杏皮渣醋醋酸菌及其分离纯化方法和应用方法技术

技术编号:8858735 阅读:460 留言:0更新日期:2013-06-27 02:15
本发明专利技术公开了一种杏皮渣醋醋酸菌及利用该菌种制备杏皮渣醋的方法,菌种的名称为:醋酸杆菌(AcetobacterpomorumstrainLMG18848),属于醋酸单胞菌属,命名为Ac11;已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.6938,并有存活证明;易在酸性且含酒精的环境中生长,菌落形态为边缘整齐、表面光滑、乳白色、凸起的圆形菌落,直径为0.5~1mm;个体形态为短杆状,呈单、对、堆或链状排列,为革兰氏阴性菌。本发明专利技术从杏皮渣自然发酵液中筛选出生长良好的醋酸菌株,是一种耐受性好、发酵性能优良的醋酸菌种。利用该菌株生产杏皮渣醋具有杏果典型的风味。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种杏皮渣醋醋酸菌及利用该菌种制备杏皮渣醋的方法,属于微生物及发酵工业领域。
技术介绍
杏皮渣是杏加工产品的副产品。新疆是我国杏的主要产区。据2010年统计,新疆杏产量达到13.23X IO4吨,约占新疆水果总量的22.29%。随着一些深加工企业的诞生,新疆杏产业得到大力发展,已经成为较大的浓缩杏浆生产基地,产品几乎全部出口。浓缩杏浆已成为我国浓缩果汁(浆)类产品中产量和出口量排在浓缩苹果汁后居第二位的品种。生产I吨杏浓缩浆需2.7吨原料杏,同时产杏渣0.225吨。截止2011年新疆浓缩杏浆年产量达11万吨左右,杏皮渣年产量约为2.5万吨。随着杏皮渣的大量积累,大部分杏皮渣作为饲料或肥料应用,杏皮渣没有得到充分利用,附加值低,造成了严重的资源浪费。杏皮渣醋及其 醋饮料的研发是利用杏皮渣的有效途径之一。优选适合于酿制杏皮渣醋的专用醋酸菌,研究和创新杏皮渣醋发酵工艺是目前急需解决的问题。杏皮渣醋的开发对于提高杏皮渣的附加值,促进杏产业的发展具有重要的意义。我国对杏皮渣综合利用的研究主要集中在新疆,新疆轮台国家果树资源圃的李文慧、徐麟研究了杏皮渣酿制杏果醋饮料的工艺,确定了酿制杏皮渣果醋的最佳工艺参数:果醋酿制过程中添加剂SO2含量< 30 mg/L,醋酸发酵结束后,加入食盐的浓度为1.0%。 1.5%。,采用115 0C/2 min超高温瞬时杀菌。新疆大学的李雪娟研究了杏浓缩浆渣果醋饮料的工艺。当前果醋生产使用的菌种大都是食醋菌种ASJ.41 (A.rancens L )恶臭醋酸杆菌浑浊变种和沪酿1.01醋酸杆菌(/L 1vaniense L),不仅产酸能力和耐酒精能力都有待提高,而且发酵果醋形成的风味也不佳。适宜于杏皮渣醋酿造的醋酸菌尚属空白。因此急需选育优良的杏皮渣醋专用醋酸菌种。关于果醋专用菌种的研究不多。陈伟等在2003年从苹果醋酸发酵母液中选育果醋菌种,可以较好地适用于苹果醋的酿造。而其它有关醋酸菌菌种的研究多数是以食醋醪为菌源进行筛选,或直接将食醋菌W (A.rancens Z)恶臭醋酸杆菌浑浊变种和沪酿1.01醋酸杆菌(A lovaniense L.)进行高酸驯化、诱变选育。日本的正井博之用多层琼脂培养基保温培养,成功地分离出了能制造20%以上的高酸度醋的优良菌。国内的洪俊华等进行了生淀粉酿醋醋醅中耐高温且产酸率高的醋酸菌的分离筛选,施安辉等对洛口醋醅中优势醋酸菌株进行分离和鉴定,另外臧晋、黄仲华、郭丽萍、祖国仁、王电垒、候红漫、杨军、陈伟等科研工作者对醋酸菌分离进行了的大量试验研究,并取得了一定的效果,获得了一些优良醋酸菌。我国食醋生产工艺占主导地位的是传统的固态发酵法和液面静置发酵法,深层液体发酵法占我国食醋总产量的6%。利用固态发酵法和半固-液态发酵方法生产果醋的研究较少,大多数是利用液体发酵法生产果醋。栾丽杰、李莉、牟建楼、姚云游等利用液体深层发酵法分别对柿醋、苹果醋、枣醋、桑果醋进行了研究,牟建楼、朱正军、卢克、韩晓青等采用液体表面发酵法分别对枣醋、杨梅醋、黄金梨醋进行了研究。李湘利、冉旭采用分光光度计法分别研究了壳聚糖对金丝枣醋和葡萄醋的澄清作用。结果表明:壳聚糖可以提高金丝枣醋、葡萄醋的澄清度。周杨使用果胶酶、纤维素和半纤维素复合酶澄清木瓜果醋发酵液,效果较好。史经略研究了用明胶溶液来解决果醋的非生物返混。张善宝、赵欣宇采用硅藻土分别对红枣果醋和金红苹果果醋澄清进行了研究。李华兰采用超滤技术对桑果醋澄清进行了研究。马永昆对不同年份镇江香醋香气成分及其形成机理进行了研究,采取固相微萃取提取香气成分,共得到52种风味物质;解华东对岐山高粱醋陈化期香气成分进行研究,酸类物质为主要风味物质;鲁周民采用不同发酵方式对柿果醋香气成分进行研究,共分离挥发性成分63种;崔涛研究了砂梨及其果醋的香气成分,共获得15种果醋香气成分;王永苓对沙棘果醋香气成分进行了研究,共分离了 82种香气成分,其中酯类占挥发物质的56.35%。目前还没有发酵性能优良、耐受性好的杏皮渣醋专用醋酸菌。
技术实现思路
本专利技术需要解决的技术问题就在于克服现有技术的缺陷,提供一种杏皮渣醋醋酸菌及利用该菌种制备杏皮渣醋的方法,本专利技术从杏皮渣自然发酵液、食醋醋醅、枣醋中筛选出一批生长良好的醋酸菌株,进一步从中优选出一株编号为Acll的产酸菌株,经鉴定为醋酸菌,利用该菌株确定的发酵工艺能生产杏皮渣醋。为解决上述问题,本专利技术采用如下技术方案:本专利技术提供了一种杏皮渣醋醋酸菌,菌种的名称为:醋酸杆菌Uatehcter属于醋酸单胞菌属,命名为Acll ;已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC N0.6938,保藏日期为2012年12月06日;保藏单位地址为:北京市朝阳区大屯路中国科学院微生物研究所,邮政编码为:100101 ;并有存活证明。该菌种易在酸性且含酒精的环境中生长,菌落形态为边缘整齐、表面光滑、乳白色、凸起的圆形菌落,直径为0.5 1_ ;个体形态为短杆状,呈单、对、堆或链状排列,为革兰氏阴性菌。本专利技术同时公开了一种所述的杏皮渣醋醋酸菌的分离纯化方法,包括下列步骤: 1)醋酸菌的富集培养: 50g杏皮渣加入250mL水中,30°C下培养15d,得杏皮渣自然发酵液;取杏皮渣自然发酵液、枣醋和醋醅各1 0g,分别放入装有90ml富集培养基的三角瓶中,30°C、110r/min培养3d,得到醋酸菌的富集培养液; 富集培养基的重量组成为:酵母浸粉1%、葡萄糖1%、重量浓度为0.02%的结晶紫0.5%、制霉素(5X IO5 u) 5mg/ml、无水乙酉享3%(v/v)、余量为水; 2)醋酸的定性试验:取含有醋酸菌的富集培养液IOml以转速3000r/min,5min离心后,除去醋酸菌等菌体沉淀,吸取5ml无菌体的上清液,以2.5mol/l和0.lmol/1 NaOH溶液中和至pH 7.0,煮沸,加入质量浓度为5%的氯化铁液5 7滴,如果形成红褐色沉淀确定有醋酸; 3)醋酸菌平板分离纯化: 取醋酸菌富集培养液25ml放入装有225ml生理盐水的三角瓶中,依次稀释至10_7(ml/ml)分别取250 μ 110_6(ml/ml)和I(T7(ml/ml)的稀释液涂布于3个碳酸I丐平板和3个溴甲酚紫平板,在30°C培养至菌落产生透明圈,挑选钙溶解圈大的单个菌落采用涂布法进一步纯化,分离出单个菌落接种于碳酸钙分离培养基斜面上,30°C培养2d,得到醋酸菌Acll,4°C保藏; 碳酸钙分离培养基的重量组成为:葡萄糖1%、酵母浸粉1%、165°C干热灭菌30min的碳酸钙2%、无水乙醇3%(v/v)、琼脂1.8%、余量为水。本专利技术还公开了一种所述的杏皮渣醋醋酸菌的应用方法,利用所述的杏皮渣醋醋酸菌制备杏皮渣醋,具体步骤为: (O原料预处理:选择无霉变、黄色干杏皮渣,去除杂物,并用清水将杏皮渣上的泥土、微生物洗净待用; (2)制备杏皮渣 汁:将洗净的干杏皮渣放入50°C的温水中,重量份配比为杏皮渣:温水为1:5,浸泡4h后,过滤取汁,调整可溶性固形物为18Brix,100°C水浴灭菌5min ; (3)酿酒酵母种子液和产酯酵母种子液的制备: 取斜面保藏的酿酒酵母CGMCC本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种杏皮渣醋醋酸菌,其特征在于,菌种的名称为:醋酸杆菌(Acetobacter?pomorum?strain?LMG?18848),属于醋酸单胞菌属,命名为Ac11;已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC?No.6938,并有存活证明;该菌种易在酸性且含酒精的环境中生长,菌落形态为边缘整齐、表面光滑、乳白色、凸起的圆形菌落,直径为0.5~1mm;个体形态为短杆状,呈单、对、堆或链状排列,为革兰氏阴性菌。

【技术特征摘要】
1.一种杏皮洛醋醋酸菌,其特征在于,菌种的名称为:醋酸杆菌pomorumstrain LMG 18848),属于醋酸单胞菌属,命名为Acll ;已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC N0.6938,并有存活证明; 该菌种易在酸性且含酒精的环境中生长,菌落形态为边缘整齐、表面光滑、乳白色、凸起的圆形菌落,直径为0.5 1_ ;个体形态为短杆状,呈单、对、堆或链状排列,为革兰氏阴性菌。2.如权利要求1所述的杏皮渣醋醋酸菌的分离纯化方法,其特征在于,包括下列步骤: 1)醋酸菌的富集培养: 50g杏皮渣加入250ml水中,30°C下培养15d得杏皮渣自然发酵液,取杏皮渣自然发酵液、枣醋和醋醅各10g,分别放入装有90ml富集培养基的三角瓶中,30°C、110r/min培养3d,得到醋酸菌的富集培养液; 富集培养基的重量组成为:酵母浸粉1%、葡萄糖1%、重量浓度为0.02%的结晶紫0.5%、制霉素(5X IO5 u) 5mg/ml、无水乙酉享3%(v/v)、余量为水; 2)醋酸的定性试验: 取含有醋酸菌的富集培养液IOml以转速3000r/min,5min离心后,除去醋酸菌等菌体沉淀,吸取5ml无菌体的上清液,以2.5mol/l和0.lmol/1 NaOH溶液中和至pH 7.0,煮沸,加入质量浓度为5%的氯化铁液5 7滴,如果形成红褐色沉淀确定有醋酸; 3)醋酸菌平板分离纯化: 取醋酸菌富集培养液25ml放入装有225ml生理盐水的三角瓶中,依次稀释至10_7(ml/ml)分别取250 μ 110_6( ml/ml)和10_7(ml/ml)的稀释液涂布于3个碳酸I丐平板和3个溴甲酹紫平板,在30°C培养至菌落产生透明圈,挑选钙溶解圈大的单个菌落采用涂布法进一步纯化,分离出单个菌落接种于碳酸钙...

【专利技术属性】
技术研发人员:傅力张富县
申请(专利权)人:韩山师范学院
类型:发明
国别省市:

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