一种通过端粒长度筛选抗衰老中药的方法技术

本发明专利技术涉及中药筛选方法，特别涉及一种通过端粒长度筛选抗衰老中药的方法；人胚肺二倍体成纤维细胞，在叔丁基过氧化氢的作用下加速其衰老，制作衰老细胞模型；在造模后，使用各种选取的中药浓缩复合物对细胞进行处理；处理结束后，提取细胞基因组DNA，检测其端粒长度，根据结果判断是否热性药物即具有抗衰老活性。???

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药筛选方法，特别涉及。
技术介绍
中药的应用在我国有着几千年的历史，为中华民族的繁衍和延续提供了有力的保障，尤其是对危急重症、疑难杂病的治疗展现了独具特色的优势。随着全球天然药物潮流的兴起，植物药与传统医药取得了前所未有的发展机遇，2000年全球天然植物药市场销售额达165亿美元，近几年保持在10% 15%的增长速度。云南素有“动植物王国”之称。据调查统计，全省有药用植物4，758种，药用动物260种，矿物药32种，共计5，050种。因此，有效利用云南现有的中药资源丰富的优势，并将其与现代生物学知识有机的结合起来，达到更加合理的应用该项资源的目的，是目前云南中药材行业加速发展的一条有效途径。端粒是存在于真核 细胞线状染色体末端的一小段DNA-蛋白质复合体，它与端粒结合蛋白一起构成了特殊的“帽子”结构，能够维持染色体的完整。端粒DNA是由简单的DNA高度重复序列组成的，染色体末端沿着5’到3’方向的DNA链富含鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)两种核苷酸。在酵母和人中，端粒序列分别为Cl - 3A/TG1 一 3和TTAGGG/CCCTAA，并有许多蛋白与端粒DNA结合。端粒DNA主要功能有:第一，保护染色体不被核酸酶降解；第二，防止染色体相互融合；第三，为端粒酶提供底物，解决DNA复制的末端隐缩，保证染色体的完全复制。端粒、着丝粒和复制原点是染色体保持完整和稳定的三大要素。同时，端粒又是基因调控的特殊位点，常可抑制位于端粒附近基因的转录活性(称为端粒的位置效应，TPE)。在大多真核生物中，端粒的延长是由端粒酶催化的，另端粒与衰老 1990年，Harley等证实端粒的长度可以随着细胞分裂次数的增多而逐渐变短。这一发现在端粒和细胞衰老之间建立了紧密的联系。端粒重复序列的长度可能起着一种分子钟(molecular clock)的作用。不同年龄的人的体细胞的寿命明显不同,其端粒的长度也不相同。是随着年龄的增长而缩短。来自新生儿的体细胞可在体外传代培养80 90代，来自70岁老人的体细胞在体外只能传代培养20 30代，而且端粒的重复序列长度也缩短很多。实验证明，端粒长度控制着衰老进程。Olovnikov通过实验推测,端粒DNA末端复制而造成的碱基序列丢失很可能调节了细胞的寿命。当端粒缩短到一定程度时，细胞就开始衰老或步入死亡。Bodnar等通过激活视网膜上皮细胞和表皮成纤维细胞的端粒酶的活性，使端粒得以延长，有丝分裂次数增加，正常细胞的生命周期也得以延长，从而有力地证实了端粒与衰老的关系。2003年，((Lancet))上发表的报告称端粒或许可以预测人类生存期限，认为端粒的缩短通过促进多种衰老相关疾病的发生而影响寿命。在小于65岁的人群中，端粒长度短于平均值的人比端粒长于平均值者寿命短4 5年。尽管同一年龄组的人端粒长度的变异很大，大量研究证明端粒长度与年龄呈负相关。该现象的解释为:端粒长度短的人过早地死于衰老相关的疾病。另外，有关端粒与衰老的证据来自于许多罕见的遗传性早老性疾病。罹患先天性角化不良、遗传性肺纤维化等疾病的人都伴有明显端粒长度异常缩短和端粒酶基因的突变，提示端粒缩短可能在早衰症的发病或者病情进展中起重要作用。影响端粒长度的因素分为遗传和非遗传两类。遗传因素包括种族差异、年龄差异、同一年龄不同个体间的差异、甚至同一个体不同器官细胞间的差异等，在此不做细述。我们关注的主要是非遗传因素，因为这一类因素与我们周围的环境息息相关，对人体健康、衰老和疾病发生起到了非常关键的作用。影响端粒长度的环境因素有吸烟、饮食、运动、精神压力等及一些新的危险因素包括炎症和氧化应激等。对于吸烟、饮食、缺乏运动及精神压力大这些传统的于健康密切相关的因素在很多综述中已有很详细的报道。相对于传统危险因素，氧化应激和炎症与端粒损耗相关性更密切。如Bekaert等发现外周血白细胞端粒长度与胆固醇和血压无明显关联，但与氧化应激和炎症相关。
技术实现思路
专利技术目的:提供一种快速筛 选抗衰老中药的方法。技术方案 人胚肺二倍体成纤维细胞，在叔丁基过氧化氢的作用下加速其衰老，制作衰老细胞模型；在造模后，使用各种选取的中药浓缩复合物对细胞进行处理；处理结束后，提取细胞基因组DNA，检测其端粒长度。有益效果 1、路易斯中药现代化工程技术研究中心首席科学家，1998年诺贝尔生理医学奖得主路易斯J.伊格纳罗教授常年来对中国的中医理论很感兴趣，最近他提出了一个全新的设想:中药的“寒，凉，平，温，热”性，从现代分子生物学层面上考虑，可以表现为该药物对端粒长度的影响水平。热性中药都能延长端粒长度，从而减缓机体衰老，延年益寿。中医所说的热性体质的人，体内细胞端粒平均长度应该大于体质为寒性的同龄人，表现为衰老慢一些；同理，寒性体质的人，端粒平均长度应该较同龄人要短。2、通过检测人的端粒长度，我们可以预测其理论上剩余的寿命，通过研究具有代表性的热性中草药对细胞内端粒长度的影响，有极大的可能为延缓衰老提供新的科学理论和治疗手段，造福人类。同时，在更高的成面上，通过研究中药和端粒长度的关系，可以在抽象的中医理论和具体的现代生物学理论间建立起一个重要的纽带。这对于更好的理解基础中医理论，实现中医中药的现代化，具有非常重要的意义。3、我国的中药出口已遍及世界130个国家及地区，但由于中药的药用成分多、分离难、验证难,有效成分还不清楚,成分比例含量不能有效地控制，中药的质量控制尚达不到现代社会用药的要求水平，国际市场的份额只有3 5%左右。开展该项目研究，为提升我省乃至我国地道中草药在全球范围的影响力和知名度，提出可以让世界范围认可的中药药性理论，带动传统中药的发展，是十分必要的。本专利技术通过实验获知，具有明显热性的中草药不经过分离研究其有效成分，而直接通过其浓缩复合物作用于人体细胞，影响细胞内染色体端粒长度，来达到减缓衰老的功效。4、中药影响细胞端粒长度的另一个重要形式主要由其所具有的抗氧化性所决定。前文提到，端粒损耗与氧化应激间有非常密切关系，因此富含抗氧化活性成分的中药材对保护细胞特别是端粒的氧化损伤具有十分重要的意义。自由基生命科学的研究自20世纪70年代以来迅猛发展，相关文献大量涌现，1998年以来的诺贝尔医学奖更是授与了研究一氧化氮自由基的，包括伊格纳罗教授在内的3位美国药学家。事实上由于器官的正常活动或氧化压力过剩，体内可产生活性氧(ROS，reactive Oxygen species)和活性氮(RNS, reactive nitrogen species)等自由基，当体内自由基超出一定量后就会产生连锁反应，自由基将不断产生并由此引起一系列的生物学反应，最终导致疾病的发生。同自由基反应损伤相关的疾病有:动脉粥样硬化、高血压、白内障、癌症、心肌缺血灌注损伤、关节炎和类风湿症等，中药材的独特疗效与其作为抗氧化剂，高效清除体内自由基作用密切相关。目前在医疗和食品领域使用较多的是合成抗氧化剂，而最近的动物实验研究表明，合成抗氧化剂BHT、BHA等对生物体有潜在的毒副作用，因此，众多研究者瞩目于从我国丰富的中药材资源中来寻求高效、低毒的天然抗氧化剂，其开发研究也必将对医药，营养和食品工程产生极其重要的影响。具体实施例方式实施例1 Cl)体外实本文档来自技高网...

【技术保护点】
人胚肺二倍体成纤维细胞，在叔丁基过氧化氢的作用下加速其衰老，制作衰老细胞模型；在造模后，使用各种选取的中药浓缩复合物对细胞进行处理；处理结束后，提取细胞基因组DNA，检测其端粒长度，根据结果判断是否热性药物即具有抗衰老活性。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：叶亚东，路易斯伊格纳罗，张娟，全利，郝小江，朱兆云，滕凌，朱文华，胡娟，肖慧，潘鹂，张俊，杨紫俊，
申请(专利权)人：常州亚当生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：