本发明专利技术提供了一种用于鸡枞菌菌丝规模化培养的液体培养基及其应用,所述培养基按如下质量配比配制:木质纤维素粉50~70份,水30~50份,磷酸二氢钾0.0001~0.1份,氯化钠0.0001~0.1份,氯化钙0.0001~0.1份,氯化钴0.0001~0.1份,硫酸镁0.0001~0.1份,硫酸锰0.0001~0.1份,硫酸亚铁0.0001~0.1份,硫酸铜0.0001~0.1份,硫酸锌0.0001~0.1份,硫酸铝钾0.0001~0.1份,酒石酸铵0.0001~0.1份,硼酸0.0001~0.1份,柠檬酸0.0001~0.1份,甲酸0.0001~0.1份,乙酸0.0001~0.1份,反丁烯二酸0.0001~0.1份,丁二酸0.0001~0.1份,丙烯-1,2,3-三羧酸0.0001~0.1份,愈创木酚0.0001~0.1份;本发明专利技术液体培养基鸡枞菌量身定制,可用于室内利用木质纤维素大规模培养鸡枞菌菌丝,成本低、效率高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于鸡揪菌菌丝规模化培养的液体培养基及其应用。
技术介绍
鸡揪菌(Termitomyces albuminosus)隶属于担子菌亚门层菌纲伞菌目口蘑科,是一种名贵的野生食用菌。人们对鸡揪菌的科学研究已有两百多年的历史,1799年德国自然科学家J.D.Koning在印度东部地区的白蚁巢内首先发现了菌圃上着生着许多能够形成小白球形状的真菌,也就是后来被称作鸡揪菌的真菌。对白蚁而言,鸡揪菌的菌丝体是它们的主要食物,它们培养或“栽培”鸡揪菌菌丝体的目的也在于此。鸡揪菌的菌丝在整个蚁巢中广泛分布,当白蚁去采食时,它又被进一步生长所取代。白蚁将未消化的食物堆在菌圃上作为鸡揪菌生长的营养,白蚁则以鸡揪菌侵染过的菌圃为食物。研究发现,白蚁巢内的菌圃由工蚁的半消化物、木质纤维、土壤颗粒、鸡揪菌菌丝、工蚁分泌物和其它成分组成。根据分析,白蚁菌圃中含有蛋白质6.44%、脂肪0.48%、总糖0.24%、粗纤维 13.9%、灰分 26.6%、P2O50.28%、Cal.86%、K2Ol.56%、氨基酸 18.7%。白蚁巢内温度稳定在22±2°C,最低为15°C,最高不超过28°C。稳定的温度给鸡揪菌菌丝生长发育创造了良好条件。白蚁巢内的空气相对湿度为80%-90%。菌圃土壤含水量为46.75%-58.35%。另外,巢内白蚁的 呼吸代谢活动,产生了较高浓度的二氧化碳,CO2的浓度可达到3-5%,高浓度的CO2更有利于鸡揪菌菌丝的生长,而对其子实体和其它真菌的生长不利。同时,白蚁排泄的大量蚁酸、乙酸、丙烯-1,2,3-三羧酸、反丁烯二酸、丁二酸等,调节了菌圃的PH,使pH稳定在4-4.5,这也对菌圃中其他真菌和细菌的生长产生了抑制作用,使得鸡揪菌菌丝能快速生长。由于鸡揪菌能降解木质纤维素,因此它在生物能源工业中具有十分重要的作用。然而,虽然人们对鸡揪菌Termitomyces albuminosus的人工培养做了大量研究,知道鸡揪菌在人工条件下培养需要一定的CO2浓度、高湿度及酸性的条件,但迄今为止,由于对植物种类组成、金属离子种类及浓度、酸的种类及浓度、菌圃共生细菌等在鸡揪菌生长发育过程中的作用还缺乏了解,还没有一种利用木质纤维素作为主要营养基大规模培养鸡揪菌菌丝的方法。
技术实现思路
为了实现工业化的应用,本专利技术提供了一种在室内利用木质纤维素大规模培养鸡揪菌菌丝的液体培养基及其应用。本专利技术采用的技术方案是:一种用于鸡揪菌菌丝规模化培养的液体培养基,按如下质量配比配制:木质纤维素粉50 70份水30 50份磷酸二氢钾0.000丨 O, I份氯化钠0.000丨 0.1份氯化钙0.0001-0,1 #氯化钴0.擁01~0.1 #硫酸镁0.0001 0.1份硫酸锰0.0001~0.1份硫酸亚铁0.0001 OJ份破酸铜0.0001-0.1份硫酸锌0.0001^0.1份硫酸铝钾0.0001-0.1份酒石酸铵OiXMM CU份硼酸0.0001 0.1份 梓檬酸0.0001 0.1份 曱酸0.0001 0.1份乙酸0.000丨 0.丨份反丁稀二酸0.0001 0.丨份丁二Λ0.0001~CU 份丙雄-1,2,3-三数酸0.0001~0.1份愈创木酚0.000 i 0.1份;所述木质纤维素粉为白杨木粉与五月艾粉的1:1混合物。白杨Populustomentosa Carr木粉从锯木场获得,在阳光下晒干过10目筛备用;五月艾粉为从野外收集的五月艾Artemisia indica Wi lld植株在太阳下晒干后用粉碎机粉碎过10目筛的干粉。在本配方中,木质纤维素粉为菌丝生长发育提供碳源和能量物质,金属盐类为菌丝生长发育提供必需的金属离子,酸类化合物为菌丝生长发育提供必需的酸性环境,愈创木酚为菌丝生长发育过程中的漆酶分泌提供信号,水为菌丝生长发育提供必需的水份和维持必需的湿度。优选的,所述培养基按如下质量配比配制: 木质纤维素粉50 60份 水30 40份 嶙酸二氢钟0,001 0.05份 氯化钠0.001 0.05份 氯化钙0.00i~0.05份 氯化钴0.001 0.05份 硫酸镁0.001-0.05 # 硫酸锰0.00卜0.05份 硫酸亚铁0.001 0.05份 硫酸刺0.001-0.05# 硫酸锌0.001-0.05 # 硫酸铝钾0.001 0.05份 酒石酸铵0.001 0.05份 硼酸0.00丨 0.05份 柠檬酸0.001 0.05份 甲酸0.00卜0.05份 乙酸0.001 0.05份 反丁婦二酸0.001 0.05份 丁二酸0.00丨 0.05份 丙烯-1,2,3-三羧酸0.001-0.05份 愈创木酚0.001 0.05份》更为优选的,所述培养基按如下质量配比配制`:`木质纤维素粉50-55份水30 35 价磷酸二氢钾0.005~0.05 #氯化钠0.005 0.05份氯化钙0.005 0.05份氯化钴0.001~0.01翁硫酸镁0.005 0.05份硫酸锰0.005~0.05 #硫酸亚铁0J054.05输硫酸铜0.01-0.05份硫酸锌0.014.05翁硫酸铝钾0.0054.05份酒石酸铵0.005-0.05翁硼酸0.0050.03份杆檬酸0.005 0.02份甲酸OJO1402翁乙酸0.001~0.02 份反丁烯二酸0.001 0.02份丁二 ft0.001~0.02 #丙晞-1,2,3-三羧酸0,001-0.02翁愈创木酚0.001 0.02份。本专利技术还涉及所述的液体培养基在鸡揪菌菌丝规模化培养中的应用。具体的,所述应用为:按配方配制液体培养基,加入鸡揪菌菌液和共生菌液,于12°C 30°C下培养30天,获得鸡揪菌发酵液,发酵液经过滤,滤液即为鸡揪菌菌液,该菌液即可用于木质纤维素的降解与鸡揪菌的商品化生产。共生细菌液为从黑翅土白蚁菌圃中分离、培养得到的共生细菌,这些细菌包括:苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)、芽孢杆菌属(Bacillussp.) 的4种菌和双酶梭菌(Clostridium bifermentans)等,用于清除菌丝生长发育过程中产生的某些有害的次生化合物和抑制其它真菌的滋生并促进鸡揪菌菌丝的生长。鸡揪菌菌液为利用马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养的鸡揪菌菌丝水溶液,为菌丝规模化培养提供菌种。本专利技术的有益效果主要体现在:(I)直接用多种植物的干粉混合物作为鸡揪菌菌丝培养的碳源,成本省,同时,也可促进自然与废弃资源的利用;(2)在培养液中,同时加入多种金属盐类化合物,为菌丝生长发育过程中各种酶类的合成提供必需的金属离子,使得鸡揪菌菌丝能在木质纤维素培养基上正常生长发育;(3)在培养液中,同时加入多种酸类化合物,一方面为鸡揪菌菌丝的生长提供了良好的酸性环境,另一方面这样的酸性环境限制了其它菌类的生长,再一方面为鸡揪菌菌丝的生长提供了信息物质;(5)在培养液中,加入愈创木酚,可诱导鸡揪菌产生漆酶,促进作为菌种的鸡揪菌菌丝能迅速破坏植物干粉混合物中的木质素,使得鸡揪菌菌丝能有足够的营养进行生长、发育和繁殖,从而实现鸡揪菌菌丝的快速生产;(4)在培养过程中加入由多种菌圃共生细菌构成的共生细菌液,一方面抑制了培养过程中果蝇等微小昆虫的生本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于鸡枞菌菌丝规模化培养的液体培养基,按如下质量配比配制:所述木质纤维素粉为白杨木粉与五月艾粉的1∶1混合物。FDA00002964865400011.jpg
【技术特征摘要】
1.一种用于鸡揪菌菌丝规模化培养的液体培养基,按如下质量配比配制:木质纤维素粉50~70份水30 50份 磷酸二氢钾0.0001 0.1份 氯化鈉0.0001-0.1份 氯化钙0.0001-0.1份 氯化钴0.0001 CU份 硫酸镁0.0ooi~ai # 硫酸铥0.00014.1价 硫酸亚铁0.0001 CU份 硫酸铜0.0001-0.1份 硫酸锌0.0001~4U价 硫酸铝钾0.0001 0.1 # 酒石酸铵0.000 K0.丨份 硼酸0.000卜0.〖价 抒檬酸0.00014,1 # 甲 ft0.W014.1 输 乙酸0.0001~CU份 反丁烯二酸0.00014U # 丁二黢0.0001-0.1 输 丙缔-1,2,3-三羧酸0.0001-0.1 # 愈创木.0.0001 0.1份;所述木质纤维素粉为白杨木粉与五月艾粉的1:1混合物。2.如权利要求1所述的液体培养基,其特征在于所述培养基按如下质量配比配制:木质纤维素粉50 60份水30 40份 磷酸二氢钾0.001 0.05份 氯化钠0.001 0.05份 氯化鈣0.00丨 0.05份 氯化鈷0.00〗 0.05份 硫酸凝OJO 1-0.05.硫酸锰0.001-0.05份 破酸亚铁0.001-0.05份 硫酸摘0.001 0.05份 硫酸锌0.001-0.05份 硫酸铝钾0....
【专利技术属性】
技术研发人员:莫建初,
申请(专利权)人:浙江大学,
类型:发明
国别省市:
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