一种测定饲料中维生素C含量的方法技术

技术编号:8833058 阅读:263 留言:0更新日期:2013-06-22 19:43
本发明专利技术公开了一种测定饲料中包膜维生素C的方法。该方法是采用伏安极谱法,包括下述步骤:1)将待测样品即含维生素C的饲料用pH值3-5的乙酸缓冲溶液配制成溶液,然后进行超声提取,得到待测样品溶液;2)采用标准加入法测定样品中vc的浓度,将样品及标准加入的样品均以-0.2V为起始电位、0.3为终止电位进行电位扫描,绘制各溶液的极谱图(即I-U曲线)并记录极谱波峰电流值;绘制工作曲线,用外推法即可得到待测样品中的维生素C浓度。本发明专利技术方法重现性好,灵敏度高,准确性好,检测限低,为测定饲料中的痕量维生素C提供了一种全新的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种测定饲料中维生素C含量的测定方法。
技术介绍
维生素C是水产养殖中必需添加的维生素添加剂之一。维生素C含量的检测方法大多采用氧化还原滴定法(碘量法和靛酚蓝法),这一类方法的特点是所用设备成本低廉,操作简便,只适合检测单一的维生素C制品和简单基质样品中维生素C含量的测定,多用于医药和食品行业。目前饲料行业多用碘量测定法维生素C原料制品,以此来判定其质量。对于维生素预混合饲料和配合饲料中维生素C的检测尚未颁布方法标准,虽有人发表过“配合饲料中维生素C测定的分光光度法”、也有人试图用高效液相色谱技术解决这一难题,但由于维生素C极易被氧化的特点和饲料基质的复杂,加之检测过程繁琐和设备昂贵,因此无法实现饲料中这一关键成分检测。分光光度法针对不同配合饲料样品方法无可重复性,液相色谱法最好也只能得到70%的添加同收率。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种测定饲料中维生素C的方法。本专利技术所提供的测定饲料中维生素C的方法,是采用伏安极谱法(即应用伏安极谱仪进行检测),包括下述步骤:I)将待测样品即含维生素C的饲料用pH值3-5的乙酸缓冲溶液配制成溶液,然后进行超声提取,得到待测样品溶液;2)分为下述a)或b):a)采用标准加入法,取数份等体积的所述待测样品溶液,并向其中加入不同量的维生素C标准溶液,其中一份样品溶液中不加标准溶液,然后用pH值3-5的乙酸缓冲溶液定容至相同体积,对所得的溶液均以-0.2V为起始电位、0.3为终止电位进行电位扫描,绘制各溶液的极谱图(即1-U曲线)并记录极谱波峰电流值;b)采用标准加入法,先取所述样品溶液用pH值3-5的乙酸缓冲溶液稀释后,以-0.2V为起始电位、0.3V为终止电位进行电位扫描,绘制极谱图(即1-U曲线)并记录极谱波峰电流值;然后依次向所述稀释后的溶液中加入维生素C标准溶液,每次加入标准溶液混合均匀后,均以-0.2V为起始电位、0.3V为终止电位进行电位扫描,绘制极谱图(即1-U曲线)并记录极谱波峰电流值;3)以加入的维生素C的浓度为横坐标,对应的极谱波峰电流值为纵坐标,绘制工作曲线,用外推法(延长工作曲线和横坐标相交的数的绝对值),即可得到待测样品中的维生素C浓度。其中,所述饲料中的维生素C既可以是维生素C原粉,也可以是包膜维生素C(如市售的包膜维生素C:惠尔C)。因包膜维生素C的缓释效应可以有效提高其利用率,因而在目前的饲料中被广泛添加使用。所述饲料具体可为添加维生素C的水产饲料,如鱼饲料等。步骤I)中所述乙酸缓冲溶液优选pH值为4.6的乙酸缓冲溶液。配制方法如下:取IL去离子水溶液,添加0.1mol的乙酸和0.1mol的乙酸钠,混匀即得。步骤I)中所述超声提取的功率为60-80W,提取时间为3-10min。步骤I)中所述待测样品溶液中的维生素C浓度应不小于0.5mg/L,才能保证准确测定。步骤2)中所述电位扫描的扫描速率为0.0050 0.01V/s,具体可选择0.0062V/So步骤2)中通常取三份等体积的待测样品溶液,一份O标准添加,另两份加入不同量的维生素C标准液。由于饲料中的成分比较复杂且待测维生素C的含量低,而标准加入法恰恰适用于样品组分复杂的情况。采用该方法能消除基体效应带来的影响,有利于提高测定的准确度。为了得到较为精确的外推结果,多采用三个点(包括待测样溶液本身)来作外推曲线,并且第一份加入的标准溶液与待测溶液的浓度之比应适当。增量值的大小可这样选择,使第一个加入量产生的波峰电流值约为试样原波峰电流值的一半。本专利技术采用伏安极谱法测定饲料(包括添加包膜维生素C)中的维生素C含量,样品处理简单,操作过程省时,避免了繁琐的操作过程造成的维生素C氧化;应用标准添加法工作曲线排除了样品的基质干扰;采用灵敏度高的电化学检测器加之检测是在屏蔽氧气的条件下完成,方法回收率高,检测结果准确。对该方法的精密度和准确度进行分析,结果证明利用本专利技术方法测定饲料中的维生素C含量,重现性好,灵敏度高,准确性好,检测限低,为准确测定饲料中的维生素C提供了一种全新的方法。附图说明图1为待测样品及标准外加样品的极谱图。图2为待测样品及标准外加样品的极谱波峰电流值-浓度工作曲线图。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术的方法进行说明,但本专利技术并不局限于此。下述实施例中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法;所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。实施例1、伏安极谱法测定配饲料中维生素C的含量1、仪器1.伏安极谱仪(瑞士万通797) ;2.超声波仪(KQ-300VDV) ;3.电子分析天平(METTLER-AE240) ;4.pH 计(METTLERT0LED0)。5.离心机(ANKE TDL-5-A)2试剂及样品2.1乙酸缓冲溶液pH = 4.6,配制方法如下:1L去离子水溶液中添加0.1mol的乙酸和0.1mol的乙酸钠,混匀即可2.2L-抗坏血酸标准溶液:CS = 0.lmg/mL(需测定当天配制)2.3惠尔C(北京英惠尔生物技术有限公司出售的包膜维生素C)2.4含维生素C的配合饲料样品,其中VC标示量为不小于80mg/kg (北京英惠尔生物技术有限公司)2.5空白配合饲料样品(即上述含包膜维生素C的配合饲料样品除去包膜维生素C的饲料样品)3、方法准确称量5.0Og样品,加入IOOml的乙酸缓冲溶液,摇匀,80W超声提取5min,5000r/min(4200Xg)离心10分钟,收集上清液(待测)。取20ml乙酸缓冲溶液,加100 μ I样品溶液,按照0.0062V/s的扫描速率以-0.2V为起始电位、0.3V为终止电位进行电位扫描,依序2次加入100 μ I L-抗坏血酸标准溶液(Cs = 0.lmg/mL),同样品溶液进行电位扫描测定,绘制各样品的极谱图(即1-U曲线)并记录极谱波峰电流值。采用外推法,计算待测样品中维生素C的浓度。3.1方法线性本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定饲料中维生素C的方法,包括下述步骤:1)将含维生素C的饲料用pH值为3?5的乙酸缓冲溶液配制成溶液,然后进行超声提取,得到待测样品溶液;2)分为下述a)或b):a)采用标准加入法,取数份等体积的所述待测样品溶液,并向其中加入不同量的维生素C标准溶液,其中一份样品溶液中不加标准溶液,然后用pH值3?5的乙酸缓冲溶液定容至相同体积,对所得的溶液均以?0.2V为起始电位、0.3V为终止电位进行电位扫描,绘制各溶液的极谱图并记录极谱波峰电流值;b)采用标准加入法,先取所述待测样品溶液用pH值3?5的乙酸缓冲溶液稀释定容得到稀释液,对所述稀释液以?0.2V为起始电位、0.3V为终止电位进行电位扫描,绘制极谱图并记录极谱波峰电流值;然后依次向所述稀释定容后的溶液中加入维生素C标准溶液,每次加入标准溶液混合均匀后,均以?0.2V为起始电位、0.3V为终止电位进行电位扫描,绘制极谱图并记录极谱波峰电流值;3)以加入的维生素C标准溶液浓度为横坐标,对应的极谱波峰电流值为纵坐标,绘制工作曲线,用外推法得到待测样品中的维生素C浓度。

【技术特征摘要】
1.一种测定饲料中维生素C的方法,包括下述步骤: 1)将含维生素C的饲料用pH值为3-5的乙酸缓冲溶液配制成溶液,然后进行超声提取,得到待测样品溶液; 2)分为下述a)或b): a)采用标准加入法,取数份等体积的所述待测样品溶液,并向其中加入不同量的维生素C标准溶液,其中一份样品溶液中不加标准溶液,然后用pH值3-5的乙酸缓冲溶液定容至相同体积,对所得的溶液均以-0.2V为起始电位、0.3V为终止电位进行电位扫描,绘制各溶液的极谱图并记录极谱波峰电流值; b)采用标准加入法,先取所述待测样品溶液用pH值3-5的乙酸缓冲溶液稀释定容得到稀释液,对所述稀释液以-0.2V为起始电位、0.3V为终止电位进行电位扫描,绘制极谱图并记录极谱波峰电流值;然后依次向所述稀释定容后的溶液中加入维生素C标准溶液,每次加入标准溶液混合均匀后,均以-0.2V为起始电位、0.3V为终止电位进行电位扫描,绘制极谱图并记录极谱波峰电流值; 3)以加入的维生素C标准溶液浓度为横坐标,对应的极谱波峰电流值为纵坐标,绘制工作曲线,用外推法得到待测样品中的维生素C浓度。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤I)中所述乙酸缓冲溶液为PH值4.6的乙酸缓冲溶液。3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:步骤I)中所述超声提取的功率为60-80W,提取时间为3-10min。4.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘庆生任泽林范志影曾虹张萍马书宇赵维香田园李慧黄吉波
申请(专利权)人:北京英惠尔生物技术有限公司中国农业科学院饲料研究所
类型:发明
国别省市:

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