本发明专利技术提供一种用鱼皮或鱼骨生产高品质胶原蛋白低聚肽的方法。具体步骤如下：将原料鱼皮或鱼骨经过清洗、破碎后与水按重量比1∶5～20混合并细化处理后杀菌、冷却，同时加入蛋白水解酶和乳酸菌进行第一次水解后经过离心、过滤后分离出未水解的固相部分和水解液，将水解液采用超滤膜进行超滤，将非透过的大分子肽液和一次水解完成后分离的未水解的固相部分混合后，同时加入蛋白酶和乳酸菌进行第二次水解，并经离心分离、过滤后进行超滤，将超滤膜透过的小分子低聚肽液和一次水解后收集的小分子低聚肽一起依次经过纯化，杀菌，浓缩，干燥得到分子量小的蛋白质低聚肽产品。本发明专利技术技术可以有效提高原料蛋白的利用率和产品得率，大幅提高产品质量。
Method for producing high quality collagen oligopeptide by fish skin or fish bone
The invention provides a method for producing high quality collagen oligopeptide by using fish skin or fish bones. The specific steps are as follows: raw fish or fish washed, crushed and water according to the weight ratio of 1: 5 to 20 mixing and thinning processing, sterilization, cooling, adding protease and lactic acid bacteria were first hydrolyzed after centrifugation and filtration to separate the solid part of hydrolysis and hydrolysis, hydrolysis liquid application of ultrafiltration for ultrafiltration membrane, non solid phase peptide liquid through a hydrolysis and separation after the completion of the unhydrolyzed mixture, adding protease and lactic acid bacteria were second hydrolysis, and centrifugation, filtration after ultrafiltration, small molecular peptides of small molecular peptides through liquid ultrafiltration and a collection together after hydrolysis followed by purification, sterilization, concentration, drying to obtain the protein products of low molecular weight peptides. The technology of the invention can effectively improve the utilization rate of the raw material protein and the yield of the product, and greatly improve the quality of the product.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种胶原蛋白肽的制备方法，具体是一种采用鱼皮或鱼骨生产高品质胶原蛋白低聚肽的方法。
技术介绍
胶原蛋白是一种高分子蛋白质，是动物体内含量最多的蛋白质，约占人体蛋白质的25% -33%，相当于人体重的6%，胶原蛋白是一种三维螺旋结构的蛋白质，主要存在于人体皮肤、骨骼、眼睛、牙齿、内脏等部位，是修复各损伤组织的重要原料物质，胶原蛋白可以使皮肤保持弹性与润泽，维持皮肤细腻光滑，在修复皮肤中有明显的功效。胶原蛋白肽是一种以胶原蛋白为原料经蛋白酶水解加工成的，且分子量比蛋白质小得多的肽类，在胶原蛋白肽中含有两个以上十个以下氨基酸的肽叫做胶原蛋白低聚肽，或叫胶原蛋白短肽或胶原蛋白小肽或是胶原蛋白寡肽，具有容易吸收，低过敏性，易溶于水，低粘度，在任何PH下可溶等物理特征，此外它还具有抗氧化、降血压、降血脂、抗菌等多种功效，具有很强的生物活性。由于胶原蛋白低聚肽的分子量小、易于渗透入皮肤中起到促进皮肤胶原代谢和再生的作用，因此已经被广泛应用于医药、食品、日用化工、生物合成等工业领域中，并日益受到消费者欢迎。一般人们生产胶原蛋白制品的原料基本是采用猪、牛等陆生动物的皮、骨中提取，由于陆生动物生存环境恶劣，会导致很多动物疾病，使得从这些陆生动物上提取胶原蛋白存在一些不安全因素。而水生动物相比陆生动物更加安全、卫生、无害，并且含有丰富的蛋白质，所以人们逐渐开始研究从鱼皮、鱼骨等水生动物中提取的胶原蛋白肽。我国是世界第一水产品产量、水产养殖和水产品贸 易大国。目前，我国水产品产量约占世界总产量的38%。2010年我国水产品总量5373万吨，海水产品2797.53万吨，占总产量的52.07%，淡水产品产量2574.47万吨，占总产量的47.93%。在水产品中，海水鱼类906.3万吨，淡水鱼类2225.6万吨，合计3131.9万吨。在水产品加工过程中，会产生大量的鱼骨、鱼皮等下脚料，这些下脚料是提取胶原蛋白良好原料。在提取胶原蛋白肽的加工过程中，酶水解是肽制备过程中的十分关键的环节，通过酶水解将大分子的胶原蛋白分解成分子量较小的胶原蛋白肽。但是目前公开的胶原蛋白肽制备方法中大都是只采用了一次水解，在水解过程中存在水解度不高、蛋白质利用率较低等缺陷，造成很多原料的浪费，而且水解度不高便会出现水解后的蛋白肽分子量较大，而肽分子量的大小对肽产品的品质有重要的影响。天津商学院在2004年12月10日申请的专利号为200410096892.6，专利技术名称为一种高效酶解玉米蛋白制备生物活性低聚肽的技术的中国专利中提到可以进行二次酶解，但是该方法是针对植物蛋白肽的制备，在植物中提取蛋白肽和动物中提取蛋白肽存在很大的区别。除此之外，由于水生动物本身带有很重的腥味，特别是一些深海鱼，腥味更重，所以从鱼中提取胶原蛋白肽如果处理不当便会出现一些异味，产品在风味上欠佳。目前也公开了一些采用水生动物制备胶原蛋白的方法，这些方法涉及到去腥步骤，一般是在水解前采用食盐水等清洗，水解后采用酵母或乳酸菌发酵几个小时等方式去腥，如中国专利申请号:200810029603.9，专利技术名称:一种无苦腥味鱼类蛋白粉的制备方法，中国专利申请号:200610019333.4，专利技术名称:淡水鱼蛋白活性多肽水解液的制备方法，中国专利申请号:201110121718.2 —种脱除海产鱼酶解液腥味的方法等，这些方法增加了处理工序，或者由于处理时间有限，鱼腥味往往不能去除彻底，此外，原料蛋白的利用率不能得到提高，造成生产成本的增加和原料的浪费。
技术实现思路
本专利技术根据现有技术的不足，提供，本专利技术专利采用蛋白酶与乳酸菌联合进行二次水解，可以有效提高原料鱼皮、鱼骨中月父原蛋白的溶出，提闻月父原蛋白的水解利用率和水解度，改善月父原蛋白妝广品的风味，还可以抑制杂菌生长，提高产品品质的作用，并且可以有效控制产品中肽分子量分布，尤其是2肽、3肽等低聚肽的比例大幅增加，提高原料蛋白质的利用率，降低生产成本。本专利技术的技术方案:所 述，其特征在于具体步骤如下:(I)将原料鱼皮或鱼骨经过清洗、破碎后与水按重量比1: 5 20混合，并将混合物送入胶体磨进行微细化处理，使原料鱼皮或鱼骨充分分散均匀，并调制成蛋白质浓度在1% 10%原料液，具体通过在加工前测定原料鱼皮、鱼骨中的蛋白质含量，然后确定加水量来调节蛋白质浓度；(2)将步骤(I)中配制的原料液在70 130°C的条件下杀菌2秒 15分钟，然后冷却到20 60°C之间，冷却采用板式冷却器、管式冷却器或自然冷却；(3)在步骤(2)中杀菌处理后的原料液中加同时加入蛋白水解酶和乳酸菌进行第一次水解，第一次水解的条件为:温度20 60°C，pH2 10，时间2 5小时，蛋白水解酶与原料鱼皮或鱼骨的重量比为0.5% 5 %，乳酸菌接种量按每吨原料液IO9 IO14个菌数加入到原料液中；(4)将步骤(3)中第一次水解后的水解液经过离心、过滤后分离出未水解固相部分和水解液液相部分，并将其分别收集起来；然后将收集的水解液液相部分采用截留分子量为1000 5000Da的超滤膜进行超滤，将超滤膜非透过的大分子肽液和透过的小分子低聚肽液分别收集起来；所述离心和过滤均采用现有的方式，先经过离心分离出水解的蛋白肽液，再进行过滤，得到透明度良好的蛋白质低聚肽液溶液；其中离心以卧螺离心或沉降离心式离心机离心较佳，过滤以板框过滤方式最佳；(5)将步骤(4)中第一次水解后收集的未水解固相部分和超滤后收集的非透过的大分子肽液均匀混合形成第二次水解原料液，并加水控制第二次水解原料液中蛋白质浓度在1% 10%之间，具体是先通过测定未水解固相部分和超滤后收集的非透过的大分子肽液混合物中的蛋白质含量后，再定量加水配制，来调节蛋白质的浓度；(6)在步骤(5)中调制好的第二次水解原料液中同时加入蛋白水解酶和乳酸菌进行第二次水解，第二次水解的条件为 温度20 60°C，pH2-10，时间I 5小时，蛋白水解酶与二次水解原料液中蛋白质的质量比为1% 6%，乳酸菌接种量按每吨第二次水解原料液中IO9 IO14个菌数加入到第二次水解液中；(7)对步骤(6)对第二次水解后的水解液先离心分离、过滤后采用截留分子量为1000 5000Da超滤膜超滤，并将超滤膜透过的小分子低聚肽液收集起来；所述离心和过滤均采用现有的方式，其中离心以卧螺离心或沉降离心式离心机离心较佳，过滤以板框过滤方式最佳；(8)将步骤(4)中第一次水解液超滤后透过的小分子低聚肽液与步骤(7)中第二次水解液超滤后的透过的小分子低聚肽液一起依次经过纯化，杀菌，浓缩，干燥，得到分子量小的蛋白质低聚肽产品。在步骤(3)和步骤(6)中所使用的蛋白水解酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中的一种或其中任意两种混合。在步骤(3)中第一次水解的混合酶为碱性蛋白酶或中性蛋白酶分别与胃蛋白酶或酸性蛋白酶按照I 2: 2 I的质量比混合最佳；步骤(6)中第二次水解的混合酶采用木瓜蛋白酶或风味蛋白酶分别与胃蛋白酶或酸性蛋白酶按照I 3:3 I的质量比混合最佳。在步骤(3)和步骤(6)所使用的乳酸菌为保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus)、干酪乳杆菌(L.casei)、嗜酸本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用鱼皮或鱼骨生产高品质胶原蛋白低聚肽的方法，其特征在于具体步骤如下：(1)将原料鱼皮或鱼骨经过清洗、破碎后与水按重量比1∶5～20混合，并将混合物送入胶体磨进行微细化处理，使原料鱼皮或鱼骨充分分散均匀，并调配成蛋白质浓度在1％～10％原料液；(2)将步骤(1)中配制的原料液在70～130℃的条件下杀菌2秒～15分钟，然后冷却到20～60℃之间；(3)在步骤(2)中杀菌冷却后的原料液中加同时加入蛋白水解酶和乳酸菌进行第一次水解，第一次水解的条件为：温度20～60℃，pH2～10，时间2～5小时，蛋白水解酶与原料鱼皮或鱼骨的重量比为0.5％～5％，乳酸菌接种量按每吨原料液109～1014个菌数加入到原料液中；(4)将步骤(3)中第一次水解后的水解液经过离心、过滤后分离出未水解的固相部分和水解液液相部分，并将其分别收集起来；然后将收集的水解液液相部分采用截留分子量为1000～5000Da的超滤膜进行超滤，将超滤膜非透过的大分子肽液和透过的小分子低聚肽液分别收集起来；(5)将步骤(4)中第一次水解后收集的未水解的固相部分和超滤后收集的非透过的大分子肽液均匀混合形成第二次水解原料液，并加水控制第二次水解原料液中蛋白质浓度在1％～10％之间；(6)在步骤(5)中调制好的第二次水解原料液中同时加入蛋白水解酶和乳酸菌进行第二次水解，第二次水解的条件为：温度20～60℃，pH2?10，时间1～5小时，蛋白水解酶与第二次水解原料液中蛋白质的质量比为 0.5％～5％，乳酸菌接种量按每吨第二次水解原料液中109～1014个菌数加入到第二次水解液中；(7)对步骤(6)对第二次水解后的水解液经过离心分离，并过滤后采用截留分子量为1000～5000Da超滤膜超滤，将超滤膜透过的小分子低聚肽液收集起来；(8)将步骤(4)中第一次水解液超滤后透过的小分子低聚肽液与步骤(7)中第二次水解液超滤后的透过的小分子低聚肽液一起依次经过纯化，杀菌，浓缩，干燥，得到分子量小的蛋白质低聚肽产品。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘良忠，刘亮，刘闪，王梦颖，
申请(专利权)人：武汉工业学院，
类型：发明
国别省市：
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