本发明专利技术公开一个抗成纤维细胞生长因子受体的单链抗体。该单链抗体包括氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示的轻链可变区。本发明专利技术将FGFR2作为靶点蛋白，利用酵母双杂交体系从人类单链抗体文库中筛选和FGFR2相互作用的单链抗体，这会有如下优势：酵母细胞作为真核细胞，可以使融合蛋白在真核细胞的天然环境中进行表达。此外酵母转化方便易操作、转化效率高、回收质粒方便。而且通过使用高拷贝和强启动子的表达载体，确保了融合蛋白的高表达，从而可以灵敏的检测蛋白之间的相互作用从而获得专一性强的单链抗体。此外，筛选出来的抗体是全人源段的，可以直接用来开发人用的抗体药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于抗体领域，特别涉及一个抗成纤维细胞生长因子受体的单链抗体。
技术介绍
恶性肿瘤，自发现以后就一直成为威胁人类生命的重大病症之一。为了克服这一世界性的重大难题，各国科学家都在付出努力。近年来，利用特异性的抗体靶向癌症干细胞表面标记物成为治疗癌症的一个研究方向，寻找在各类癌症干细胞表面高表达的特异性标记物，并制备出关于它们的高特异性的抗体成为这类研究的关键步骤。近年来提出的肿瘤干细胞假说颠覆了关于肿瘤发生原因的传统观点。人们普遍公认的肿瘤的发生是基于内在遗传物质和外在环境相互作用的结果。在细胞生长的过程中，由于遗传物质发生突变，可能会导致原癌基因的激活，抑癌基因的沉默以及相关的凋亡基因的异常表达，从而导致细胞的生长不再受控制，从而生成肿瘤。传统观点一直认为这样的变化是来自于肿瘤组织所有细胞所积累的突变，而近些年通过科研人员的研究发现，在肿瘤组织中，仅有一小部分细胞具有形成并维持肿瘤细胞生长和异质性的能力，这样的一小部分细胞称之为肿瘤干细胞。成纤维细胞生长因子受体2 (FGFR2)是酪氨酸激酶受体中的一员，与成纤维细胞生长因子(FGFs)相互作用，调控细胞的增殖、分化等过程。而在多种癌症细胞以及它们的癌症干细胞中有FGFR2异常表达的例子，将它作为癌症治疗的靶点，具有研究价值。单链抗体(scFv)是一种新型的基因工程融合抗体，它由完整抗体的重链可变区和轻链可变区以及连接两者的短的柔韧的肽链(10 20个氨基酸)组成，分子质量非常小(30kDa)。scFv的活性和其他抗体一样，生物活性是由抗体轻链和重链可变区中的高变区(CDRs)特异性的基因序列决定的。scFv由于保留了完整抗体的抗原结合能力，可以利用其对特定目标蛋白的亲和性，将其作为放射性核素的载体去对肿瘤进行放射诊断和治疗。scFv由于自身的特点，让它在治疗 应用上有一些优点:首先这种小分子可以更快的进入实体瘤和其他组织中；其次它在血液中清除的速度也更快，能够减少对正常组织的伤害。另夕卜，scFv可以和其他一些物质如细胞毒素蛋白、药物以及放射性核素融合或偶联，这样就可以让它对相对的特异性的靶点细胞进行作用。目前，仍未见到关于抗FGFR2单链抗体的报道。
技术实现思路
为了克服现有技术的缺点与不足，本专利技术的目的在于提供一种抗成纤维细胞生长因子受体的单链抗体。本专利技术的目的通过下述技术方案实现:一种抗成纤维细胞生长因子受体的单链抗体，包括重链可变区和轻链可变区；所述的重链可变区的氨基酸序列如下所示:QVQLQQffGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYffSfflRQPPGKGLEfflGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCAR ；所述的轻链可变区的氨基酸序列如下所示:SYELTQLPSVSVSPGQTARISCSGDALANQHAYffFQQRPGQAPAAVIYRDTERPSGIPERFSGSRSGTTVTLTISGVQAGDEADYYCQSAD:编码所述的重链可变区的核苷酸序列如下所示:CAGGTGCAGCTACAGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGA ；编码所述的轻链可变区的核苷酸序列如下所示:TCCTATGAGCTGACACAGCTACCCTCGGTGTCAGTGTCCCCAGGACAGACGGCCAGGATCAGCTGCTCTGGAGATGCATTGGCAAACCAACATGCTTATTGGTTCCAGCAGAGGCCAGGCCAGGCCCCTGCGGCGGTCATAATAGAGACACTGAGAGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAGGTCCGGGACAACAGTCACCTTGACCATCAGTGGAGTCCAGGCGGGAGACGAGGCTGACTATTACTGTCAATCAGCAGAC ；由于scFv的生物活性是由抗体轻链和重链可变区中的高变区(CDRs)特异性的基因序列决定的，因此，可通过基因工程方法对如上提供的编码重链链可变区和编码轻链可变区的核苷酸序列进行重组，得到不同类型的抗体；所述的抗成纤维细胞生长因子受体的单链抗体，由重链可变区、连接链和轻链可变区组成，其氨基酸序列如下所示:QVQLQQffGAGLLK PSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARGRDPHYDILTGSSFDYWGQGTLVTVSSAAAITSYNVYYTKLLARQSYELTQLPSVSVSPGQTARISCSGDALANQHAYWFQQRPGQAPAAVIYRDTERPSGIPERFSGSRSGTTVTLTISGVQA⑶EADYYCQSADIIYMCNSAEGPS ；编码所述的抗成纤维细胞生长因子受体的单链抗体的核苷酸序列如下所示:CAGGTGCAGCTACAGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGGCCGCGACCCCCATTACGATATTTTGACTGGTTCCTCTTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGCGGCCGCAATAACTTCGTATAATGTGTACTATACGAAGTTATTGGCGCGCCAGTCCTATGAGCTGACACAGCTACCCTCGGTGTCAGTGTCCCCAGGACAGACGGCCAGGATCAGCTGCTCTGGAGATGCATTGGCAAACCAACATGCTTATTGGTTCCAGCAGAGGCCAGGCCAGGCCCCTGCGGCGGTCATATATAGAGACACTGAGAGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAGGTCCGGGACAACAGTCACCTTGACCATCAGTGGAGTCCAGGCGGGAGACGAGGCTGACTATTACTGTCAATCAGCAGACAT本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种抗成纤维细胞生长因子受体的单链抗体，其特征在于包括重链可变区和轻链可变区；所述的重链可变区的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示；所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。
【技术特征摘要】
1.一种抗成纤维细胞生长因子受体的单链抗体，其特征在于包括重链可变区和轻链可变区； 所述的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID N0.1所示； 所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID N0.2所示。2.根据权利要求1所述的抗成纤维细胞生长因子受体的单链抗体，其特征在于:编码所述的重链可变区的基因序列如SEQ ID N...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏星，马欢，白杨，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：
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