本发明专利技术公开了一种砷化合物溶液及其制备的包载砷化合物的白蛋白纳米粒和冻干制剂，所述的砷化合物溶液按照如下方法配制：取As2O3粉末加入到无菌去离子水中得到悬浮液，其中每mL无菌去离子水中加入6～25mg?As2O3粉末；所得悬浮液滴加NaOH溶液直至粉末完全溶解并调节溶液pH为7.5～9，并使所得砷化合物溶液的浓度以投料的As2O3计为5～20mg/mL。本发明专利技术所述的砷化合物溶液中砷化合物分子结构明确且具有良好的药物疗效，所述的包载砷化合物的白蛋白纳米粒和冻干制剂是能提高药物疗效和生物相容性以及降低毒副作用的控释制剂，具有广阔的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属医药
，涉及一种砷化合物溶液及其制备的包载砷化合物的白蛋白纳米粒和包载砷化合物的白蛋白纳米粒冻干制剂。
技术介绍
系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病，可累及全身各个系统和脏器的自身免疫病，发病机制未明，但在众多病因中，认为是一种体内B细胞多克隆激活和针对自身抗原产生自身抗体的自身免疫性风湿性疾病。目前对SLE的西医治疗仍以糖皮质激素及细胞毒药物或免疫抑制剂为主，虽然能够延长存活期限，但长期或大剂量使用激素，可导致消化道出血、骨质疏松、感染等并发症，给治疗带来很多困难。因此，研究一种疗效可靠、副作用小且经济的药物治疗方法，满足不同患者的需要，仍为当务之急。As2O3俗称砒霜，为一种剧毒药，又是一种作用广泛的药物。在我国有悠久的用药史，古代中医曾用于治疗牛皮癣、梅毒、风湿病及一些恶性肿瘤。传统中药砒霜，最早是中国人在新药开发与治疗白血病领域的重大专利技术和贡献，并取得举世公认的成就。近年来由于As2O3在急性早幼粒白血病治疗中的显著疗效。许多学者对该药进行深入研究表明，As2O3具有极为广泛的抗瘤谱，不仅对白血病细胞具有极好的抑制作用，同时对于众多的实体肿瘤也有很好的抑瘤作用，其中包括肺癌、胰腺癌、食管癌、卵巢癌、胃癌和结肠癌等。国内外许多学者从现代医学科学的角度，对其作用机制进行深入细致的研究。研究表明，砷在体内以三价砷起作用，三价砷是巯基(-SH)的络合剂，与酶分子内的巯基作用后可抑制其活性，然后通过多条途径诱导细胞凋亡，证实了 As2O3是目前非常有效的抗肿瘤药物。魏亚明等(西北国防医学杂志，2002，23 (5) =324-326.)报道了三氧化二砷对白血病细胞凋亡和分化的 双向诱导作用。研究发现As2O3在高浓度时以诱导细胞凋亡为主，低浓度时诱导细胞分化为主，As2O3可以诱导白血病细胞凋亡和部分分化。同时，As2O3对细胞因子和免疫调节方面的作用机制也日益受到关注，一些研究:朱小春等(中华内科杂志，2001，40(11): (764-765);(中华风湿病学杂志，2002，6 (5) =343-346)推测As2O3诱导自身反应性淋巴细胞的凋亡而控制或减轻自身免疫反应，或抑制SLE发病机制中起重要作用。但是，传统As2O3的临床应用目前仍存在不少问题，如毒副作用大、生物利用度较低等。目前临床上所用的制剂是As2O3制成的亚砷酸注射液，静脉给药后由于血浆砷浓度很快升高并迅速弥散至周围组织，可使病人出现消化道症状、末梢神经炎、皮肤干燥、色素沉着，甚至出现肾功能损害或胸腹水等毒副作用。鉴于As2O3全身给药的安全剂量非常有限，安全剂量与中毒剂量相差很小，体内过量积蓄的毒性，更限制了其作为化疗药物的应用。因此，我们在看到As2O3中药临床应用价值的同时，若能通过改进传统制剂工艺，采用现代技术制备新型As2O3纳米粒，从而提高生物利用度、减少药物用量、降低毒副作用并提高疗效将具有重要的临床意义。现有的包载As2O3纳米粒制剂的制备方法:1、周洁等(中国新药杂志2005 14(1)54)公开了乳化-戊二醛固化法制备三氧化二砷白蛋白微球的方法；该方法不仅使用大量有机溶剂与油，而且使用较多的化学交联剂——戊二醛，其残留将给制剂的使用带来安全隐患。2、陈华江(第二军医大学学报2007.28(6)644)公开了乳化-热固化法制备三氧化二砷白蛋白微球的方法；3、杨志文等(中华中医药学刊2007 25(8) 115)公开了乳化-加热固化法制备三氧化二砷白蛋白微球方法，需使用蓖麻油，棉籽油，且需使用大量有机溶剂洗除油性残余物。以上两种方法，无论是乳化-戊二醛固化法还是乳化-加热固化法都存在工艺流程繁琐，不能扩大操作等缺陷。我们在制备包载砷化合物的纳米粒的初期经过诸多试验研究发现，用蓖麻油进行乳化-热固化法所制得的纳米粒粒径大小相差悬殊，且工艺流程繁琐；后改用去溶剂-戊二醛化学固化法，但由于纳米粒的比表面积大，尚未固化的纳米粒在搅拌中易合并呈大粒，又容易发生纳米粒之间的交联，所制得粒径偏大、释放时间也比较短，且有戊二醛化学试剂残留，工艺流程繁琐、不利于工业化生产。综上，现有技术存在工艺流程繁琐；毒性试剂戊二醛残留的隐患；缓释时间短，稳定性差不利于稳定贮存等缺陷，亟需开发一种新的制备包载As2O3纳米粒制剂的新方法。
技术实现思路
本专利技术要解决的第一个技术问题是提供一种砷化合物溶液，该砷化合物溶液中砷化合物分子结构明确，并且具有良好的药物疗效。为解决上述技术问题，本专利技术采用下列技术方案:一种砷化合物溶液，按照如下方法配制:取As2O3粉末加入到无菌去离子水中得到悬浮液，其中每HiL无菌去离子水中加入6 `25mg As2O3粉末；所得悬浮液滴加NaOH溶液直至粉末完全溶解并调节溶液PH为7.5 9，并使所得砷化合物溶液的浓度以投料的As2O3计为5 20mg/mL。本专利技术使用的As2O3粉末的纯度为95% 99.9%。本专利技术用氢氧化钠溶液溶解As2O3,并且通过控制氢氧化钠的浓度和加入量调节溶液的pH值，而非如目前的常规做法般通过加入盐酸调节溶液的pH值。本专利技术推荐溶解As2O3的NaOH溶液的浓度为I 6mol/L，优选为I 2mol/L。在As2O3完全溶解后，再用0.1 0.5mol/L(优选0.1 0.2mol/L)的氢氧化钠溶液调节溶液pH到7.5 9。本专利技术上述配制过程中，可在室温或在加热条件下滴加NaOH溶液，本领域技术人员可以根据实际需要自行选择滴加条件。进一步,优选所得砷化合物溶液的浓度以投料的As2O3计为6 10mg/mL,更优选为 8mg/mL。本专利技术配制得到的砷化合物溶液，溶质组成主要包括偏亚砷酸钠(NaAsO2)和As2O3，可用于制备粒径小、分散无粘结、稳定性好的包载砷化合物的白蛋白纳米粒。本专利技术要解决的第二个技术问题是提供一种由所述的砷化合物溶液制得的包载砷化合物的白蛋白纳米粒，所述的包载砷化合物的白蛋白纳米粒以缓释性良好的HAS和BSA为骨架材料包载砷化合物，其中砷化合物分子结构明确、具有良好的药物疗效，故是一种能提高药物疗效和生物相容性以及降低毒副作用的控释制剂。为解决上述技术问题，本专利技术采用去溶剂化-物理固化法制备所述的包载砷化合物的白蛋白纳米粒，该方法具有快速简便、可操作性强、粒径均匀并分布较窄等特点。一种由所述的砷化合物溶液制备的包载砷化合物的白蛋白纳米粒，其制备方法包括下列步骤:(1)配制白蛋白溶液:将白蛋白用去离子水配制成浓度为0.01 0.02g/mL的白蛋白溶液；所述的白蛋白为人白蛋白(HSA)或牛白蛋白(BSA)；(2)将砷化合物溶液与白蛋白溶液按照砷化合物溶液的投料As2O3与白蛋白的质量比为1: 5 20的比例混合，然后用NaOH溶液调节pH至7.5 9，搅拌下滴入脱水剂，得到乳浊液；所述脱水剂选自下列一种或两种任意比例的混合:乙醇、丙酮，所述脱水剂与白蛋白溶液的投料体积比为2.0 3.5: I ；(3)将所得乳浊液置于水浴中通过物理交联法固化，固化温度为40 90°C，固化时间为10 240min，得到纳米粒乳浊液；(4)所得纳米粒乳浊液经蒸发去除脱水剂、离心分离得到包载砷化合物的白蛋白纳米粒。进一步，所述步骤(2)中，优选在用氢氧化本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种砷化合物溶液，其特征在于：所述的砷化合物溶液按照如下方法配制：取As2O3粉末加入到无菌去离子水中得到悬浮液，其中每mL无菌去离子水中加入6～25mg?As2O3粉末；所得悬浮液滴加NaOH溶液直至粉末完全溶解并调节溶液pH为7.5～9，并使所得砷化合物溶液的浓度以投料的As2O3计为5～20mg/mL。
【技术特征摘要】
1.一种砷化合物溶液，其特征在于:所述的砷化合物溶液按照如下方法配制:取As2O3粉末加入到无菌去离子水中得到悬浮液，其中每HiL无菌去离子水中加入6 25mg As2O3粉末；所得悬浮液滴加NaOH溶液直至粉末完全溶解并调节溶液pH为7.5 9，并使所得砷化合物溶液的浓度以投料的As2O3计为5 20mg/mL。2.如权利要求1所述的砷化合物溶液，其特征在于:用于溶解As2O3粉末的NaOH溶液的浓度为I 6mol/L，用于调节溶液pH值的NaOH溶液的浓度为0.1 0.5mol/L。3.如权利要求1所述的砷化合物溶液，其特征在于:用于溶解As2O3粉末的NaOH溶液的浓度为I 2mol/L，用于调节溶液pH值的NaOH溶液的浓度为0.1 0.2mol/L，使所得砷化合物溶液的浓度以投料的As2O3计为6 10mg/mL。4.一种由权利要求1 3之一所述的砷化合物溶液制备的包载砷化合物的白蛋白纳米粒，其特征在于所述的包载砷化合物的白蛋白纳米粒的制备方法包括下列步骤: (1)配制白蛋白溶液:将白蛋白用去离子水配制成浓度为0.01 0.02g/mL的白蛋白溶液；所述的白蛋白为人白蛋白或牛白蛋白； (2)将砷化合物溶液与白蛋白溶液按照砷化合物溶液的投料As2O3与白蛋白的质量比为1: 5 20的比例混合，然后用NaOH溶液调节pH至7.5 9，搅拌下滴入脱水剂，得到乳浊液；所述脱水剂选自下列一种或两种任意比例的混合:乙醇、丙酮，所述脱水剂与白蛋白溶液的体积比为2.0 3.5: I ； (3)将所得乳浊液置于水浴中通过物理交联法固化，固化温度为40 90°C，固化时间为10 240min,得到纳米粒乳池液； (4)所得纳米粒乳浊液经蒸发去除脱水剂、离心分离得到包载砷化合物的白蛋白纳米粒。5.如权利要求4所述的包载砷化合物的白蛋白纳米粒，其特征在于:所述步骤(2)中，在用氢氧化钠溶液调节pH值至7.5 9后，加入NaCl溶液使NaCl终浓度为5 10mM，然后再滴入脱水剂。6.如权利要求4所述的包载砷化合物的白蛋白纳米粒，其特征在于:所述的步骤(2)中，所述的砷化合物溶液与白...
【专利技术属性】
技术研发人员：楼兰花，范永升，温成平，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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