用于预防和/或治疗癌症的肿瘤抗原BFA5制造技术

本发明专利技术涉及编码多肽的核酸以及该核酸或多肽在预防和/或治疗癌症上的用途。本发明专利技术特别涉及用于癌症免疫治疗的供编码肿瘤抗原的外源基因插入和表达的改良载体。

【技术实现步骤摘要】
用于预防和/或治疗癌症的肿瘤抗原BFA5本申请为2004年4月15日提交的申请号为200480016064.5、专利技术名称为“用于预防和/或治疗癌症的肿瘤抗原BFA5”的申请的分案申请。相关申请本申请要求保护2003年4月15日递交的美国临时申请号60/462，945的优先权。专利
本专利技术涉及一种编码多肽的核酸以及该核酸和/或多肽在预防和/或治疗癌症方面的用途。本专利技术特别涉及用于癌症免疫治疗的供编码肿瘤抗原的外源基因插入和表达的改良载体。
技术介绍
在过去几年中，借助高密度芯片、SEREX、免疫组化(IHC))、RT-PCR、原位杂交(ISH)和激光捕获显微镜几种技术(Rosenberg, Immunity, 1999 ；Sgroi 等，1999, Schena等，1995，OfTringa等，2000)，基于原发肿瘤和正常细胞表达谱的分子识别取得了长足进展，导致了带有肿瘤相关抗原(TAA)的癌症疫苗开发的剧增。TAA是由肿瘤细胞表达或过度表达的抗原，可能具有一种或数种肿瘤特异性，例如，CEA抗原表达于直肠癌、乳腺癌和肺癌。Sgroi等(1999)结合激光捕获显微切割技术和cDNA芯片技术鉴别了几种差异性表达于浸润和转移的肉瘤细胞的基因。数种导入系统如DNA或病毒，可用于人类癌症的治疗性疫苗，能诱导免疫反应并打破对TAA的耐受。通过插入编码T细胞协同刺激分子转基因，如B7.1基因或细胞因子基因，如Y-干扰素(IFN-Y)，白细胞介素-2 (IL-2)或GM-集落刺激因子(GM-CSF)转基因，可提高肿瘤细胞的免疫原性。TAA和细胞因子或协同刺激分子的共表达也显示了在开发有效的治疗性疫苗方面的作用(Hodge等，95，Bronte等，1995，Chamberlain 等，1 996)。在本领域存在有对刺激免疫反应以预防或治疗癌症的有效试剂和方法的需求，本专利技术提供了这样的试剂和方法，这些试剂和方法克服了许多人们在治疗癌症的努力中遇到的困难。专利技术概述本专利技术提供了一个用于病人以预防和/或治疗癌症的免疫原性靶。特别的是该免疫原性靶为肿瘤抗原(“TA”)和/或血管生成相关抗原(“AA”)。在一个实施方案中，该免疫原性靶由SEQ ID NO:5编码或有SEQ ID NO:6的氨基酸序列。在某些实施方案中，TA和/或AA通过质粒或其他导入载体，如重组病毒，以核酸的形式用于病人。TA和/或AA也可和其他的肿瘤抗原(如SEQ ID NO: 1-4)和/或协同刺激分子及佐剂联合给予。附图简述附图说明图1.BFA4cDNA 序列图2.BFA4氨基酸序列图3.BCYl核苷酸㈧和氨基酸⑶序列图4.BFA5cDNA 序列图5.BFA5氨基酸序列专利技术详述本专利技术提供了可用于癌症预防和治疗的试剂和方法。本申请中所有引用的参考资料均通过弓I用结合到本文中。在一个实施方案中，本专利技术涉及到诱导或加强针对一种或多种的肿瘤抗原(“TA”)的免疫反应来预防和/或治疗癌症。在某些实施方案中，一种或多种TA可联合给予。在优选的实施方案中，免疫反应由给予编码肿瘤抗原的核酸载体后引起或由给予肽或多肽形式的肿瘤抗原本身引起。如这里所用 ，“抗原”是一种能在一个被给予了该抗原的宿主体内诱生免疫反应的分子，如一种多肽或它的一部分。免疫反应包括产生与该抗原上至少一种抗原决定簇结合的抗体和/或产生针对表达有该抗原的某一抗原决定簇的细胞的细胞免疫反应。这种反应也可是原有免疫反应的加强，例如诱导更多抗体的产生，或有更高亲合力的抗体的产生，或诱导更有效的细胞免疫反应(如增高T细胞数量或增强T细胞的抗肿瘤作用)。能够诱生免疫反应的抗原又可称为具免疫性或称作免疫原。在本专利技术的描述中，TA可被称为“免疫原性靶”。TA包括了肿瘤相关抗原(TAA)和肿瘤特异性抗原(TSA)，癌性细胞是其来源。TAA是在肿瘤细胞表面的表达高于正常细胞的抗原，或正常细胞只在胚胎期才表达的抗原；TSA是肿瘤细胞特有而正常细胞不表达的抗原。TA还进一步包括了 TAA或TSA、它们的抗原性片段以及保留了它们的抗原性的修饰后的变异体。根据TA的表达模式、功能及基因来源将其分为典型的5类:癌-睾丸抗原(即MAGE, NY-ES-1);黑色素细胞分化抗原(即MelanA/MART-Ι，酪氨酸酶，gplOO);突变抗原(即MUM-1’ p53，CDK-4);过度表达的“自身”抗原(即HER-2/neu, p53);病毒抗原(即HPV,EBV)。为了应用本专利技术，合适的TA指任何一种能够在其表达的宿主体内诱导和增强抗肿瘤免疫的 TA。合适的 TA 包括有:例如，gapl00(Cox 等，Science, 264:716-719 (1994))、MART-1/Me I an A (Kawakami 等，J.Exp.Med.，180:347-352 (1994)))、gp75(TRP_l) (Wang等，J.Exp.Med., 186:1131-1140 (1996))、酪氨酸酶(Wolfel 等，EU7-.J.1namufzo1.,24:759-764(1994) ；W0 200175117 ;W0 200175016 ;W0200175007))、NY-ESO-l (TO 98/14464 ；WO 99/18206)、黑色素瘤蛋白聚糖(Hellstrom 等，J.1mmunol.，130:1467-1472 (1983))、MAGE 家族抗原(S卩，MAGE_1、2、3、4、6、12、51 ；Van der Bruggen 等，Science,254:1643-1647(1991);美国专利 6, 235, 525 ；CN 1319611)、BAGE 家族抗原(Boel 等，Imnauszity, 2:167-175 (1995))、GAGE 家族抗原(即，GAGE_1、2 ;Van den Eynde 等，J.Exp.Med., 182:689-698(1995);美国专利 6，013，765)、RAGE 家族抗原(即，RAGE-1 ;Gaugler 等，Inaozunogenetics,44:323-330(1996);美国专利 5,939,526)、N-乙酸氛基葡萄糖转移酶V (Guilloux 等，J.Exp.Med.，183:1173-1183 (1996))、pl5 (Robbins 等，J.1mnzuno1.154:5944-5950(1995))、β-联蛋白(Robbins 等，J.Exp.Med.，183:1185-1192 (1996))、MUM-KCoulie 等，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA, 92:7976-7980 (1995))、细胞周期依赖的蛋白激酶 _4(CDK4) (Wolfel 等，Science，269:1281-1284 (1995))、p21_ras (Fossum 等，7.Cancer56:40-45(1994))、BCR-abl (Bocchia 等，Blood,85:2680-2684(1995))、p53 (Theobald等，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA, 92:11993-11997 (1995))、pl85HER2/n本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种表达载体，含有SEQ?ID?NO:5或图4中所示的核酸序列；一段核酸序列，编码SEQ?ID?NO:6或图5中所示的氨基酸序列；或其片段。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：N贝林斯泰因，S加利钱，C罗维特，M帕林顿，A佩迪察克，L拉德文伊，D辛桑胡，
申请(专利权)人：圣诺菲·帕斯图尔有限公司，
类型：发明
国别省市：