一种提高细菌对血清敏感性的物质制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及一种小分子代谢物甘氨酸（Glycine）。该小分子能够提高细菌包括革兰氏阳性和阴性菌对血清的敏感性，而且该作用在不同动物对于其主要病原菌都有效。本发明专利技术所提供的小分子代谢物，可作为药物提高血清的杀菌作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，具体涉及一种能提高细菌对血清敏感性的小分子物质-甘氨酸。
技术介绍
细菌进入机体后，机体通过特异性免疫和非特异性免疫来清除。特异性免疫主要是通过血液中抗体来清除，非特异性免疫主要是通过补体系统和吞噬细胞来清除。补体系统溶菌是目前已知的清除进入机体血液和粘膜中细菌的主要方式之一，此作用依赖或不依赖抗体的辅助。补体是存在于人或脊椎动物血清与组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质，包括30多种可溶性蛋白和膜结合蛋白。其广泛参与机体微生物防御反应以及免疫调节，也可介导免疫病理的损伤性反应，是体内具有重要生物学作用的效应系统和效应放大系统。然而，许多病原菌具有明显的血清抗性，即能够抵抗补体的溶菌作用，是病原菌的重要病原特征之一。近一个世纪的研究表明，细菌抵抗血清补体溶菌主要归于脂多糖(LPS)和膜(外膜)蛋白。细菌通过减少膜(外膜)蛋白与补体的结合以及灭活已经与膜(夕卜膜)蛋白结合了的补体而表现血清抗性。由此，消除病原菌血清抗性是防治病原菌感染的重要手段，但迄今为止尚未见有关通过抑制病原菌血清抗性以提高血清杀菌目的的研究报道。因此，发现新的能增加补体对细菌溶解的物质，对防治病原菌的危害，保障人们身体健康具有十分重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于 提供一种小分子物质在提高细菌对血清敏感性方面的应用。作为一种提高细菌对血清敏感性的小分子代谢物，本专利技术通过这些小分子物质可达到抑制病原菌的目的。本专利技术所述的小分子物质，属于氨基酸或其衍生物。更具体的说，所述的氨基酸可以是甘氨酸，苏氨酸，丝氨酸。优选地，所述的氨基酸为甘氨酸(Glycine，Gly/甘氨酸)。由此，专利技术公开并保护了氨基酸或氨基酸衍生物在制备提高血清或血浆或全血杀菌作用药物方面的应用，所述的氨基酸为甘氨酸，苏氨酸或丝氨酸。同时，专利技术公开并保护了氨基酸或氨基酸衍生物在制备注射用杀菌剂方面的应用，氨基酸。同时，专利技术公开并保护了氨基酸与血清联用在制备杀菌药物方面的应用，或氨基酸衍生物，与血清或血浆或全血联用在制备杀菌药物方面的应用；所述的氨基酸为甘氨酸，苏氨酸或丝氨酸。优选地，所述的氨基酸为甘氨酸。所述的甘氨酸的代谢产物和甘氨酸衍生物，如谷胱甘肽、5，10 -亚甲基四氢叶酸、H-蛋白-氨甲基二氢脂赖氨酸、Nl-( 5-磷酸-D-核糖基)甘氨酰胺、L-2-氨基-3-氧代丁酸、L-半胱氨。专利技术同时保护了一种杀菌药物组合物，其特征在于含有氨基酸和血清/血浆/全血，所述的氨基酸为甘氨酸，苏氨酸或丝氨酸。优选地，所述的血清和甘氨酸的比例以重量计为1:3000。所述的细菌包括革兰氏阴性菌和阳性菌。优选的，所述的细菌为革兰氏阴性和阳性病原菌。更优选地，所述的细菌为金黄色葡萄球菌、迟钝爱德华菌、B链球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌或弧菌。优选地，所述的血清或血浆或全血来源于哺乳动物、鱼类或禽类。本专利技术同时公开并保护了一种杀菌方法，该方法包括:将氨基酸和血清/血浆/全血联用，或氨基酸衍生物和血清/血浆/全血联用；所述的氨基酸为甘氨酸，苏氨酸或丝氨酸。优选地，所述的方法包括:将甘氨酸和血清以重量计为1:3000的比例混合，用于杀灭革兰氏阴性菌或阳性菌；杀菌所用时间为0.Γ24小时。更优选地，本专利技术所采用的氨基酸为甘氨酸。本专利技术通过代谢组学的方法，对用人血清处理的大肠埃希菌的所有小分子代谢物进行分析，发现甘氨酸在耐人血清的大肠埃希菌中含量明显下`降，提示其可以作为提高对血清敏感性的小分子代谢物质。本专利技术通过固定人血清量添加不同浓度的甘氨酸、固定甘氨酸浓添加不同体积的人血清，以及固定人血清和甘氨酸在不同作用时间的三种情况下，研究甘氨酸添加对血清杀菌作用的影响。结果发现，仅添加甘氨酸的对照组对大肠杆菌生长没有影响，而在人血清中加入甘氨酸后，血清的杀菌能力增加，且其能力随甘氨酸和血清浓度的增加而增强。同时，在一定范围内，随作用时间延长而作用增加。此外，以血浆代替血清也获得同样效果，但采用灭活补体的血清或血浆则无任何效果。本专利技术通过对革兰氏阳性菌的金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌以及革兰氏阴性菌的大肠杆菌、迟钝爱德华菌、绿脓杆菌、弧菌等多种细菌的杀菌实验，结果证明添加甘氨酸能提高所有细菌对人血清的敏感性。本专利技术通过采用小鼠、兔、猪、鸡、家鸽、对虾和鱼等不同进化层次物种动物血清/血浆与甘氨酸合用对其主要病原菌的杀菌作用，发现甘氨酸能提高不同动物血清对其主要病原菌的杀菌能力。本专利技术进一步进行了小鼠体内实验，发现添加甘氨酸后，小鼠不仅对模式大肠杆菌而且对具有完全血清抗性的临床分离病原性菌株也表现明显提高的清除能力，说明甘氨酸可以在体内和全血状态下起作用。综上所述，在血清中添加甘氨酸能够明显提高细菌对血清的敏感性，为血清抗性病原菌感染的治疗提供了一种崭新的技术方法。由此，专利技术公开并保护了甘氨酸在提高细菌对血清敏感性方面的应用。其可用于制备药物或杀菌剂，进一步增强细菌对血清的敏感性。同时，专利技术公开并保护了一种提高细菌对血清敏感性的方法，其特征在于采用甘氨酸作为一种提高血清杀菌作用的药物。所述的细菌包括但不限于为金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、迟钝爱德华菌、绿脓杆菌、大肠杆菌或弧菌。因为这些细菌是常见人类和养殖动物致病菌，其中金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌为革兰氏阳性菌，大肠埃希氏菌、绿脓杆菌、迟钝爱德华菌、副溶血弧菌和溶藻弧菌为革兰氏阴性菌。这些细菌为常见的病原菌，且常见其血清抗性菌株，同时大肠埃希氏菌是研究细菌血清抗性的模式菌，故这些细菌为血清抗性的较好代表菌。应用上述方法来提高细菌对血清的敏感性时，甘氨酸的使用浓度为0.05-lg/公斤体重/天。通过本专利技术所公开的内容，还可制备出一种新的杀菌剂，该杀菌剂含有甘氨酸；或者一种提高血清对细菌杀菌作用的制剂，其主要成分为甘氨酸。附图说明图1为耐血清大肠埃希氏菌GC-MS的独立成分分析(A)、数据聚类分析(B)及代谢物含量分析(C)。图2为甘氨酸对提高细菌对血清敏感性的结果。A为不同浓度甘氨酸、B为不同体积血清，C为不同时间。图3为甘氨酸可提高多种细菌对血清敏感性的结果。A为生存率，B为提高倍数。图4为甘氨酸提高不同动物血清/血浆对其主要病原菌杀菌能力的结果。A为虾和鱼血清对溶藻弧菌杀菌的结果，B为鸡和家鸽血浆对大肠杆菌杀菌的结果，C为小鼠、兔和猪血浆对大肠杆菌杀菌的结果。图5为甘氨酸提高小鼠对体内细菌清除的结果。A和B依次为小鼠注射或不注射甘氨酸血液中细菌数量和生存率。图6为甘氨酸提高 小鼠对大肠埃希菌的清除的结果。具体实施例方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。实施例1 甘氨酸是大肠埃希菌抵抗血清杀菌作用的生物标记物 1.试验样本的准备:从LB平板上挑取大肠埃希菌起始株(focAericAia coli K12BW25113)单菌落接种于5毫升LB培养基中，37°C 200rpm振荡培养16小时。按I:100(v/V)的比例接种于200毫升培养基中，37°C振荡培养至0D600值为1.0，4°C 8000rpm离心10分钟收集菌体，并用0.85%生理盐水洗涤菌体I次。2.GC-MS样品的制备和数据处理 GC-MS样品制备:向准备好的样本中分别本文档来自技高网...

【技术保护点】
氨基酸或其衍生物在制备提高血清或血浆或全血杀菌作用药物方面的应用，所述的氨基酸为甘氨酸，苏氨酸或丝氨酸。

【技术特征摘要】
1.基酸或其衍生物在制备提高血清或血浆或全血杀菌作用药物方面的应用，所述的氨基酸为甘氨酸，苏氨酸或丝氨酸。2.基酸或其衍生物在制备注射用杀菌剂方面的应用，所述的氨基酸为甘氨酸，苏氨酸或丝氨酸。3.基酸或其衍生物，与血清或血浆或全血联用在制备杀菌药物方面的应用，所述的氨基酸为甘氨酸，苏氨酸或丝氨酸。4.一种杀菌药物组合物，其特征在于含有氨基酸和血清/血浆/全血，所述的氨基酸为甘氨酸，苏氨酸或丝氨酸。5.按权利要求4所述的组合物，其特征在于所述的血清和甘氨酸的比例以重量计为1:1-3000。6.按权利要求1-4任一所述的应用或组合物，其特征在于所述的细菌为革兰氏染色...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭宣宪，李惠，程志学，郭昌，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：