用于鉴定高风险冠状动脉疾病患者的脂质组学标志制造技术

本发明专利技术特别提供一种方法及其应用，所述方法通过检测生物样品中的脂质浓度或脂质比率并将其与对照进行比较来预测严重的CVD并发症，例如AMI或CVD死亡，本发明专利技术还鉴定出了特异性脂质标志，所述脂质标志在预测这些CVD并发症时比目前采用的临床标志具有更高的特异性和灵敏度。本发明专利技术还提供一种针对所述脂质的抗体，以及该抗体在预测、诊断、预防和/或治疗CVD并发症中的应用。本发明专利技术还涉及用于预测和/或诊断CVD并发症的包含脂质和/或其抗体的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及利用脂质水平来预测和预防严重的与心脏血管疾病相关的致命性并发症的方法和应用。本专利技术因此提供了一种用于鉴定和治疗高风险冠状动脉疾病患者的手段。这些方法包括分析生物样品的脂质水平并将其与对照进行比较。
技术介绍
在全世界范围内，心脏血管疾病(CVD)是死亡率和发病率的最主要的原因之一，且流行程度一直在增加。CVD用来对影响人体的心脏、心脏瓣膜、血液和脉管系统的多种病况进行分类。这种病况之一是冠状动脉疾病(CAD)。在早期有目的的开始对CVD相关的致命并发症(例如急性心肌梗死(AMI)和死亡)采取预防措施将非常有益，并且能够在降低CVD患者的死亡率和发病率方面提供巨大契机。出于此目的，关键的是准确地鉴定出具有发展CVD并发症的风险的个体。然而，传统的风险评估未能意识到相当大比例的高风险患者，而是将很大比例的个体归类为中度风险，从而使患者管理不可靠。因此，非常需要可以进一步改进对高风险CVD的风险评估的其他方案。出于此目的，本专利技术人已评估了新颖的脂质组学(Iipiodmic)生物标志作为CVD患者的致命心脏血管疾病事件的预后工具的作用。已使用血浆或血清总胆固醇浓度、LDL-胆固醇浓度或HDL-胆固醇浓度作为用于CVD/CAD风险预测的金标准生物标志。然而，很多冠状动脉疾病(CAD)或急性心肌梗死(AMI)患者的LDL-C水平在推荐范围内，这说明需要对剩余风险采取额外诊断措施。之前的大规模群体研究可明显看出，这些测量值与CAD风险和CAD终点(例如AMI或心脏血管性死亡)有关。因此，到目前为止提出的预防性治疗方案是降低LDL-C浓度(主要通过抑制素(statin)治疗)，且最近还尝试了升高HDL-C(例如，通过CETP抑制剂)。另一方面，还观察到，一半的AMI患者实际上确实具有正常的LDL胆固醇水平，而且在经抑制素治疗的患者中，尽管LDL-C有所下降，但仍有较高的剩余风险。此外，最近的出版文献已证明，作为LDL颗粒上主要表面蛋白的载脂蛋白B (apB)的血浆水平与LDL-C的血浆水平(所述颗粒中胆固醇的量)相关，并且认为其各自为正风险因素。作为HDL颗粒上主要表面蛋白的载脂蛋白Al的血浆水平与HDL-C的血浆水平(所述颗粒中胆固醇的量)彼此相关，并且认为其各自为负风险因素。重要的是，对于给定的正常apoB，已观察到较低的LDL-C与较高的AMI风险相关，这支持了以下观点:平均每个颗粒胆固醇含量低的LDL颗粒(小而致密的LDL颗粒)特别危险。因此，看上去可能的是，LDL-C与LDL颗粒所携带的更危险的分子直接相关，LDL-C仅是间接的风险度量。因此，寻找与危险的(例如，致命的)心脏血管疾病事件直接相关的分子(例如，某些脂质物质(lipid species))非常重要。脂质代谢物失衡是血脂异常和随后的动脉粥样硬化(其最严重的表现形式是易损的动脉粥样硬化斑块)的很可能的原因。动脉粥样硬化斑块是包含多种脂质的复杂的分子形成物。然而，除富含脂质的斑块或LDL胆固醇以外，还有其他因素使得脂质成为CVD研究中引人注目的一类分子。脂质受到严密调控，这使得在所研究的有机体的当前状态下脂质组学数据具有鲁棒性且富含信息。此外，脂质是生物学系统的终点(culmination point)之一，与预报因子相比，其更多地是实际的结果。将脂质组学数据与适合的生物数据库临床资料组合在一起为生物标志的发掘提供了良好机遇。另外，脂质组学能够用作药物开发和正在兴起的治疗诊断学中的功效和安全性的计量工具。脂质组学生物标志是CVD领域中真正的伴随诊断的首要候选物，并且还为改进的转译医学提供了很多契机。斑块组成部分和脂蛋白组分(认为其将脂质运载至损伤形成部位)现在可以用脂质组学研究来解决，所述研究将脂质的结构和组成与功能关联起来，并由此与疾病发病机制关联起来。虽然人体内的脂质媒介物数量巨大，但它们的鉴定和定量测定因质谱法和脂质生物化学的进步而变得便捷，如今，质谱法和脂质生物化学能够对若干个脂质类别的数百种分子脂质物质(总称为脂质组(Iipidome))同时进行高通量的鉴定和定量测定(Ejsing CS 等:Global analysis of the yeast lipidome by quantitativeshotgun mass spectrometry.Proc Natl Acad Sci U S A2009,106:2136-2141;StahlmanM 等:High-throughput shotgun lipidomics by quadrupole time-of-flight massspectrometry.J Chromatogr B Analyt Technol BiomedLife Sci 2009 HiukkaA 等:ApoCII1-enriched LDL in type 2 diabetes displays altered lipidcomposition, increased susceptibility for sphingomyelinase，and increasedbinding to biglycan.Diabetes2009, 58:2018-2026;Linden D 等:Liver-directedoverexpression of mitochondrial glycerol-3-phosphate acyItransferase resultsin hepatic steatosis, increased triacylglycerol secretion 和 reduced fatty acidoxidation.FASEB J2006，20:434-443.)。脂质组学研究鉴定脂质的细胞分布，并描述其生化机制、相互作用和动力学。重要的是，脂质组学使脂质组的确切化学组成得到了定量(HanX，Gross RW:Global analyses of cellular lipidomes directly from crude extractsof biological samples by ESI mass spectrometry:a bridge to lipidomics.JLipidRes2003，44:1071-1079)。由于脂质组学的高灵敏度和选择性，如今甚至能够对最小的样品量进行分析。目前，本领域中的大量脂质数据将脂质以总组成(sum composition)的形式呈现，即磷脂酉先胆减(PC) 34:1 (Brugger B 等！Quantitative analysis of biological membranelipids at the low picomole level by nano-electrospray ionization tandem massspectrometry.ProcNatl Acad Sci USA1997，94:2339-2344)，其中，分子脂质和所连接的脂肪酸尾仍未得到鉴定。对分子脂质物质(例如PC16:0/18:1)的鉴定(Ekroos K等:Chartingmolecular composition of pho本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.06.20 EP 10006399.9;2010.06.21 US 61/356,6751.一种用于确定受试对象是否有风险发展一种或多种CVD并发症的方法，所述并发症例如为急性心肌梗死(AMI)和/或CVD死亡，所述方法包括: a.确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的浓度表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大，所述并发症例如为AMI或CVD死亡， 其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自:Cer(dl8:1/20:0)、LacCer (dl8:1/20:0)、Cer (dl8:1/24:1)、LacCer (dl8:1/24:1)、PS0-18:2/16:0-烯基、PS 0-16:1/18:2-烷基、总 Cer、总 LacCer、GlcCer (dl8:1/24:1)、LacCer(dl8:1/22:O)和 Cer(dl8:1/18:O)； 且其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自:总 PC、PC16:0/20: 4、Cer (dl8:0/24:0)、总 LPC、CE14: O、CE20: 3、CE17:1、PC16:0/20: 3、LPC18:1、PC18:0/20:3、PC18:0/18:1和 Cer(dl8:0/22:O)； 或 b.确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质比率，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的脂质-脂质比率表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大，所述并发症例如为AMI或CVD死亡， 其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质比率选自: GlcCer (dl8:1/26:1)/ 总 CE、Cer (dl8:1/24:1)/ 总 PC、Cer (dl8:1/24:1)/PC16:0/20: 4、Ce r (dl8:1/20:0) /PC16:0/20: 4、LacCer (dl8:1/20:0) /PC16:0/20: 3、总Cer/ 总 PC、总 LacCer/ 总 PC、LacCer (dl8:1/20:0)/PC18:1/18: 2、PS 0-16:0/18:2-烯基 / 总 PSO、 Cer(dl8:l/18:0)/PC16:0/20:4、 LacCer(dl8:1/20:O)/ 总 LPC 和LacCer (dl8:1/20:0)/PC16:0/20:4 ； 且其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质比率选自: Cer (dl8:0/24:0)/Cer(dl8:1/24:1)、Cer (dl8:0/22:O)/Cer(dl8:1/24:1)、DAG16:0/18:1/ 总 DAG、Cer (dl8:0/24:0)/Cer (dl8:1/22:0)、Cer (dl8:0/24:0) / 总 CE、Cer(dl8:0/24:0)/Cer (dl8:1/24:1)、Cer (dl8: 0/24:0) / 总 Cer、Cer (dl8:0/24: 0) /Cer (dl8:1/18:0) , Cer (dl8:0/24:0)/PS 0-16:0/18:2-烯基、Cer (dl8:0/24:0) /LacCer(dl8:1/24:0)、Cer (dl8: 0/22: 0)/Cer(dl8:1/18:0)、Cer(dl8:0/24: 0) /Cer(dl8:1/22:0)、Cer (dl8: 0/22:0)/Cer(dl8:1/20:0)、Cer(dl8:0/22:0)/PS0-16:0/18:2-烯基、Cer (dl8:0/22:0)/PS 0-16:1/18:2-烷基、GlcCer (dl8:1/26:0) /LacCer (dl8:1/20:0)、总 LPC/ 总 LacCer 和 GlcCer (dl8:1/26:0) /LacCer (dl8:1/22:0)； 或 c.确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比率，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的脂质-临床浓度比率表明所述受试对象发展一种或多种CVD并发症的风险增大，所述并发症例如为AMI或CVD死亡， 其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-临床浓度比率选自:Cer (dl8:1/20:0)/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、Cer (dl8:1/24:1)/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、LacCer (dl8:1/20:0) / 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、总 Cer/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、总 LacCer/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、Cer (dl8:1/18:0)/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、LacCer (dl8:1/22:0)/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、LacCer (dl8:1/20:0) /HDL 胆固醇(EDTA) (mg/dL)和 Cer (dl8:1/24:1) /载脂蛋白B (mg/dL)； 且其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-临床浓度比率选自:Cer(dl8:0/24:0)/ 载脂蛋白 B (mg/dL)、Cer (dl8:0/24:0)/ 总胆固醇(EDTA) (mg/dL), Cer(dl8:0/24:0)/ 载脂蛋白 B (mg/dL)、PC16:0/20:4/ 载脂蛋白 B (mg/dL)和Cer (dl8:0/24:0) / 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)。2.一种用于评估对受试对象的CVD和/或其一种或多种并发症的治疗的有效性的方法，所述并发症例如为AMI或CVD死亡，所述方法包括: a.确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品 中与对照样品相比时升高或下降的浓度表明所述治疗有效， 其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自:Cer(dl8:1/20:0)、LacCer (dl8:1/20:0)、Cer (dl8:1/24:1)、LacCer (dl8:1/24:1)、PSO-18:2/16:0-烯基、PS 0-16:1/18:2-烷基、总 Cer、总 LacCer、GlcCer (dl8:1/24:1)、LacCer (dl8:1/22:0)和 Cer(dl8:1/18:0)； 且其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自:总 PC、PC16:0/20: 4、Cer (dl8:0/24:0)、总 LPC、CE14: O、CE20: 3、CE17:1、PC16:0/20: 3、LPC18:1、PC18:0/20:3、PC18:0/18:1和 Cer(dl8:0/22:O)； 或 b.确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质比率，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的脂质-脂质比率表明所述治疗有效，` 其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质比率选自: GlcCer (dl8:1/26:1)/ 总 CE、Cer (dl8:1/24:1)/ 总 PC、Cer (dl8:1/24:1)/PC16:0/20: 4、Cer (dl8:1/20:0) /PC16:0/20:4、LacCer (dl8:1/20:0) /PC16:0/20: 3、总Cer/ 总 PC、总 LacCer/ 总 PC、LacCer (dl8:1/20:0)/PC18:1/18:2、PS 0-16:0/18:2-烯基 / 总 PSO、Cer (dl8:1/18:0)/PC16:0/20:4、LacCer (dl8:1/20:0)/ 总 LPC 和LacCer (dl8:1/20:0)/PC16:0/20:4 ； 且其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质比率选自:Cer(dl8:0/24:0)/Cer(dl8:1/24:1)、Cer (dl8:0/22:O)/Cer(dl8:1/24:1)、DAG16:0/18:1/ 总 DAG、Cer (dl8:0/24:0)/Cer (dl8:1/22:0)、Cer (dl8:0/24:0)/ 总 CE、Cer (dl8:0/24:0)/Cer (dl8:1/24:1)、Cer (dl8: 0/24: 0) / 总 Cer、Cer (dl8: 0/24:0) /Cer(dl8:1/18:0), Cer (dl8:0/24:0)/PS 0-16:0/18:2-烯基、Cer (dl8:0/24:0)/LacCer(dl8:1/24:0)、Cer(dl8: 0/22:0)/Cer(dl8: 1/18:0)、Cer(dl8:0/24: 0)/Cer(dl8:1/22:0)和 Cer(dl8:0/22:0)/Cer (dl8:1/20: 0)、Cer(dl8:0/22:0)/PS0-16:0/18:2-烯基、Cer (dl8:0/22:0)/PS 0-16:1/18:2-烷基、GlcCer (dl8:1/26:0) /LacCer (dl8:1/20:0)、总 LPC/ 总 LacCer 和 GlcCer (dl8:1/26:0) /LacCer (dl8:1/22:0)； 或 c.确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-临床浓度比率，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的脂质-临床浓度比率表明所述治疗有效， 其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-临床浓度比率选自:Cer (dl8:1/20:0)/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、Cer (dl8:1/24:1)/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、LacCer (dl8:1/20:0) / 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、总 Cer/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、总 LacCer/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、Cer (dl8:1/18:0)/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、LacCer (dl8:1/22:0)/ 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)、LacCer (dl8:1/20:0) /HDL 胆固醇(EDTA) (mg/dL)和 Cer (dl8:1/24:1) /载脂蛋白B (mg/dL)； 且其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-临床浓度比率选自:Cer(dl8:0/24:0)/ 载脂蛋白 B (mg/dL)、Cer (dl8:0/24:0)/ 总胆固醇(EDTA) (mg/dL), Cer(dl8:0/24:0)/ 载脂蛋白 B (mg/dL)、PC16:0/20:4/ 载脂蛋白 B (mg/dL)和Cer (dl8:0/24:0) / 载脂蛋白 A-1 (mg/dL)。3.一种用于为受试对象的CVD和/或其一种或多种并发症选择适合的治疗的方法，所述并发症例如为AMI或CVD死亡，所述方法包括: a.确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的浓度表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充， 其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自:Cer (dl8:1/20:0)、LacCer (dl8:1/20:0)、Cer (dl8:1/24:1)、LacCer (dl8:1/24:1)、PS0-18:2/16:0-烯基、PS 0-16:1/18:2-烷基、总 Cer、总 LacCer、GlcCer (dl8:1/24:1)、LacCer(dl8:1/22:O)和 Cer(dl8:1/18:0)； 且其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自:总 PC、PC16:0/20: 4、Cer (dl8:0/24:0)、总 LPC、CE14: O、CE20: 3、CE17:1、PC16:0/20: 3、LPC18:1、PC18:0/20:3、PC18:0/18:1和 Cer(dl8:0/22:O)； 或 b.确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质比率，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的脂质-脂质比率表明所述受试对象需要治疗或需要对已经施用的治疗进行改变或补充， 其...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·拉克松恩，K·埃克罗斯，R·霍尔姆，M·詹尼斯，R·卡塔恩，K·塔拉索夫，
申请(专利权)人：佐拉生物科学公司，
类型：
国别省市：