本发明专利技术公开了一种大枣叶活性提取物及其在制备防治肝损伤药物或保健品中的应用。本发明专利技术首次采用大孔树脂耦合聚酰胺树脂，然后通过制备液相制备大枣叶精制提取物，较传统的分离纯化方法分离效率更高，且分离得到的活性成分含量高，生物活性强，安全性高。经实验研究表明，大枣叶提取物可显著降低CCl4、D-GalN和乙醇所致肝损伤模型小鼠血清ALT、AST活性及肝组织MDA含量，增强肝脏SOD活性，对肝损伤具有很好的防治功效。因此大枣叶及大枣叶提取物有望开发成为新一代安全有效，用于防治肝损伤的药物或保健品，同时也为大枣叶废弃资源变废为宝及枣树资源综合利用提供了途径。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种植物提取物的提取技术及其应用，具体涉及大枣叶提取物的提取技术及其在制备防治肝损伤药物或保健品中的应用。
技术介绍
肝脏是机体最重要的脏器之一，肝脏疾病是临床上较为常见的疾病。因此，肝脏疾病一直是医学科学重点研究的对象之一。肝损伤是多种肝脏疾病共有的一种特点突出的病理状态，严重威胁着人类健康。各种有害因素诸如药物、病毒、酒精、生物等可能致使肝功能有不同程度的损害，从而使肝脏的解毒、排泄功能及贮备和再生能力降低，肝血流量减少，代谢负荷加重，从而发生内环境紊乱，肝细胞坏死和凋亡，进而造成肝损伤。全世界有数十亿人曾经或正忍受着肝损伤的痛苦。肝损伤的长期存在往往会导致肝纤维化，是进而诱发肝硬化、肝功能衰竭、甚至肝癌的重要始动因素。因此预防和治疗肝细胞损伤是临床上肝病治疗的重要环节之一，是抑制肝纤维化、肝坏死、肝硬化以及肝癌等疾病发生和发展的基础。因此研究肝损伤防治药物具有重要临床意义。目前临床常用的保肝药物，或因为价格昂贵，或因使用不便，或具有较大副作用，使用受到限制。因此，进一步寻找用于预防和治疗肝损伤的有效药物仍然是当今药理学工作者的努力方向。大枣叶系鼠李科枣属植物枣(Ziziphus jujuba Mill.)的干燥叶。本草大枣叶作为药用可用于治疗小儿发热、疮疖、热痱、烂脚、烫火伤等症。关于大枣叶的现代研究较少，除少量作为茶饮原料开发应用外，较少被利用，多作为废弃资源丢弃。目前尚未见以大枣叶为原料制备活性提取物的技术，也未见以大枣叶为主要组成组分应用于防治肝损伤的药品或保健食品的报道。
技术实现思路
专利技术目的:本专利技术的目的是为了克服现有技术的不足，在大枣叶原有用途的基础上，开发其新的临床用途，提供大枣叶在防治肝损伤中的应用，实验结果表明，其具有很好的防治肝损伤的作用。本专利技术的另一个目的在于公开一种大枣叶提取物的制备方法。技术方案:为了实现以上目的，本专利技术采取的技术方案为:一种大枣叶提取物，它是通过以下步骤制备得到:(I)取大枣叶拣选、洗净、干燥后放入提取罐中，加6 12倍量的50% 95%乙醇，加热回流I 3次，过滤、合并提取液，浓缩至无醇味后，得大枣叶的醇提物备用；(2)取步骤(I)得到的大枣叶醇提物，加I 5倍量水，上大孔树脂柱，先分别用水和浓度为10%乙醇洗脱，再用浓度为60% 95%的乙醇洗脱，收集60% 95%乙醇洗脱液、浓缩、减压干燥得到大枣叶活性部位粗提物 ，备用；(3)取步骤(2)得到的大枣叶活性部位粗提物干法上聚酰胺柱，先分别用水和20%乙醇洗脱，再用浓度为70% 95%乙醇洗脱，并收集70% 95%乙醇洗脱液，浓缩，经减压干燥得到大枣叶活性部位精制提取物；(4)取步骤(3)得到大枣叶活性部位提取物采用制备液相进一步富集得到精制大枣提取物，经检测，总三萜和总黄酮含量>80%。作为优选方案，以上所述的大枣叶提取物，步骤(I)中提取条件为加10倍量浓度为80%的乙醇，加热到80°C持续回流2小时。该方法可保证提取溶液和药材之间达到足够大的浓度差，增加目标成分的溶出率，因为乙醇浓度太低，大枣叶中的三萜酸类活性成分得率太低，乙醇浓度太高大枣叶中的黄酮苷类成分转移率太低，且脂肪酸、叶绿素等杂质转移率增加。因此本专利技术根据活性成分的性质，确定乙醇的浓度和用量，得到的提取物目标成分溶出率高，活性更强。作为优选方案，以上所述的大枣叶提取物，步骤(2)中所述的大孔吸附树脂为非极性大孔吸附树脂。作为更优选方案，其中步骤(2)中所述的非极性大孔吸附树脂为DlOl型大孔吸附树脂，收集浓度为90%乙醇洗脱液；步骤(3)中收集浓度为90%乙醇洗脱液。本专利技术以现代提取分离手段和药理活性筛选相结合的方法确定大枣叶最佳防治肝损伤活性提取物，经大量实验研究表明，通过非极性大孔吸附耦合聚酰胺柱色谱，采用不同浓度的乙醇洗脱，有利于大枣叶中的黄酮类和三萜类活性成分的富集，除去糖类、鞣质、叶绿素等杂质，得到高活性成分比例及活性更强的防治肝损伤活性提取物，经HPLC-ELSD及HPLC-DAD检测该活性部位中三萜酸类和黄酮类成分部含量可达70%。作为优选方案，以上所述的大枣叶提取物，步骤(3)中所述的聚酰胺树脂的粒径为60-80目。作为优选方案，以上所述 的大枣叶提取物，步骤(4)中所述的制备液相富集的色谱条件为:色谱柱为安捷伦反相C18柱，流动相为甲醇-0.5%磷酸水溶液梯度洗脱，梯度洗脱的条件为:0至35分钟，甲醇的含量由5%上升到45%，35至60分钟甲醇的含量由45%上升到83%，检测波长为285nm，流速为5ml/min，检测器为二极管陈列检测器。大枣叶及其提取物在制备防治肝损伤药物或保健品中的应用。本专利技术经过大量实验研究表明，大枣叶及其提取物能够有效降低肝损伤模型动物血清ALT、AST活性及肝组织MDA含量，增强肝脏SOD活性，表明大枣叶具有明显的肝脏保护作用，可应用于制备防治肝损伤的药品或保健食品。本专利技术所述的大枣叶提取物在制备防治肝损伤的药品或保健食品中的应用，将大枣提取物和药学上可接受的载体制成片剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、汤剂、糖浆剂、合剂、煎膏剂或浸膏剂剂型的药物。本专利技术提供的大枣叶提取物制成胶囊剂时把大枣叶提取物和载体乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。将本专利技术提供的大枣叶提取物制成片剂时，把大枣叶提取物和乳糖或玉米淀粉，需要时加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，然后压片制成片剂。本专利技术提供的大枣叶提取物制成颗粒剂时，把大枣叶提取物和稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂。本专利技术提供的大枣叶提取物制成注射液时，取大枣叶提取物加入生理盐水溶解然后加入活性碳，搅拌均匀，80°C加热30分钟，过滤，调节pH值，用垂熔玻璃漏斗或其它滤器过滤至澄明，灌装，在100至115°C灭菌30分钟制成注射液。本专利技术提供的大枣叶提取物制成其它剂型时，可按药学常规方法制备得到。有益效果:本专利技术在大枣叶原有应用的基础上进行新的用途开发，同时制备其活性提取物，和现现有技术相比具有以下优点:(I)本专利技术主要以生产大枣过程中产生的废弃物大枣叶为原料，制备其活性提取物，开发其新用途，实现变废为宝，提升了枣树的可利用价值，实现了枣树资源的综合利用，具有很好的经济效应。(2)本专利技术提供的大枣叶防治肝损伤活性提取物，实验结果表明可显著降低CCl4致肝损伤模型小鼠、乙醇致肝损伤模型小鼠、D-氨基半乳糖致肝损伤模型小鼠血清ALT、AST活性及肝组织MDA含量，增强肝脏SOD活性，表明该活性提取物不仅对化学性肝损伤、长期饮酒致肝损伤具有具有明显的肝脏保护作用，同时对病毒性肝炎所致肝损伤也具有保护作用。因此大枣叶及其提取物有望开发成为新一代安全有效，用于防治多种类型肝损伤的药物或保健品，同时也为大枣叶废弃资源变废为宝及枣树资源综合利用提供了途径。(3)本专利技术提供的制备方法可操作性强，尤其是在分离过程中本专利技术首次采用大孔树脂和聚酰胺树脂联用，并采用制备液相进一步富集纯化，提取分离效率高，分离得到的大枣叶提取物活性成分含量高，抗肝损伤活性更强，不良反应更低，并且制备工艺中能量消耗少，生产成本低，对环境无污染。具体实施例方式下面结合具体实施例进一步阐明本专利技术，应理解这些实施例仅用于说本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种大枣叶提取物，其特征在于，通过以下步骤制备得到：?(1)取大枣叶拣选、洗净、干燥后放入提取罐中，加6~12倍量的50%~95%乙醇，加热回流1~3次，过滤、合并提取液，浓缩至无醇味后，得大枣叶的醇提物，备用；(2)取步骤(1)得到的大枣叶醇提物，加1~5倍量水，上大孔吸附树脂柱，先分别用水和浓度为10%乙醇洗脱，再用浓度为60%~95%的乙醇洗脱，收集60%~95%乙醇洗脱液、浓缩、减压干燥得到大枣叶活性部位粗提物，备用；(3)取步骤(2)得到的大枣叶活性部位粗提物干法上聚酰胺柱，先分别用水和20%乙醇洗脱，再用浓度为70%~95%乙醇洗脱，并收集70%~95%乙醇洗脱液，浓缩，经减压干燥得到大枣叶活性部位提取物；(4)取步骤(3)得到大枣叶活性部位提取物采用制备液相进一步富集得到精制大枣提取物。
【技术特征摘要】
1.一种大枣叶提取物，其特征在于，通过以下步骤制备得到: (I)取大枣叶拣选、洗净、干燥后放入提取罐中，加6 12倍量的509Γ95%乙醇，加热回流广3次，过滤、合并提取液，浓缩至无醇味后，得大枣叶的醇提物，备用； (2)取步骤(I)得到的大枣叶醇提物，加广5倍量水，上大孔吸附树脂柱，先分别用水和浓度为10%乙醇洗脱，再用浓度为60°/Γ95%的乙醇洗脱，收集60°/Γ95%乙醇洗脱液、浓缩、减压干燥得到大枣叶活性部位粗提物，备用； (3)取步骤(2)得到的大枣叶活性部位粗提物干法上聚酰胺柱，先分别用水和20%乙醇洗脱，再用浓度为709Γ95%乙醇洗脱，并收集709Γ95%乙醇洗脱液，浓缩，经减压干燥得到大枣叶活性部位提取物； (4)取步骤(3)得到大枣叶活性部位提取物采用制备液相进一步富集得到精制大枣提取物。2.根据权利要求1所述的大枣叶提取物，其特征在于，步骤(I)中提取条件为加10倍量浓度为80%的乙醇，加热到80°C持续回流2小时。3.根据权利要求1所述的大枣叶提取物，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭盛，段金廒，钱大玮，宿树兰，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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