本发明专利技术公开了一种金钱菇三螺旋多糖的制备及其结构，提供了一种金钱菇多糖的制备方法和其结构特征，扩大了金钱菇的应用范围和利用价值，包括金钱菇材料的准备、多糖提取液的配制、提取过程、中和脱色、透析、离心、纯化、结构鉴定等特征步骤。所提取的金钱菇三螺旋多糖为杂多糖，主要由葡萄糖组成，同时含有少量的甘露糖、半乳糖和木糖。糖链主链结构为β-(1→3)-D-葡聚糖，带有(1→6)连接支链。本发明专利技术具有如下优点：（1）本发明专利技术用的是水提金钱菇之后的残渣，可以持续利用，节省成本，扩展了金钱菇的应用领域；（2）本发明专利技术用碱提残渣中的多糖，扩宽了糖的范围，可以更加明确金钱菇的药用价值；（3）本发明专利技术对提取的多糖进行了结构确定，为更好地开发利用金钱菇多糖提供了重要的理论支撑。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多糖的制备和结构鉴定领域，确切地说是一种金钱菇三螺旋多糖的制备及其结构。
技术介绍
多糖是由单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物。多糖具有多种生物活性，例如，抗氧化、抗肿瘤、降血糖、抗菌等。同时多糖的生物活性与其化学结构和空间结构有着密切的联系，因此研究其结构能够为进一步研究其生物活性提供基础和如提。金钱菇，是香菇的一种，因其外形像古时的金币，因此取名金钱菇。它含有多种化学成分，具有调节人体新陈代谢、帮助消化、降低血压、减少胆固醇、预防肝硬变、消除胆结石、防治佝偻病等功效。近年来，人们越来越关注金钱菇的药用价值，开始认识到金钱菇多糖的生物活性。目前，水提残渣直接被遗弃，没有得到很好地利用，而在水提残渣中还含有活性物质多糖，研究残渣中的活性多糖具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是在于提供一种从金钱菇三螺旋多糖的制备其结构表征方法，通过以下步骤实现: 一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于包括以下步骤: (O 金钱菇水提残渣的制备:将金钱菇粉碎过6(Γ100目筛，用乙醇脱色脱脂后，依次经过25 ° C左右水提、90 ° C左右水提后得到的残渣即为水提残渣； (2)多糖混合提取液的配制 :配制5% NaOH与0.05% NaBH4混合溶液； (3)提取过程:往水提残渣中加入料液比为l:3(Tl:40的多糖混合提取液，提取2^3 h，三层纱布过滤，提取两次，离心，合并提取液； (4)中和脱色:加入乙酸中和至中性后再用H2O2脱色； (5)透析:使用透析袋进行透析处理，然后通过旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/3 1/5 ； (6)离心:在浓缩液中加入丙酮，静置、离心，收集沉淀； (7)多糖的获得:沉淀用蒸馏水溶解后进行透析、浓缩、冷冻干燥处理，得到多糖.所述的一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于步骤(4)中所用乙酸的浓度为5%，H2O2的浓度为30%，脱色温度为45 55 ° C，脱色时间为I 2 h。所述的一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于步骤(5)中使用的透析袋的截留分子量为3500 Da，先用自来水流水透析3飞天，再改用蒸馏水透析3飞天。所述的一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于步骤(6)中加入丙酮的量为浓缩液的I 1.5倍，静置时间为24 36 h，离心转速为8000 10000 r/min，离心时间为30 60min。所述的金钱菇三螺旋多糖的结构，其特征在于:(1)三螺旋结构的确定:采用黏度测定实验和刚果红实验确定其螺旋结构； (2)结构表征:用FT-1R、GC、NMR确定其一级结构。所述的一种金钱菇三螺旋多糖的结构，其特征在于步骤(I)中刚果红实验中配置的多糖溶液浓度为2 mg/mL，刚果红溶液浓度为80 Mmol/L和NaOH溶液浓度范围为0.00^0.50 mol/L，梯度为 0.05 mol/L，测量波长范围为 200 nm 800 nm。所述的一种金钱菇三螺旋多糖的结构，其特征在于步骤(2)中FT-1R的波长扫描范围为400(T400 cnT1，采用KBr压片法测试；GC处理方法为糖醇乙酰酯法；NMR中的溶剂为DMS0-1/6。本专利技术所提取的金钱菇三螺旋多糖为杂多糖，主要由葡萄糖组成，同时含有少量的甘露糖、半乳糖和木糖。糖链主链结构为卢-(I — 3)-D-葡聚糖，带有(1 — 6)连接支链。本专利技术具有如下优·点:(1)本专利技术用的是水提金钱菇之后的残渣，可以持续利用，节省成本，扩展了金钱菇的应用领域；(2)本专利技术用碱提残渣中的多糖，扩宽了糖的范围，可以更加明确金钱菇的药用价值；(3)本专利技术对提取的多糖进行了结构鉴定，为更好地开发利用金钱菇多糖提供了重要的理论支撑。附图说明图1为实施例刚果红实验结果； 图2为实施例金钱菇碱提多糖的红外光谱； 图3为实施例金钱菇多糖的气相色谱图4为实施例金钱菇碱提多糖的核磁共振图。具体实施例方式下面将进一步说明本专利技术的实质内容: (1)金钱菇水提残渣的制备:将金钱菇粉碎过60目筛，用乙醇脱色脱脂后，依次经过25° C、90 ° C水提后得到的残渣即水提残渣； (2)多糖提取液的配制:配制含5%Na0H/0.05% NaBH4混合溶液； (3)提取过程:往水提残渣中加入料液比为1:40的混合提取液，提取2h，三层纱布过滤，提取两次，离心，合并提取液； (4)中和脱色:加入5%的乙酸中和至中性后再用30%的H2O2在50° C下脱色I h，直至颜色变为无色为止； (5)透析:使用截留分子量为3500Da的透析袋进行透析处理，先用自来水流水透析5天，再改用蒸馏水透析5天，然后通过旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/3 1/5 ； (6)离心:在浓缩液中缓慢加入浓缩液f1.5倍体积的丙酮，静置24 h后，离心并收集沉淀，其中离心转速为10000 r/min,离心时间为30 min ； (7)多糖样品的获得:沉淀用蒸馏水溶解后进行透析、浓缩、冷冻干燥处理，得到多糖样品; (8)三螺旋结构的确定:通过黏度测定实验测得其特性粘度为1380cm3/g，刚果红实验中，金钱菇多糖与刚果红试剂形成的络合物的最大吸收波长相对于刚果红试剂发生红移，综合表明该糖具有三螺旋结构；(9)结构表征:用FT-1R、GC、NMR确定其一级结构，FT-1R的波长扫描范围为400(Γ400cnT1，采用KBr压片法测试；GC处理方法为糖醇乙酰酯法；NMR中的溶剂为DMSO-式。红外分析结果表明，在3380 cnT1处出现了一宽峰，是由于-OH的伸缩振动；在2919 cnT1处出现的吸收峰，是由于C-H伸缩振动引起的，这一吸收峰是糖类的特征吸收峰，在1057 cnT1处的吸收峰是吡喃糖苷的特征吸收峰，而在897 cnT1处的特征吸收峰，说明该糖样中含有β-D-葡聚糖。气相色谱分析发现该糖主要由葡萄糖组成，同时还含有少量的甘露糖、半乳糖和木糖。核磁共振实验表明葡萄糖链上的C原子的化学位移为5 103.47 (Cl), δ74.169(C2), δ 86.754 (C3), δ 68.850 (C4)，δ 76.568 (C5)，δ 61.331 (C6), δ103.370 (Cl，), ^ 70.390 (C6，)，经分析及与文献对比表明制备的金钱菇多糖为主链结构为β-(I — 3)-D-葡聚糖，并带有(1 — 6)连接支链的葡聚糖。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于包括以下步骤：（1）金钱菇水提残渣的制备：将金钱菇粉碎过60~100目筛，用乙醇脱色脱脂后，依次经过25?°C左右水提、90?°C左右水提后得到的残渣即为水提残渣；（2）多糖混合提取液的配制：配制5%?NaOH与0.05%?NaBH4混合溶液；（3）提取过程：往水提残渣中加入料液比为1:30~1:40的多糖混合提取液，提取2~3?h，三层纱布过滤，提取两次，离心，合并提取液；（4）中和脱色：加入乙酸中和至中性后再用H2O2脱色；（5）透析：使用透析袋进行透析处理，然后通过旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/3~1/5；?（6）离心：在浓缩液中加入丙酮，静置、离心，收集沉淀；?(7)???多糖的获得：沉淀用蒸馏水溶解后进行透析、浓缩、冷冻干燥处理，得到多糖。
【技术特征摘要】
1.一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于包括以下步骤: (1)金钱菇水提残渣的制备:将金钱菇粉碎过6(Γιοο目筛，用乙醇脱色脱脂后，依次经过25 ° C左右水提、90 ° C左右水提后得到的残渣即为水提残渣； (2)多糖混合提取液的配制:配制5%NaOH与0.05% NaBH4混合溶液； (3)提取过程:往水提残渣中加入料液比为l:3(Tl:40的多糖混合提取液，提取2 3h，三层纱布过滤，提取两次，离心，合并提取液； (4)中和脱色:加入乙酸中和至中性后再用H2O2脱色； (5)透析:使用透析袋进行透析处理，然后通过旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/3 1/5； (6)离心:在浓缩液中加入丙酮，静置、离心，收集沉淀； (7)多糖的获得:沉淀用蒸馏水溶解后进行透析、浓缩、冷冻干燥处理，得到多糖。2.根据权利要求1所述的 一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于步骤(4)中所用乙酸的浓度为5%，H2O2的浓度为30%，脱色温度为45 55 ° C，脱色时间为I 2 h。3.根据权利要求1所述的一种金钱菇三螺旋多糖的制备，其特征在于步骤(5)中使...
【专利技术属性】
技术研发人员：王军辉，余顺火，杜逸群，刘咏，姚玉飞，许浩，单亮，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：
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