抗体(例如A4.6.1及MV833)用以阻断VEGF结合其受体，且其已显不临床前抗肿瘤活性(Kim 等人,Naturel993, 362:841-844 ；Folkman Nat.Med.1995,1:27-31 ;Presta 等人 Cancer Res.1997, 57:4593-4599 ；Kanai 等人，Int.J.Cancerl998,77:933-936 ;Ferrara 及 Alitalo Nat.Med.1999,5:1359-1364 ;320，340)。关于治疗性抗VEGF 方法试验的综述，参见 Campochiaro and Hackett (0ncogene2003, 22:6537-6548)。已利用A4.6.1 (亦称作贝伐单抗)(Avastin ； Genentech, San Francisco, CA)获得大多数临床经验。W02008101985阐述来自骆驼的、结合VEGF的免疫球蛋白单一可变域(本文所定义VHH或“Nanobodies ”)，及其在治疗特征在于过度和/或病理性血管发生或新血管形成的病状及疾病中的用途。本专利技术的一 个目的是提供新颖的改进的VEGF结合分子。本专利技术的另一目的是提供预防、治疗、减轻和/或诊断所述疾病、病症或病状的方法，其包括使用和/或所述药物及组合物。特别是，本专利技术的目的是提供与目前所用和/或本领域中已知药物、组合物和/或方法相比提供优势的所述药理活性药物、组合物和/或方法。所述优势包括例如出于制造目的、尤其与上述常规抗VEGF抗体或其片段相比改进的治疗和/或药理性质和/或其它有利性质。更特别是，本专利技术的目的是提供新颖的VEGF结合分子，且特别是结合哺乳动物VEGF、尤其是人VEGF的VEGF结合分子，其中所述分子或多肽适于本文所述治疗及诊断目的。本专利技术的另一目的是提供特异性结合VEGF的免疫球蛋白单一可变域。专利技术概述根据第一方面，提供VEGF结合分子、优选结合VEGF的免疫球蛋白单一可变域(如VHH及域抗体)。在另一方面中，本专利技术涉及编码VEGF结合分子的核酸以及含有所述核酸的宿主细胞。本专利技术还涉及含有或包含本专利技术的至少一种VEGF结合分子及任选所述组合物的一或多种其它组份的产物或组合物。本专利技术还涉及制备或生成本文所述VEGF结合分子、核酸、宿主细胞、产物及组合物的方法。本专利技术还涉及本专利技术所述VEGF结合分子、核酸、宿主细胞、产物及组合物的应用及用途，以及预防和/或治疗与VEGF所介导血管发生的效应相关的疾病的方法。本专利技术的所述及其他方面、实施方案、优势及应用将由下文进一步描述而变得明确。定义除非另有指示或定义，否则所有所用术语均具有本领域中的通常含义，该含义将为本领域技术人员所了解。参考例如标准手册，如Sambrook等人，“MolecularCloning:A Laboratory Manual，，(第 2 版)，第 1-3 卷,Cold Spring Harbor LaboratoryPress (1989) ；Lewin, “Genes IV”，Oxford University Press, New York, (1990);及 Roitt等人，“ Immunology”(第 2 版)，Gower Medical Publishing, London, New York (1989),以及本文中引用的一般现有技术；此外，除非另有说明，否则未具体详述的所有方法、步骤、技术及操作均可以且已经以本身已知的方式进行，该方式将为本领域技术人员所了解。亦参考例如标准手册、上述一般现有技术及其中引用的其他参考文献。除非另有说明，否则术语“免疫球蛋白”及“免疫球蛋白序列”在本文中无论是指重链抗体还是指常规4链抗体，均用作一般术语以包括全长抗体、其单个的链以及其所有部分、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：A格希温德，E伯格斯，J伯克尼厄，E德塔维尼尔，J柯尔克曼，P麦切尔斯，
申请(专利权)人：贝林格尔英格海姆国际有限公司，
类型：
国别省市：