信号生物标志物制造技术

涉及C型利尿钠和红细胞生成素信号肽及片段的诊断学，及其试剂盒、用途和应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】信号生物标志物领域本专利技术涉及诊断学和相关技术，包括涉及C型利尿钠和红细胞生成素信号肽的诊断学，及其试剂盒、用途和应用。背景下文包括可用于理解本专利技术的信息。而并非承认本文提供的任何信息是现有技术，或者与正在描述或要求保护的专利技术相关，或者具体或暗示地引用的任何出版物或文件是现有技术。急性冠脉综合症(ACS)涵盖了从不稳定的绞痛至急性心肌梗死(AMI)的广谱的心脏局部缺血性事件。AMI是这类事件最严重的表现，因此需要快速而精确的诊断。将表现出两种或多种所述特征(局部缺血性胸痹史、系列心电图(ECG)迹的演化改变和血浆心脏生物标志物的上升和下降)的患者明确定义为正在经受AMI。1然而，表现出疑似AMI的患者中有显著比例(40％-50％)没有ECG的系列变化或典型症状，因此着重强调了用于精确诊断的生物标志物分析。1，2心肌梗死的精确早期诊断有助于迅速引入再灌注治疗，包括有效的经皮或溶栓性再血管化以及辅助抗凝剂和抗血小板疗法。随着诊断和管理每小时的延迟，此类治疗对于死亡率和发病率的降低逐渐失效。3-6考虑到临床情况中需要加速的精确决策，对为急性心脏综合症和病症，特别是AMI提供早期并且特异性诊断的生物标志物，特别是循环的生物标志物的鉴别有相当兴趣。1提出的生物标志物包括肌酸激酶-MB(CK-MB)、肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)BNP、N-BNP(也被称为NP-BNP)、BNP信号肽(BNP-SP)和肌红蛋白。然而，达到血浆心脏生物标志物可检测的或异常的升高的时间可以从高达6小时(肌红蛋白、CK-MB)至12小时或更多(TnT、TnI、BNP、N-BNP)，且峰值水平通常直到损伤发作后24-48小时时才发生，对精确诊断和治疗前造成了延迟窗口。3-6此外，肌红蛋白和CK-MB都是非特异性的，可由心脏外的来源分泌，尤其是在创伤或手术的过程中。1需要这样的标志物或标志物组，其为关于急性心脏综合症和病症(例如急性心脏损伤)提供早期和特异性的信息，特别是在临床表现的前几个小时内。还需要监控血管易损斑块的工具，所述易损斑块为急性心脏事件提供底物。动脉粥样硬化是主要的健康问题，仅在美国就造成500,000例死亡的年死亡率。目前认为，急性冠脉综合症是血管造影术中等严重程度的动脉粥样化易损斑块破裂的最常见的结果。“易损斑块”用于指中等狭窄但不稳定的斑块的亚组，其易于破裂，并因此导致突然的心搏停止。冠脉血管造影术广泛用于显示和监控冠状动脉腔变窄，但其不能提供易损斑块的选择性鉴别。鉴别易损斑块的大部分备选方法都是基于侵入性血管内的方法。因此，开发能够区别易损斑块与稳定斑块的非侵入性技术对于降低动脉粥样硬化患者的发病率和死亡率是关键的和迫切所需的。如果可获得不依赖于腔直径变窄的程度而检测不稳定的动脉粥样硬化斑块的方法和装置，并且在发生不稳定的绞痛和/或急性心肌梗死及其后果之前进行治疗，则是非常理想的。7根据美国国立卫生研究院(ProgramAnnouncementPA-09-196，“AncillaryStudiesofAcuteKidneyInjury，ChronicKidneyDisease，andEndStageRenalDiseaseAccessingInformationfromClinicalTrials，EpidemiologicalStudies，andDatabases”)，美国由于慢性肾病造成的公众健康和经济负担是巨大的。糖尿病和高血压是慢性肾病的主要病因。2006年，晚期肾病的新发病例数超过110,000例，而正在接受治疗的患者数多于500,000名。由于美国人群体持续衰老，预期晚期肾病的新发病例数仍将增加。据估计，美国有约26,000,000人患慢性肾病。住院患者的急性肾衰竭也是美国的严重问题，占1-15％的住院患者。急性肾衰竭的医学管理传统上主要由支持性医护组成，最严重的病例使用换肾疗法。尽管对急性肾衰竭进行上述干预，然而，患病患者的死亡率仍然非常高(一些情况下＞50％)。类似的，慢性肾衰竭(CRF)具有高的死亡率和发病率，对此除支持性医护外没有任何特异性疗法。8在组织学上，局部缺血性CRF的特征是急性肾小管坏死；然而应对该疾病的主要限制是缺少用于早期检测的临床可行的诊断。慢性肾病的早期鉴别和发展的及时检测是全球肾脏学领域面临的挑战，尤其是由于用于减缓病情发展的多种有前景的初级和次级干预是可用的。为了控制成本，医生需要降低慢性肾病发展为晚期肾病(ESRD)的速度。肾病和肾病发展的现有标志物是血清肌酸酐和尿蛋白浓度，包括微蛋白尿。8已证实肾小球滤过率(GFR)降低的斜率用于预测对ESRD定时，而多个研究显示蛋白尿的水平与肾病发展速度相关。然而，它们识别早期肾病的能力有限。血清肌酸酐浓度依赖于对象的年龄、性别、种族、肌肉量、体力活动的程度，而基于血清肌酸酐的多种用药和对肾脏功能的正确解读需要复杂的公式。虽然尿蛋白对进行性肾病敏感，但它出现在已经发生严重的肾损害之后。出于最大效益考虑，早期和/或进行性肾损害的生物标志物应该在尽可能早的时间点变成阳性，优选在开始发生肾损害之前的点变成阳性。仍然强烈的需要发现和验证相关的标志物，特别是用于早期检测的标志物。8世界反兴奋剂机构持续面临的问题是运动员将肽/蛋白质激素(例如红细胞生成素(EPO))作为性能增强剂的滥用。目前，通过电泳或免疫测定方法分析血液和尿液样品中存在的违禁物质。除任何的内在技术问题外，这些测量结果必须考虑可接受的内源性肽激素的生理水平，以及确定其合成的或重组的形式的存在。然而，还应认识到，对于该组中的某些激素，它们较新的合成或重组形式也使得对体育运动中的滥用的检测更加困难，并且由于以下内容使该问题更加复杂：(1)合成或重组EPO构建的技术发展，(2)受控的施用时间点以避免检测，(3)造成的对超过可接受的标准的物质水平进行验证的难度，和(4)不确定的记录，其反映第第二抗体体非特异性结合的蛋白质变化性(特别是在尿浓缩液中)和等电测试中非特异性的酶诱导的条带移动。本专利技术的实施方案涉及发现用于诊断学的新的早期标志物，包括用于例如急性冠脉综合症、急性和慢性肾病症和损伤，和易损斑块的评估、诊断和预后，以及用于检测例如运动员服用EPO。概述本文中描述并要求保护的专利技术具有许多属性和实施方案，包括但不限于此概述中提出或描述或参考的那些。其并非意在包括一切并且本文中描述并要求保护的专利技术不限于或不被此概述中鉴别的特征或实施方案限制，包括此概述的目的仅仅是示例，而非限制。申请人已发现C型利尿钠肽的信号肽片段(CNPsp)和红细胞生成素的信号肽片段(EPOsp)。申请人还发现可以通过测定生物学样品来检测这些信号肽片段，包括通过测定含有释放到循环中的材料的生物学材料的样品。本专利技术涉及C型利尿钠肽和红细胞生成素的信号肽和信号肽的片段，和用于检测它们的方法(包括检测EPOsp和/或CNPsp，和EPOsp和/或CNPsp片段的免疫反应性)，例如，以及用于所述方法的结合剂和测定。本专利技术还涉及它们在生物学事件或病症或状态的预后、诊断和监控中的用途，所述生物学事件或病症或状态导致将它们释放到可以取样的体液中。用于预后、诊断和监控的生物学事件、病症和状态的实例包括急性和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.19 US 61/365,6771.分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段特异性结合SEQIDNO:2、3、5和6中所示的多肽的任何一种或多种，其中所述抗原结合片段选自Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv片段、双抗体和单链抗体(ScFV)。2.根据权利要求1的抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段是多克隆、单克隆、嵌合或人源化抗体或其抗原结合片段。3.权利要求1或2的抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段被可检测的标志物标记。4.分离的多肽，其中多肽选自SEQIDNO:2、3、5和6所组成的组。5.包括将从患者获得的含有选自SEQIDNO:2、3、5和6的多肽的生物学样品与特异性结合SEQIDNO:2、3、5和6中所示的多肽的任何一种或多种的抗体或抗原结合片段接触的非诊断或治疗方法，其中样品是血液样品、血浆样品或血清样品，其中所述抗原结合片段选自Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv片段、双抗体和单链抗体(ScFV)。6.权利要求4的多肽在制备抗体或其抗原结合片段中的用途，其中所述抗原结合片段选自Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv片段、双抗体和单链抗体(ScFV)。7.用于测定在来自对象的生物学样品中的权利要求4的多肽的非诊断或治疗方法，所述方法包括获得所述样品，使所述样品与特异性结合SEQIDNO:2、3、5和6中所示的多肽的任何一种或多种的抗体或抗原结合片段接触，并且使用任何已知的方法检测和测量样品中所述多肽的水平，其中所述抗原结合片段选自Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv片段、双抗体和单链抗体(ScFV)。8.权利要求7的方法，其中生物学样品是来自循环来源的样品。9.如权利要求7或8中任一项所述的方法，其中使用质谱法测量所述多肽的水平。10.如权利要求7或8中任一项所述的方法，其中使用选自酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫荧光测定和免疫放射测定的测定，测量所述多肽的水平。11.用于测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平的工具在制备用于预测、诊断或监控对象中的心脏病症的试剂盒的用途，所述EPOsp和/或CNPsp片段选自SEQIDNO:2、3、5和6，其中所述心脏病症选自包括AMI和绞痛的急性冠脉综合症，心力衰竭、易损斑块，和包括动脉粥样硬化的血管疾病所组成的组，其中在将所述EPOsp和/或CNPsp片段的水平与来自对照的水平比较后，EPOsp和/或CNPsp片段的测量水平高于对照水平提示了所述心脏病症。12.权利要求11的用途，其中所述预测、诊断或监控用于评价或监控对于对象中的急性或慢性心脏病症的治疗的响应，其中EPOsp和/或CNPsp片段的测量水平相对于对照水平的改变提示了对治疗的响应。13.用于测量来自对象的生物学样品中的选自SEQIDNO:2、3、5和6的EPOsp和/或CNPsp片段的水平的工具在制备用于预测、诊断或监控对象中的急性和/或慢性肾脏病症的试剂盒中的用途，其中在将所述EPOsp和/或CNPsp片段的水平与来自对照的水平进行比较后，EPOsp和/或CNPsp片段的测量水平高于对照水平提示了急性或慢性肾脏病症。14.权利要求13的用途，其中所述预测、诊断或监控用于评价或监控对于对象中的急性或慢性肾脏病症的治疗的响应，其中EPOsp和/或CNPsp片段的测量水平相对于对照水平的改变提示了对治疗的响应。15.权利要求13或14的用途，其中所述肾脏病症是肾脏损伤。16.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症临床表现的前48小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。17.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症临床表现的前24小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。18.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症临床表现的前12小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。19.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症临床表现的前6小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。20.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症临床表现的前4小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。21.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症临床表现的前2小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。22.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症临床表现的前1小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。23.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症临床表现的前30分钟内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。24.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症发作的前48小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。25.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症发作的前24小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。26.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症发作的前12小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。27.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症发作的前6小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。28.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症发作的前4小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。29.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症发作的前2小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。30.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症发作的前1小时内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。31.权利要求11的用途，所述测量包括在所述心脏病症发作的前30分钟内，测量来自对象的生物学样品中的EPOsp和/或CNPsp片段的水平。32.权利要求13的用途，所述测量...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·J·彭贝尔彤，A·M·理查兹，
申请(专利权)人：奥塔哥创新有限公司，
类型：
国别省市：