用于检测或测量TOR激酶活性抑制的生物标记物试验制造技术

本发明专利技术提供的是用于检测和/或测量对象的TOR激酶活性的抑制的方法和与其相关的应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测或测量TOR激酶活性抑制的生物标记物试验本申请要求2010年7月30日提交的美国临时申请第61/369，455号的权益，该临时申请的全部内容通过引用结合到本文中。1.专利
本文提供的是用于检测和/或测量对象的TOR激酶活性的抑制的方法和与其相关的应用。_3] 2.
技术介绍
异常的蛋白质磷酸化同疾病的原因或结果之间的关系已经知道了 20多年。因此，蛋白激酶已成为非常重要的一组药物祀。参见Cohen, Nature Reviews DrugDiscovery，1:309-315(2002)。各种不同的蛋白激酶抑制剂已在临床上用于治疗多种多样的疾病，例如癌症和慢性炎症性疾病，包括糖尿病和中风。参见Cohen，Eur.J.Biochem.，268:5001-5010(2001), Protein Kinase Inhibitors for the Treatment of Disease: ThePromise and the Problems (用于治疗疾病的蛋白激酶抑制剂:前景与问题)，Handbook ofExperimental Pharmacology, Springer Berlin Heidelberg, 167(2005)。蛋白激酶是酶的一个又大又多样的家族，其催化蛋白质磷酸化并在细胞信号传导中起关键性作用。蛋白激酶可发挥正调节或负调节作用，这取决于它们的靶蛋白。蛋白激酶参与调节细胞功能的特殊信号传导途径，所述细胞功能例如但不限于代谢、细胞周期进程、细胞粘附、血管功能、细胞凋亡和血管生成。细胞信号传导的功能失调与许多疾病有关，其中最具特征性的是包括癌症和糖尿病在内的疾病。通过细胞因子调节信号转导以及信号分子与原癌基因和肿瘤抑制基因的相关性已经有充分记载。同样，已证明了糖尿病及相关病症与蛋白激酶的去调节水平之间的联系。参见例如Sridhar等，PharmaceuticalResearch, 17 (11): 1345-1353 (2000)。病毒感染和与其有关的病症也与蛋白激酶的调节有关。Park 等，Cell 101 (7): 777-787 (2000)。蛋白激酶可基于它们所靶向的氨基酸种类(identity)(丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、赖氨酸和组氨酸)分成若干大组。例如，酪氨酸激酶包括受体酪氨酸激酶(RTKs)(例如生长因子)和非受体酪氨酸激酶(例如src激酶家族)。也存在同时靶向酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸的双特异性蛋白激酶，例如细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)和促分裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)。因为蛋白激酶调节几乎每一个细胞过程，包括代谢、细胞增殖、细胞分化和细胞存活，所以对于各种疾病状态的治疗性干预来说，它们是极具吸引力的靶标。例如，细胞周期调控和血管生成(其中蛋白激酶起至关重要的作用)都是与多种病症相关的细胞过程，所述病症例如但不限于癌症、炎症性疾病、异常血管生成及与其有关的疾病、动脉粥样硬化、黄斑变性、糖尿病、肥胖和疼痛。对于癌症的治疗,蛋白激酶已成为极具吸引力的革巴标。Fabbro等，Pharmacology&Therapeutics93:79-98 (2002)。已有人提出，蛋白激酶引起人类恶性肿瘤的发生可在以下四种情况下出现:(I)基因组重排(例如在慢性髓细胞性白血病中的BCR-ABL) ；(2)导致连续有活性的激酶活性的突变，例如急性髓细胞性白血病和胃肠肿瘤；(3)激酶活性因癌基因的活化或肿瘤抑制功能的丧失而去调节，例如在具有致癌性RAS的癌症中；(4)激酶活性因过表达而去调节，如在EGFR的情况下；和(5)可影响肿瘤表型的发生和维持的生长因子的异位表达。Fabbro 等，Pharmacology&Therapeutics93:79-98 (2002)。对蛋白激酶途径的错综程度和在各种蛋白激酶和激酶途径中和在两者之间的关系和相互作用的复杂性的阐明突出了开发能够作为对多种激酶或多种激酶途径具有有益活性的蛋白激酶调制剂(modulator)、调节剂(regulator)或抑制剂(inhibitor)起作用的药物的重要性。因此，对于新的激酶调制剂仍有需求。称为mTOR(mammalian target of rapamycin (雷帕霉素的哺乳动物革E ))，它也称为FRAP, RAFTI或RAPT1)的蛋白质，是一种2549个氨基酸的Ser/Thr蛋白激酶，已经表明它是在调节细胞生长和增殖的mT0R/PI3K/Akt途径中最关键的蛋白质之一。Georgakis和 Younes, Expert Rev.Anticancer Ther.6 (I): 131-140 (2006)。mTOR 存在于 mTORCl 和mT0RC2两种复合物之内。虽然mTORCl对雷帕霉素类似物(例如坦罗莫司或依维莫司)敏感，但是mT0RC2多半对雷帕霉素不敏感。值得注意的是，雷帕霉素不是TOR激酶抑制剂。几种mTOR抑制剂已经或正在评估在临床试验中对癌症治疗的效果。坦罗旲司已在2007年被批准用于肾细胞癌，而依维莫司也在2009年被批准用于经受了血管内皮生长因子受体抑制剂治疗的肾细胞癌患者。另外，西罗莫司已在1999年被批准用于预防肾移植排斥反应。这些mTORCl抑制化合物的感兴趣但有限的临床成功证明了 mTOR抑制剂在治疗癌症和移植排斥中的有效性，以及具有mTORCl和mT0RC2两种抑制活性的化合物的潜力增大。由于TOR激酶活性的抑制剂的潜在药物应用，因此有对检测和/或测量TOR激酶体内(in vivo)活性的抑制的方法的需求。本申请第2节中任何参考文献的引用或指出不应被理解为承认该参考文献就是本申请的现有技术。3.专利技术概沭本文提供的是用于检测或测量对象的TOR激酶活性的抑制的方法，包括在将TOR激酶抑制剂给予所述对象之前和之后，测量来自所述对象的生物样品(例如外周血样品)中磷酸化4EBP1 (本文也称为“ρ4ΕΒΡ1)的量。在一个实施方案中，ρ4ΕΒΡ1的量是使用流式细胞术测量的。本文提供的方法据信在追踪对象的TOR激酶抑制中具备实用性。本文进一步提供的是用于确定将TOR激酶抑制剂给予对象的剂量-应答关系的方法，其中给予所述对象不同剂量的所述TOR激酶抑制剂，并且使用本文提供的方法测定所述对象中所述TOR激酶抑制剂各剂量所致的TOR激酶活性的抑制量。本文进一步提供的是用于确定对象对TOR激酶抑制剂是否敏感的方法，包括给予所述对象所述TOR激酶抑制剂，并且使用本文提供的方法确定所述对象中TOR激酶活性是否被抑制。本文进一步提供的是用于确定治疗或控制(manage)对象的疾病的TOR激酶抑制剂的有效量的方法，包括给予所述对象不同剂量的所述TOR激酶抑制剂，并且使用本文提供的方法测定所述患者中所述TOR激酶抑制剂各剂量所致的TOR激酶活性的抑制量。本文进一步提供的是用于治疗或控制患有与TOR激酶相关的疾病的患者的与TOR激酶相关的疾病的方法，包括给予所述患者有效量的TOR激酶抑制剂，其中所述TOR抑制剂的有效量是使用本文提供的方法确定的。在某些实施方案中，本文提供的方法是通过使来自患者的生物样品离体(exVivo)接触TOR激酶抑制剂来实现的。本文进一步提供的是试本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：莉莉·王，徐水蟾，建华·丁，
申请(专利权)人：西格诺药品有限公司，
类型：
国别省市：