本发明专利技术涉及一种弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基、发酵方法及利用其生产泰乐菌素的方法，其特征在于上述一级种子培养基含有花生饼粉、玉米油，二级种子培养基和发酵培养基中均含有混合鱼粉、花生饼粉和玉米油。本发明专利技术通过采用玉米油替代豆油；混合鱼粉和花生饼粉代替鱼粉，优化其培养基配方，从而解决了原辅料的成本问题，并且最大限度的降低原辅料来源不受环境影响，保证其供应充足，实现泰乐菌素稳定、高效的生产。同时利用该培养基可提高发酵单位、缩短发酵周期、提高泰乐菌素A组分。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于发酵
，特别是涉及一种。
技术介绍
泰乐菌素又称泰乐霉素，是由放线菌属弗氏链霉菌经发酵提取而得到的一种大环内酯类抗生素，有泰乐菌素碱、磷酸盐和酒石酸盐三种形态。泰乐菌素是一种禽、畜专用的高效、无残留抗菌促生剂。对鸡败血症、猪流行性肺炎等疾病有独特的疗效，且对禽、畜的生长具有明显的促进作用。泰乐菌素作为动物专用抗生素，避免了人畜共用抗生素易产生交叉耐药性的问题，用于防治猪、禽支原体病。国内泰乐菌素生产方法主要是发酵法，采用弗氏链霉作为菌种，以鱼粉和豆油为原料的传统方法生产，作为传统发酵工艺的培养基典型配方为:鱼粉I 1.5%，豆饼粉0.5 I %，玉米粉I 1.2%，玉米蛋粉0.5 I %，碳酸钙0.2 0.3%，甜菜碱盐酸盐0.05 0.1%，磷酸氢二铵0.04 0.06%，氯化钾0.09 0.11%，氯化钠0.09 0.11%。发酵结束后，泰乐菌素发酵单位在10000 12000u/ml ;发酵周期控制在180 200h ;泰乐菌素A组分控制在80 85%。由于采用豆油、鱼粉为主要原料，发酵单位低；生产周期长；生产成本较高，其中豆油成本占总成本的60%左右，鱼粉成本占总成本的15%左右。
技术实现思路
本专利技术目的就在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种有效提高发酵单位，缩短发酵周期，同时最大限度的降低原辅料入豆油、鱼粉用量，降低生产成本，且原辅料来源不受环境影响，保证其供应充足，实现泰乐菌素稳定、高效地生产的弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基。 本专利技术的另一目的是提供利用上述培养基生产泰乐菌素的发酵方法。为实现上述目的所采取的技术方案为:—种弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其特征在于上述一级种子培养基中含有花生饼粉和玉米油，二级种子培养基和发酵培养基中均含有混合鱼粉、花生饼粉和玉米油。上述一级种子培养基的组成为:玉米油15 20ml/L、玉米蛋白粉10 20g/L、花生饼粉15 20g/L、玉米浆2 3g/L、磷酸氢二铵0.3 0.4g/L、碳酸钙I 2g/L。上述二级种子培养基的组成为:玉米油15 20ml/L、玉米蛋白粉10 20g/L、花生饼粉15 20g/L、磷酸氢二铵0.3 0.4g/L、碳酸钙I 2g/L、混合鱼粉10 15g/L、玉米楽;2 3g/L。上述发酵培养基的组成为:玉米油25 30ml/L、玉米蛋白粉20 22g/L、花生饼粉10 12g/L、混合鱼粉6 8g/L、磷酸氢二铵0.1 0.2g/L、碳酸I丐2.5 3g/L、盐酸甜菜碱0.6 0.8g/L、氯化钴0.005 0.007g/L、氯化钾0.9 lg/L、氯化钠0.9 lg/L、硫酸镁 0.8 0.9g/L。一种利用上述培养基的发酵方法，其工艺步骤包括:I) 一级种子培养:首先将一级种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压(压力0.01 0.02MPa)，然后在火焰保护下，将已经培养好的弗氏链霉菌母瓶发酵液接入一级种子罐中进行培养，接种量控制在培养基体积的5-10% ;培养条件为:a 罐压 0.02 0.04MPa ；b 罐温 28 32。(:；c 空气流量:0 12h:50 60m3/h ；12h 移种:120 130m3/h ；d 揽祥转速 100 120r/min ；e pH 值 6 8 ;f 一级种子液停止培养，菌体浓度15 25% ;g镜检无杂菌； h培养时间20 30h ；2) 二级种子培养:先将二级种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压(压力0.01 0.02MPa)，然后将一级种 子液全部移入二级种子罐进行培养；培养条件为:a 罐压 0.02 0.04MPa ；b 罐温 28 33°C ;c 空气流量 1000 IlOOm3A ;d 揽祥转速 150 160r/min ；e pH 6 8 ;f 二级种子液停止培养，菌体浓度30 40 % ;g镜检无杂菌；h培养时间30 40h ；3)发酵培养:先将发酵培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压(压力0.01 0.02MPa)，然后将二级种子液全部移入发酵罐进行培养；培养条件为:a发酵培养基灭菌后脂肪控制在2 3% ;b发酵开始 130h:培养温度28 32°C、搅拌转速200 220r/min ；c 130h 结束前:温度 35 38°C、转速 250 260r/min ；d 60h 组分转化前:菌体浓度40 50% ;组分转化期间:菌体浓度30 40% ;e 罐压 0.05 0.06MPa ；f发酵过程中pH6.0 7.5 ;g空气流量:0h 组分转化前:1800 1900m3/h ;组分转化期间:1500 1600m3/h ；h发酵过程中进行菌检，要求无其它杂菌；I培养时间比0 I8Oh ;J发酵培养停止条件为:发酵效价每6 8h取样检测，前、后检测的发酵单位相差在300u/ml以内；泰乐菌素A组份> 86% ;泰乐菌素C组份< 1% ;菌体浓度30 50% ;发酵单位在13200u/mL以上；pH值6.0 7.0 ;脂肪在0.1 0.4%。在上述发酵过程中需要根据条件随时进行补料，S卩补油、补水、补酸或碱，具体方式为:a补油控制:补油选择玉米油，发酵前35h不用进行补油，当发酵时间在35 IOOh时，采用流加法进行补油；每隔4 6h检测发酵液脂肪含量，发酵液脂肪含量< 1%，进行补油；发酵液脂肪含量控制在I 1.5%停止补油；当发酵时间在IOOh至泰乐菌素发酵液组份转化开始期间，采用流加法进行补油；每隔4 6h检测发酵液脂肪含量，发酵液脂肪含量< 0.5%,进行补油；发酵液脂肪含量控制在0.5 1%停止补油；当发酵时间在泰乐菌素发酵液组份转化期间至发酵结束，采用流加法进行补油；每隔4 6h检测发酵液脂肪含量，发酵液脂肪含量< 0.1%，进行补油；发酵液脂肪含量控制在0.1 0.5%停止补油。b补水:发酵过程中，按照工艺要求必须定时补入一定量的水，其目的是控制菌体浓度，有利于次级代谢产物的生成。发酵前30h不用进行补水；当发酵时间在35 80h时,采用流加法进行补水；每隔4 6h检测菌体浓度,发酵液菌体浓度< 40%，进行补水，发酵液菌体浓度控制在40 50%停止补水；当发酵时间在80h至发酵结束，采用流加法进行补水，每隔4 6h检测发酵液菌体浓度含量，发酵液菌体浓度< 30%，进行补水，发酵液菌体浓度控制在40 50%停止补水。c补酸或碱:用酸或碱控制发酵25h至组份开始转化前的pH 6 7.5，组份转化期间 发酵结束PH 6 7 ;发酵前25h，pH不进行控制；发酵时间在25h至发酵液组份开始转化前，每隔4 6h检测发酵液pH，当pH < 6，补入20%的氢氧化钠溶液；当pH > 7.5，补入20 30%的硫酸铵溶液，发酵液pH控制在6 7.5 ;发酵时间在发酵液组份开始转化至发酵结束，每隔4 6h检测发酵液pH，当pH<6，补入20%的氢氧化钠溶液；当pH > 7，补入20 30%的硫酸铵溶液，发酵液pH控制在6 7。本专利技术是基于下面阐述的鱼粉、豆油的来源，影响泰乐菌素发酵效本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其特征在于上述一级种子培养基中含有花生饼粉和玉米油，二级种子培养基和发酵培养基中均含有混合鱼粉、花生饼粉和玉米油。
【技术特征摘要】
1.一种弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其特征在于上述一级种子培养基中含有花生饼粉和玉米油，二级种子培养基和发酵培养基中均含有混合鱼粉、花生饼粉和玉米油。2.按照权利要求1所述的弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素培养基，其特征在于上述一级种子培养基的组成为:玉米油15 20ml/L、玉米蛋白粉10 20g/L、花生饼粉15 20g/L、玉米衆2 3g/L、磷酸氢二铵0.3 0.4g/L、碳酸I丐I 2g/L。3.按照权利要求1所述的弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，其特征在于上述二级种子培养基的组成为:玉米油15 20ml/L、玉米蛋白粉10 20g/L、花生饼粉15 20g/L、磷酸氢二铵0.3 0.4g/L、碳酸I丐I 2g/L、混合鱼粉10 15g/L、玉米衆2 3g/L。4.按照权利要求1所述的弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，其特征在于上述发酵培养基的组成为:玉米油25 30ml/L、玉米蛋白粉20 22g/L、花生饼粉10 12g/L、混合鱼粉6 8g/L、磷酸氢二铵0.1 0.2g/L、碳酸I丐2.5 3g/L、盐酸甜菜碱0.6 0.8g/L、氯化钴0.005 0.007g/L、氯化钾0.9 lg/L、氯化钠0.9 kg/L、硫酸镁0.8 0.9g/L05.一种利用权利要求1至4任意一项培养基的发酵方法，其工艺步骤包括: 1)一级种子培养:首先将一级种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压，然后在火焰保护下，将已经培养好的弗氏链霉菌母瓶发酵液接入一级种子罐进行培养，接种量控制在一级种子培养基体积的5 10% ； 2)二级种子培养:先将二级种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压，然后将一级种子液全部移入二级种子罐进行培养； 3)发酵培养:先将发酵培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压，然后将二级种子液全部移入发酵罐进行培养。6.按照权利要求5所述的发酵方法，其特征在于所述一级种子培养条件为:罐压0.02 0.04MPa ;罐温28 32 °C ;空气流量...
【专利技术属性】
技术研发人员：任勇，冷晓红，王友善，奇乃，董媛，李小萍，
申请(专利权)人：宁夏泰瑞制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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