一种地特胰岛素的纯化方法技术

本发明专利技术一种地特胰岛素的纯化方法，其步骤如下：纯化采用酸性缓冲液平衡阳离子交换柱；并用前述酸性缓冲液或用同体系的稀酸将地特胰岛素溶液调节至pH值<5，得样品溶液；将样品溶液上到阳离子交换柱上，然后用平衡缓冲液冲洗阳离子交换柱；采用0.5-1.0M、pH值为2-4的酸性缓冲液线性梯度洗脱的方式将吸附在柱子上的各种物质依次洗脱下来，收集主峰即得目的产物地特胰岛素。本发明专利技术方法不但具有操作方便，上样量大，回收率高等优势，而且避免了传统纯化方法需要使用大量有机试剂和需要高压色谱系统的苛刻要求，做到了节省成本、经济环保，适合于工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于生物化学、药物化学领域。
技术介绍
糖尿病是全球范围内威胁人类健康的一大疾病。在中国，随着人民生活方式的改变和老龄化进程的加快，糖尿病的患病率呈快速上升趋势，在2010年中国糖尿病患者总数已突破9000万人。糖尿病的急慢性并发症，尤其是慢性并发症累计多个器官，致残、致死率高，严重影响患者的身心健康，并给个人、家庭和社会带来沉重的负担。所有I型糖尿病患者都须接受胰岛素治疗，大多数II型糖尿病患者随着病程进展，最终也须使用胰岛素控制血糖。现有证据表明，糖尿病患者一旦具有开始胰岛素治疗的指征，就应尽早启动胰岛素治疗，这样可以使血糖得到更持续、稳定、良好的控制，在很大程度上减少并发症的发生。然而，频繁地注射胰岛素，给糖尿病患者带来诸多不便和痛苦，临床上需要注射间隔时间更长的长效胰岛素。近年来，随着胰岛素技术的不断发展，人们开发出了具有不同作用时间的新一代胰岛素及胰岛素类似物。其中长效胰岛素类似物正在越来越多地被医生和患者所接受和使用。理想的胰岛素替代治疗应尽可能模拟健康人群生理状态下的胰岛素分泌模式，长效胰岛素的理想效果是通过尽可能少的胰岛素注射次数，在糖尿病患者体内重建胰岛素基础分泌，而地特胰岛素正是这样一种模拟生理模式的基础胰岛素类似物。地特胰岛素是诺沃挪第克公司利用基因工程重组人胰岛素研制的一种新型长效可溶(避免了非溶性胰岛素的常见副作用)胰岛素类似物。它的结构式如下:

【技术保护点】
一种地特胰岛素的纯化方法，其特征在于：所述的原料是由去B30的重组人胰岛素和十四烷基脂肪酸?N?琥珀酰亚胺酯一步反应制得的地特胰岛素溶液；纯化采用离子交换层析方法进行，其步骤如下：（1）采用氯化钠浓度低于50mM、pH值为2?4的酸性缓冲液平衡阳离子交换柱4.5?5.5CV；并用前述酸性缓冲液或用同体系的稀酸将地特胰岛素溶液调节至pH值<5，得样品溶液；（2）将样品溶液上到阳离子交换柱上，此时十四烷基脂肪酸?N?琥珀酰亚胺酯不挂柱，会流穿出来，然后用平衡缓冲液冲洗阳离子交换柱2.5?3.5CV；（3）?采用氯化钠浓度为0.5?1.0M?、pH值为2?4的酸性缓冲液线性梯度洗脱的方式将吸附在柱子上的各种物质依次洗脱下来，收集主峰即得目的产物地特胰岛素。

【技术特征摘要】
1.一种地特胰岛素的纯化方法，其特征在于:所述的原料是由去B30的重组人胰岛素和十四烷基脂肪酸-N-琥珀酰亚胺酯一步反应制得的地特胰岛素溶液；纯化采用离子交换层析方法进行，其步骤如下: (O采用氯化钠浓度低于50mM、pH值为2_4的酸性缓冲液平衡阳离子交换柱4.5-5.5CV ;并用前述酸性缓冲液或用同体系的稀酸将地特胰岛素溶液调节至pH值〈5，得样品溶液； (2)将样品溶液上到阳离子交换柱上，此时十四烷基脂肪酸-N-琥珀酰亚胺酯不挂柱，会流穿出来，然后用平衡缓冲液冲洗阳离子交换柱2.5-3.5CV ； (3)采用氯化钠浓度为0.5-1.0M、pH值为2-4的酸性缓冲液线性梯度洗脱的方式将吸附在柱子上的各种物质依次洗脱下来，收集主峰即得目的产物...

【专利技术属性】
技术研发人员：李蕴波，杜家富，司建萍，褚杨杰，孙美禄，
申请(专利权)人：江苏诺泰制药有限公司，
类型：发明
国别省市：