一种采集牛肝菌孢子的方法技术

本发明专利技术提供了一种采集牛肝菌孢子的方法，所述方法包括如下步骤：子实体采集步骤：1)将未散发孢子的菌盖以菌孔朝下的方式架放在底部铺有滤纸的采集容器入口，并使用灭菌的包裹材料将所述菌盖和采集容器盖包裹在一起；2)低温存放步骤：将所述采集容器保存在2℃至15℃的保温箱中；和3)获取孢子步骤：将所述菌盖置于2℃至5℃的温度条件下使孢子释放于所述垫层上。本发明专利技术还提供了保存牛肝菌孢子的方法。本发明专利技术所述的采集方法和保存方法具有简单、易操作、采集量大、孢子纯净等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及菌根性食用菌菌种采集和保存的方法，具体地说，本专利技术涉及一种牛肝菌孢子的采集方法和保存方法。
技术介绍
牛肝菌属于担子菌亚门伞菌目中的牛肝菌科(Boletaceae)，除少数品种有毒或味苦而不能食用外，大部分品种均可食用。主要有白、黄、黑牛肝菌。白牛肝菌味道鲜美，营养丰富。该菌菌体较大，肉肥厚，柄粗壮，食味香甜可口，营养丰富，是一种世界性著名食用菌。云南省各族群众喜爱采集鲜菌烹调食用。西欧各国也有广泛食用白牛肝菌的习惯，除新鲜的作菜外，大部分切片干燥，加工成各种小包装，用来配制汤料或做成酱油浸膏，也有制成盐腌品食用。 其中，点柄粘盖牛肝菌(Suillus granulatus (L.:Fr.) 0.Kuntce)属于粘盖牛肝菌属，于夏秋季松林及混交林地上散生、群生或丛生。河北、黑龙江、吉林、辽宁、山东、江苏、安徽、浙江、香港、台湾、河南、广东、广西、贵州、四川、云南、陕西、甘肃、西藏、福建等均有发生。点柄粘盖牛肝菌可食用，味较好。东北地区曾大量加工出口或以干品的形式在市场销售。据报道，点柄粘盖牛肝菌具有抗癌作用。对小白鼠肉瘤的抑制率为80%，对艾氏癌的抑制率为70%。主要与油松形成外生菌根，是油松林地的优势菌根性食用菌。目前点柄粘盖牛肝菌还不能人工栽培。为了驯化栽培点柄粘盖牛肝菌，需要寻找适合人工栽培的菌种并提供适合的栽培条件。在驯化栽培过程中，孢子的采集、保存以及菌丝的培养是基础。如何获得大量纯净的孢子是驯化的首要关键步骤。
技术实现思路
为了解决上述的问题，专利技术人对点柄粘盖牛肝菌的生物学习性进行了多年持续的调查、采集和试验，发现在常温条件下只能得到极少量的孢子，本专利技术人偶然发现在低温条件下能够很好地采集到孢子，并且在适当的条件下可以将孢子保存较长的时间。专利技术人反复比较了牛肝菌子实体成熟度与孢子弹射的相关性，在低温下观察了孢子释放的情况，进行了孢子储藏后萌发情况的试验调查，从而得到了一种牛肝菌孢子采集与保存的方法，从而完成了本专利技术并获得了令人意外的满意的收集效果。本专利技术是通过如下技术方案来实现的。1、一种牛肝菌孢子的采集方法，所述方法包括如下步骤:I)子实体采集步骤:将未散发孢子的菌盖以菌孔朝下的方式架放在底部铺有滤纸的采集容器入口，并使用包裹材料将所述菌盖和采集容器盖包裹在一起；2)低温存放步骤:将所述采集容器保存在2°C至15°C的保温箱中；和3)获取孢子步骤:将所述菌盖置于2°C至5°C的温度条件下使孢子释放于所述垫层上。2、如技术方案I所述的方法，其中，所述采集容器为带有盖子的广口玻璃瓶。3、如技术方案I或2所述的方法，其中，所述包裹材料为经过灭菌的报纸或牛皮纸。4、如技术方案I至3中任一项所述的方法，其中，所述滤纸为白色滤纸。5、如技术方案I至4中任一项所述的方法，其中，所述子实体采集步骤通过如下方式进行:使用灭菌刀片小心取下菌盖，将所述菌盖以菌孔朝下方式架放在经过灭菌的采集容器入口，使用经灭菌的作为所述包裹材料的报纸或牛皮纸将所述菌盖和所述采集容器包裹在一起，并使用橡皮筋包扎固定后置于干净的所述保温箱中。6、如技术方案I至5中任一项所述的方法，其中，在第I)步骤中，所述子实体的菌孔为可肉眼观察的。7、如技术方案I至6所述的方法，其中，所述子实体的菌孔宽度为0.1Omm至1.0Omm08、如技术方案I至7中任一项所述的方法，其中，所述子实体的菌孔长度为0.25mm至 2.00mm。9、如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中，所述牛肝菌为点柄粘盖牛肝菌(Suillus granulat·us(L.:Fr.)0.Kuntce)。10、如技术·方案I至9中任一项所述的方法，其中，所述子实体是无虫的。11、如技术方案I至10中任一项所述的方法，其中，所述方法中使用的用具为经过无菌处理的用具。12、如技术方案I至11中任一项所述的方法，其中，所述第3)步骤中的所述释放持续2小时至3小时。13、一种牛肝菌孢子的保存方法，所述方法包括如下步骤:I)将牛肝菌孢子释放于滤纸上；2)将滤纸剪切成条带；3)将所述条带放入试管中；和4)将所述试管在2°C至5°C的温度条件下保存。14、如技术方案13所述的方法，其中，所述滤纸为技术方案I至11中任一项所述的方法得到所述滤纸。本专利技术的采集和保存牛肝菌孢子的方法具有简单、易操作、采集量大、孢子纯净等优点。附图说明为了更加便于理解本专利技术，本文在此提供如下附图，但是这些附图只用于说明目的，而不应理解为用于限定本专利技术，其中:图1显示了成熟度过高已经散发了孢子的子实体的照片。图2显示了成熟度达到了能够散发孢子的适合采集的子实体的照片。图3显示了成熟度过低还没有达到散发孢子程度的子实体的照片。图4显示根据本专利技术的一个实施方式适合采集的成熟度达到了能够散发孢子的子实体的电子扫描显微(SEM)照片，其中示出菌孔的长度为320.92 μ m，宽度为151.89 μ m。其中成像条件为:放大倍率:158倍；拍摄时间:2012年10月I日；扫描电镜型号:TSCAN5136。图5显示根据本专利技术的一个实施方式适合采集的成熟度达到散发孢子的程度的子实体的电子扫描显微(SEM)照片，其中示出菌宽度为162.35μπι。其中放大倍率为358倍，其他成像条件与图4相同。具体实施例方式在第一方面，本专利技术提供了牛肝菌孢子的采集方法。所述方法包括如下步骤:I)子实体采集步骤:将未散发孢子的菌盖以菌孔朝下的方式架放在底部铺有滤纸的采集容器入口，并使用包裹材料将所述菌盖和采集容器盖包裹在一起；2)低温存放步骤:将所述采集容器保存在2°C至15°C的保温箱中；和3)获取孢子步骤:将所述菌盖置于2°C至5°C的温度条件下使孢子释放于所述垫层上。在所述低温存放步骤中，保温箱的温度例如可以为2°C至15°C，优选为5°C至12°C，更优选为大于5°C且小于10°C的温度。例如可以为2°C、3°C、4°C、5°C、6°C、7°C、8°C、9°C、10°C、11°C、12°C、13°C、14°C或15°C。如果温度过低，则在室外不容易实现，并且可能影响到随后孢子的释放；如果温度过高，则容易失水，影响孢子释放。在所述获取孢子步骤中，温度可以为2°C至5°C，更优选为4°C至5°C。例如为2°C、3°C、4°C或者5°C，例如保存在设定为如上温度的冰箱中。所述第3)步骤可以在所述第2)步骤之后立即进行。但是优选所述第3)步骤在所述第2)步骤结束后3小时至10小时(例如3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时或者10小时)之后进行，这样可以使孢子能够更好地释放。另外，在根据第2)步骤中的温度高于5°C的情况下，第二步骤和第三步骤中的间隔时间优选不超过10小时。低温条件一般认为会降低细胞的活跃度，因而不会将用于采集孢子的子实体保存在低温条件下。本专利技术人通过多年连续的调查和研究，发现牛肝菌尤其是点柄粘盖牛肝菌的生长环境的地表温度都比较低，在这样的环境条件下也还出现孢子能够自然弹射，而常温反而由于失水收缩等原因而导致弹射失败。于是本专利技术人进行了一系列的试验研究，终于实现了本专利技术。本专利技术对所述采集容器没有特别的限制。在一些实施方式中，所述采集容器为带有盖子的广口玻璃瓶，例如带有盖子的250ml的广口本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牛肝菌孢子的采集方法，所述方法包括如下步骤：1)子实体采集步骤：将未散发孢子的菌盖以菌孔朝下的方式架放在底部铺有滤纸的采集容器入口，并使用包裹材料将所述菌盖和采集容器盖包裹在一起；2)低温存放步骤：将所述采集容器保存在2℃至15℃的保温箱中；和3)获取孢子步骤：将所述菌盖置于2℃至5℃的温度条件下使孢子释放于所述垫层上。

【技术特征摘要】
1.一种牛肝菌孢子的采集方法，所述方法包括如下步骤: 1)子实体采集步骤:将未散发孢子的菌盖以菌孔朝下的方式架放在底部铺有滤纸的采集容器入ロ，并使用包裹材料将所述菌盖和采集容器盖包裹在一起； 2)低温存放步骤:将所述采集容器保存在2°C至15°C的保温箱中；和 3)获取孢子步骤:将所述菌盖置于2°C至5°C的温度条件下使孢子释放于所述垫层上。2.如权利要求1所述的方法，其中，所述采集容器为带有盖子的广ロ玻璃瓶。3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述子实体采集步骤通过如下方式进行:使用灭菌刀片小心取下菌盖，将所述菌盖以菌孔朝下方式架放在经过灭菌的采集容器入ロ，使用经灭菌的作为所述包裹材料的报纸或牛皮纸将所述菌盖和所述采集容器包裹在一起，并使用橡皮筋包扎固定后置于干净的所述保温箱中。4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，在第I)...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈青君，牛玉蓉，张国庆，程继鸿，王明花，杨瑞，
申请(专利权)人：北京农学院，
类型：发明
国别省市：