疾病重症度的检查方法技术

本发明专利技术涉及实时地测定疾病重症度的方法，其课题在于提供能够比现有的APACHEII、SOFA评分更详细地判断疾病重症度的检查方法。作为解决手段，通过准确地测定试样中的ATP量，能够建立由ATP量准确且快速地类推“生物生存所需的细胞内能量状态”的方法，进而能够判定疾病重症度。此外，本发明专利技术还提供一种新的生物标志物即ATP-乳酸盐能量风险评分(ATP-Lactate?Energy?Risk?Score，A-LES)值，其以ATP浓度作为指标对因疾病的重症化伴随的体内代谢平衡的崩溃而蓄积在试样中的乳酸量进行再评价(具体而言，通过乳酸值mM/ATP浓度mM进行换算)，由此能够判定疾病重症度。另外，本发明专利技术还提供一种新的生物标志物即ATP-酮体能量风险评分(ATP-Ketone?Energy?RiskScore，A-KES)值，其以ATP浓度作为指标对试样中的酮体量进行再评价(具体而言，通过酮体值mM/ATP浓度mM进行换算)，由此能够判定疾病重症度。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及通过测定试样中含有的三磷酸腺苷(以下称为“ATP”)量来检查疾病重症度的方法。此外，本专利技术还涉及通过测定试样中的ATP量和作为能量代谢中间代谢产物的乳酸或酮体的量来掌握能量产生状态从而检查疾病重症度的方法。
技术介绍
ATP是所有生物用作生存所需的能量的化学物质(核苷酸)。因此，一直以来，为了判定生物试样中含有的微生物的有无而广泛应用ATP的测定。另外，由于ATP主要在细胞内细胞器的线粒体中产生，因此，以前曾经为了测定线粒体的功能而对ATP进行测定。但是，现有的ATP测定技术中没有能高效地提取出生物试样中含有的ATP的技术，因此，生物试样中的ATP浓度的相关信息缺乏准确性，难以使用该数值由ATP量的测定值准确地类推“生物生存所需的细胞内能量状态”。本专利技术人建立了极为有效地提取试样中的ATP并准确测定细胞内、组织内的ATP浓度的划时代性的技术(专利文献1:W02009/096429，核苷酸的提取方法)。通过本方法，能够准确地得到生物试样中的ATP浓度的相关信息。另一方面，在判定“疾病重症度”的现有技术中，直到目前为止一直在使用根据1985 年修改的 APACHEII 评分(非专利文献 1:KnausWA, Draper EA, Wagner DP, ZimmermanJE: A severity of diseaseclassification system.Critical Care Medicine13:818-829, 1985)来判定住院患者的重症度的方法，但APACHEII评分并非实时评分，因此，需要替代该APACHEII评分的风险标志物和评价方法。APACHEII评分是使用急性生理学评分(包括12个项目:1.深部体温、2.平均动脉压、3.心率、4.呼吸次数、5.氧合能力、6.动脉血pH、7.血清Na浓度、8.血清K浓度、9.血清肌酐浓度、10.血细胞压积值、11.白细胞值、12.格拉斯哥昏迷指数)+年龄分数+慢性疾病状态的总分数进行评价的方法。此外，还提出 了使用 SOFA 评分(非专利文献 2:Vincent JL, MorenoR, Takala J, Willatts S，DeMendonca A, Bruining H，Reinhart CK, SuterPM, Thijs LG:The SOFA(Sepsis-relatedOrgan Failure Assessment)scoreto describe organ dysfunction/failure.0n behalfof the Working Group onSepsis-Related Problems of the European Society ofIntensive CareMedicine.1ntensive Care Medicine 7:707-710，1996)判定重要器官的损伤度的评价方法。SOFA评分通过急性生理学评分(1.呼吸功能、2.血小板数、3.胆红素值、4.血压、5.格拉斯哥昏迷指数、6.血清肌酐浓度或I天的尿量)的总分数来计算。但是，APACHEII评分、SOFA评分的测定项目多，并且像测定I天尿量这样需要花费时间来进行评价的汇总，因此并非实时标志物，需要建立替代上述评分的评价方法。现有技术文献专利文献专利文献1:国际公开小册子W02009/096429号非专利文献非专利文献1-Critical Care Medicine 13:818-829, 1985非专利文献2:1ntensive Care Medicine 7:707-710, 199
技术实现思路
专利技术所要解决的问题本专利技术涉及评价疾病重症度的方法，其课题在于提供能够实时地判断疾病重症度的新的生物标志物及其判定基准而不是如上述APACHEII评分或SOFA评分那样将器官损伤度数值化而得到的生理学评分。用于解决问题的手段本专利技术人为了解决上述问题反复进行了深入研究，结果发现，利用本专利技术人的核苷酸提取方法(专利文献I)，能够准确地测定试样中的ATP量，从而能够建立由ATP量准确地类推“生物生存所需的细胞内能量状态”的方法，进而能够判定疾病重症度，此外还发现，通过将因重症化伴随的体内能量代谢的崩溃而蓄积在血液中的乳酸或酮体的量和血液的ATP浓度作为指标来进行评价(具体而言，通过乳酸浓度mM/ATP浓度mM进行换算和/或通过酮体浓度mM/ATP浓度mM进行换算)，能够实时地判定疾病重症度，从而完成了本专利技术。即，本专利技术包括:[1] 一种，其特征在于，对试样中的三磷酸腺苷量进行测定；[2]如上述[I]所述的检查方法，其中，测定包括以下的步骤:1)为了测定试样中含有的三磷酸腺苷量，用含有酚化合物的溶液处理试样来提取试样中的三磷酸腺苷；和2)使用三磷酸腺苷测定用试剂对提取出的三磷酸腺苷量进行测定；[3]如上述[2]所述的检查方法，其中，含有酚化合物的溶液为pH4 10的溶液；[4]如上述[2]或所述的检查方法，其中，含有酚化合物的溶液为还含有蛋白变性剂的溶液；[5]如上述[2r[4]中任一项所述的检查方法，其中，酚化合物为苯酚。另外，本专利技术还包括:[6]如上述[1] [5]中任一项所述的检查方法，其中，试样为由受试者获取的血液，在该血液中的三磷酸腺苷量低于正常值的下限即0.52mM时，判断为异常；[7]如上述[6]所述的检查方法，其中，在血液中的三磷酸腺苷量低于正常值的下限即0.52mM且为0.3mM以上时，将疾病重症度判断为轻度异常；在血液中的三磷酸腺苷量低于0.3mM时，将疾病重症度判断为重度异常；在血液中的三磷酸腺苷量在I天之内没有恢复至0.3mM以上时，将疾病重症度判断为致死的风险高；[8]如上述[1] [7]中任一项所述的检查方法，其特征在于，进一步对试样中的乳酸量进行测定；[9]如上述[8]所述的检查方法，其中，将试样中的乳酸量(L ；mM)相对于三磷酸腺苷量(A;mM)的换算值(A-LES值)即L/A作为疾病重症度指标；[10]如上述[8]或[9]所述的检查方法，其中，试样为由受试者获取的血液，在该血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过正常值的上限即3.7时，判断为异常；[11]如上述[10]所述的检查方法，其中，在血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过正常值的上限即3.7且为8.0以下时，将疾病重症度判断为轻度异常；在血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过8.0且为25.0以下时，将疾病重症度判断为重度异常；在血液中的乳酸量相对于三磷酸腺苷量的换算值为超过25.0的高值且持续6小时以上时，将疾病重症度判断为致死的重度异常。另外，本专利技术还包括:[12]如上述[1] [11]中任一项所述的检查方法，其特征在于，进一步对试样中的酮体量进行测定；[13]如上述[12]所述的检查方法，其中，将试样中的酮体量(K ；mM)相对于三磷酸腺苷量(A ；mM)的换算值(A-KES)即K/A作为疾病重症度指标；[14]如上述[12]或[13]所述的检查方法，其中，试样为由受试者获取的血液，在该血液中的酮体量相对于三磷酸腺苷量的换算值超过正常值的上限即0.25时，判断为异常。专利技术效果根据本专利技术的检查方法，通过由AT本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.05.31 JP 2010-1253541.一种疾病重症度的检查方法，其特征在于，对试样中的三磷酸腺苷量进行测定。2.按权利要求1所述的检查方法，其中，测定包括以下的步骤: 1)为了测定试样中含有的三磷酸腺苷量，用含有酚化合物的溶液处理试样来提取试样中的三磷酸腺苷；和 2)使用三磷酸腺苷测定用试剂对提取出的三磷酸腺苷量进行测定。3.按权利要求2所述的检查方法，其中，含有酚化合物的溶液为pH4 10的溶液。4.按权利要求2或3所述的检查方法，其中，含有酚化合物的溶液为还含有蛋白变性剂的溶液。5.按权利要求2 4中任一项所述的检查方法，其中，酚化合物为苯酚。6.按权利要求1、中任一项所述的检查方法,其中,试样为由受试者获取的血液,在该血液中的三磷酸腺苷量低于正常值的下限即0.52mM时，判断为异常。7.按权利要求6所述的检查方法，其中，在血液中的三磷酸腺苷量低于正常值的下限即0.52mM且为0.3mM以上时，将疾病重症度判断为轻度异常；在血液中的三磷酸腺苷量低于0.3mM时，将疾病重症度判断为重度异常；在血液中的三磷酸腺苷量在I天之内没有恢复至0.3mM以上时，将疾病重症度判断为致死的风险高。8.按权利要求广7中任一项所述的检查方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：木户博，西村匡司，千田淳司，
申请(专利权)人：国立大学法人德岛大学，
类型：
国别省市：