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一株吡啶降解菌及其应用制造技术

技术编号:8677838 阅读:267 留言:0更新日期:2013-05-08 22:02
本发明专利技术公开了一株吡啶降解菌及其应用。本发明专利技术提供了一种动胶菌样申氏菌(Shinella?zoogloeoides)P5,其保藏号为CGMCC?No.7090。本发明专利技术还提供动胶菌样申氏菌(Shinella?zoogloeoides)P5在降解含氮杂环化合物中的应用。所述含氮杂环化合物为吡啶。所述含氮杂环化合物为污水中的吡啶。本发明专利技术的实验证明,本发明专利技术发现了一株新的动胶菌样申氏菌(Shinella?zoogloeoides)P5CGMCC?No.7090,其能够快速高效地降解吡啶,可用于含吡啶废水的生物降解处理过程。以上述动胶菌样申氏菌(Shinella?zoogloeoides)P5为活性成分的生物菌剂也属于本发明专利技术的保护范围;该菌剂中可根据需要,添加可接受的辅料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
,尤其涉及一株吡啶降解菌及其应用
技术介绍
含氮杂环化合物广泛应用于石油、食品和医药工业,大都是有毒且难降解的有机物,不易受代谢过程的破坏,属于污染面广的难降解有机物,对生态系统和人类健康会产生潜在的长期危害。杂环类化合物是具有较大威胁的一类化合物,比对应的非杂环化合物的毒性高。吡啶是一种典型的含氮杂环化合物,在化工、医药工业以及农药生产等行业中被广泛应用,吡啶毒性较大,具有致癌、致畸、致突变性和生物降解性差等特点。再加上吡啶的水溶性和扩散性较好,已成为土壤和废水中最常见的污染物之一,生物修复是解决该类问题的有效方法。利用从环境中筛选出的微生物能够有效去除环境中的吡啶等污染物。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一株动胶菌样申氏菌(Shinella zoogloeoides) P5。本专利技术提供的动胶菌样申氏菌(Shinella zoogloeoides) P5,其保藏号为CGMCCN0.7090。`上述的动胶菌样申氏菌(Shinella zoogloeoides) P5在如下I) _3)中任一应用也是本专利技术保护的范围:I)在降解含氮杂环化合物中的应用;2)在提高降解含氮杂环化合物速率中的应用;3)在缩短降解含氮杂环化合物时间中的应用。上述应用中,所述提高降解含氮杂环化合物速率通过缩短降解含氮杂环化合物时间体现;所述含氮杂环化合物具体为吡啶。 上述应用中,所述含氮杂环化合物为污水中的吡啶。本专利技术的另一个目的是提供一种降解吡啶的方法。本专利技术提供的方法,包括如下步骤:将上述的动胶菌样申氏菌(Shinellazoogloeoides) P5接种在含有卩比唳的体系中培养,实现降解卩比卩定。上述方法中,所述培养的温度为30_35°C ;所述培养的体系的pH值为4_9 ;所述含有吡啶的体系的吡啶浓度为0-2500mg/L,且不为O ;在本专利技术的实施例中,所述培养的温度为30°C ;所述培养的体系的pH值为5 ;所述含有吡啶的体系的吡啶浓度为0-1000mg/L,且不为O ;所述含有吡啶的体系的吡啶浓度具体为300-1000mg/L。上述含有吡啶的体系为含有吡啶的污水或者含有吡啶的培养基。在本专利技术的实施例中培养基为液体培养基或者无机盐培养基,具体配方见实施例。动胶菌样申氏菌(Shinella zoogloeoides) P5已于2013年01月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称06110:,地址为:北京市朝阳区北辰西路I号院3号,中国科学院微生物研究所),保藏登记号为CGMCC N0.7090。本专利技术的实验证明,本专利技术发现了一株新的动胶菌样申氏菌(Shinellazoogloeoides) P5CGMCC N0.7090,其能够快速高效地降解吡啶,可用于含吡啶废水的生物降解处理过程。以上述动胶菌样申氏菌(Shinella zoogloeoides)P5为活性成分的生物菌剂也属于本专利技术的保护范围;该菌剂中可根据需要,添加可接受的辅料。附图说明图1为P5菌对吡啶的生物降解图2为P5菌在加大投菌量并去除菌表面吸附杂质情况下对吡啶的生物降解图3为P5菌在不同吡啶初始浓度下的生长与降解曲线图4为P5菌在不同温度下的生长与降解曲线图5为P5菌在不同pH下的生长与降解曲线 具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。下述实施例中如无声明采用的培养基如下:液体培养基:每L 含量:Na2HP04l.42g、KH2PO4L 36g、MgSO4.7Η200.216g、CaCl20.006g、微量元素lml,用水定容至1L,pH自然,121°C湿热灭菌20min,取出。其中,微量元素每 L 含量=MnSO4.H2Ol.69g、CoCl2.6Η200.24g、H3BO3L 16g、NaMoO4.2Η200.024g、FeSO4.7Η202.78g、ZnSO4.7Η201.15g、CuSO4.5Η200.38g, ρΗ7.0,用水定容至 1L。固体培养基:上述液体培养基添加1.5%琼脂。实施例1、动胶菌样申氏菌(Shinella zoogloeoides)P5CGMCC N0.709 的分离、纯化及鉴定动胶菌样申氏菌(Shinella zoogloeoides)P5是从中原大化甲醇事业部装罐区附近的土壤取样,经过驯化、分离及纯化得到的一株革兰氏阴性杆菌。具体步骤如下:无菌条件下,取样品10g,溶于90ml无菌水中,摇匀,吸取IOml加入到90ml含起始吡啶浓度50mg/L的液体培养基中,300C,摇床180r/min条件下培养,待液体培养基浑浊,明显长出菌体,取IOml该培养基转接到90ml吡啶初始浓度为100mg/L的液体培养中,如此重复,逐步提高吡啶浓度,直到吡啶初始浓度达到500mg/L,驯化结束,得到驯化后的液体培养液。将驯化后的液体培养液梯度稀释10—1 - 10_5倍,取ΙΟ'ΙΟ'ΙΟ—5倍各20 μ L于固体培养基上涂布分离,30°C恒温培养,待菌落长出后,挑取不同颜色、外观的菌落分别划线纯化,得到18株菌,编号Pl -P18。通过接下来的降解实验,发现P5可以利用吡啶为唯一的碳氮源进行生长,具有较高的批唳降解能力。P5菌株的鉴定工作由中科院普通微生物菌种保藏管理管理中心完成,生理生化实验结果如表I所不,16S rRNA基因的核昔酸序列如序列表中序列I所不(以P5囷株基因组DNA 为模板,用 27F:5’ AGAGTTTGATCATGGCTCAG3’、1492R:5’ TACGGTTACCTTGTTACGACTT3’ 为引物进行PCR扩增,得到的产物为16S rRNA基因)。根据细胞显微形态、生理生化数据和16S rRNA基因序列数据,将菌株P5鉴定为动胶菌样申氏菌(Shinella zoogloeoides),该菌已于2013年01月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称06110:,地址为:北京市朝阳区北辰西路I号院3号,中国科学院微生物研究所),保藏登记号为CGMCC N0.7090。表I为P5菌株的生理生化特征本文档来自技高网...

【技术保护点】
动胶菌样申氏菌(Shinella?zoogloeoides)P5,其保藏号为CGMCC?No.7090。

【技术特征摘要】
1.胶菌样申氏菌(Shinellazoogloeoides) P5,其保藏号为 CGMCC N0.7090。2.权利要求1所述的动胶菌样申氏菌(Shinellazoogloeoides) P5在如下I) _3)中任一应用: 1)在降解含氮杂环化合物中的应用; 2)在提高降解含氮杂环化合物速率中的应用; 3)在缩短降解含氮杂环化合物时间中的应用。3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述提高降解含氮杂环化合物速率通过缩短降解含氮杂环化合物时间体现;所述含氮杂环化合物具体为吡啶。4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述含氮杂环化合物为污水中的吡啶。5.一种降解吡啶...

【专利技术属性】
技术研发人员:谷令彪王雁萍焦浈
申请(专利权)人:郑州大学
类型:发明
国别省市:

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