一种卷烟烟蒂中马来酰肼含量的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种卷烟烟蒂中马来酰肼含量的测定方法，以特丁基对苯二酚为内标物，挑选烟支并注射入马来酰肼农药标样，萃取后衍生化，采用气相色谱－质谱联用仪（GC/MS）衍生测定卷烟烟蒂中马来酰肼含量，并针对马来酰肼测（MH）定过程中的GC/MS分析条件和标准溶液配制的浓度范围进行优化选择，本方法具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点，马来酰肼的检出限为0.14μg/支，平均回收率为92％，平均相对标准偏差（RSD）为5.8％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于烟草化学分析

技术介绍
马来酰肼又称抑芽丹，纯品为白色结晶粉末，是一种低毒植物生长调节剂和选择性除草剂，使用于烟叶种植和成长过程，从植物根部或叶面吸入，由木质部和韧皮部传导至植株体内，通过阻止细胞分裂，从而抑制植物的生长。国外应用比较广泛，近年来我国的使用量也在不断增加。马来酰肼在烟草中的残留量在0-300 μ g/g之间。国际癌症研究机构(IARC)通过对马来酰肼的致癌性进行研究后将其归为Group 3类。裂解研究表明，马来酰肼纯品在750°C裂解时会有一定量转移到裂解产物中，因此卷烟中的马来酰肼在燃烧时有可能会转移到主流烟气、侧流烟气和烟蒂中。目前没有文献报道烟蒂中马来酰肼的研究。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供。为了实现以上目的，本专利技术所采用的技术方案是，包括如下步骤(I)样品前处理挑选重量和吸阻合格的烟支，分别向其中均匀加入马来酰肼农药标样，平衡，收集抽吸后的烟蒂，加内标物后萃取农药，将萃取液氮吹浓缩；(2)衍生化用C18固相萃取小柱净化浓缩液，活化C18固相萃取小柱后，移取步骤(I)的浓缩液转移至C18小柱上，淋洗，接收流出液，将流出液氮吹浓缩之后衍生化；(3)、标准工作溶液的配制在O. 1-10. O μ g/mL范围内配制至少三个浓度梯度的马来酰肼系列浓度标准工作液，衍生化后备用；(4)气相色谱/质谱(GC/MS)测定将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液和内标物进行GC/MS测定，以标准工作液与内标物的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中衍生后的样品液注入GC/MS进行测定，测得样品中马来酰肼衍生物与内标物的色谱峰面积比，代入标准曲线，得到样品中的马来酰肼含量。内标物为特丁基对苯二酚。步骤(I)中马来酰肼农药标样加入量是10，20和50 μ L (MH浓度1430 μ g/mL)。步骤(I)中平衡的温度是22±1°C，湿度是60±3%，平衡时间是48小时。步骤(I)中的萃取液为甲醇步骤(2)和(3)中衍生化的方法是在氮吹过的样品中加入ImL 二甲基甲酰胺(DMF)溶解，然后加入O. 5mL的硅烷化试剂(BSTFA)，在75°C下衍生30min，取出放至室温进行GC/MS分析。步骤(I)和(2)中氮吹是在40°C下进行的。步骤(3)中标准工作液的配置方法为准确称取O. OlOOg MH标准品，用DMF溶解并定容于IOOmL容量瓶中，得100μ g/mL MH标准储备液；移取O. 01,0. 02,0. 05,0. 1，0. 5和1.OmL MH标准储备液，分别置于IOmL容量瓶中，用DMF稀释定容，得O. 1，O. 2，O. 5，1. O，5. O和10. O μ g/mL浓度的MH标准工作溶液。步骤(4)中的GC/MS分析条件为色谱柱=DB-WAX熔融石英毛细管柱，柱长30m，内径O. 25mm，膜厚O. 25 μ m ;进样口温度275°C ;载气He不分流模式进样，进样量I μ L ;恒流模式，流速1. 2mL/min ;程序升温50°C持续2min，以每分钟5°C的速度升至200°C，然后以每分钟8°C的速度升至260°C，持续15min ;传输线温度280°C;电离模式EI，能量70eV ；离子源温度230°C ;扫描方式选择离子监测(SM)模式。本专利技术的方法克服了现有技术样品处理方法的不足，针对卷烟烟蒂中的马来酰肼优化了样品前处理方法和仪器检测条件。与现有技术相比本专利技术方法具有如下优良效果(I)卷烟烟蒂基质较为复杂，直接测定基质效应较强，因此采用C18固相萃取小柱净化后进一步衍生化，然后采用GC/MS检测的方式，既可以降低基质效应，又能有效的对烟蒂中的马来酰肼实现检测分析。(2)本方法具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点，马来酰肼的检出限为O. 14 μ g/支，平均回收率为92%，平均相对标准偏差(RSD)为5.8%。 附图说明图1为标准溶液的色谱图，图中IS为内标物峰，MH为马来酰肼衍生物峰；图2为样品溶液的色谱图，图中IS为内标物峰，MH为马来酰肼衍生物峰；图3为本专利技术具体实施方式中马来酰肼的标准曲线图。具体实施例方式本专利技术以下结合实例做进一步描述，但并不是限制本专利技术。1.仪器与试剂GilsonASPEC XL4-V2 自动固相萃取仪(Gilson Labs, France) ；Buchi Rotavapor R-200 旋转蒸发仪(Buchi, Switzerland) ;CDS5000 热裂解仪(CDS，USA) ；6890NGC/5975B MS气相色谱-质谱仪(Agilent, USA) ；BORGffALDT-KC 5孔道侧流吸烟机(B0RGWALDT-KC, German);石英纤维滤片(直径44mm，Millipore, USA);气体流量计(测试范围 0-6L/min，A. P. BUCK Inc, USA);固相萃取小柱C18 柱(500mg，3mL)，购于 Supelco 公司；3R4F 卷烟(Kentucky 大学，USA)。试剂乙腈、甲醇、硅烷化试剂(BSTFA)、N，N- 二甲基甲酰胺均为色谱级(Tedia, USA)；标准物质马来酰肼,特丁基对苯二酹(内标物),购于德国Augsburg公司。本专利技术的具体包括以下步骤(I)样品前处理取卷烟一组，挑选重量和吸阻合格的烟支，分别向其中加入马来酰肼农药标样10，20和50 μ L (1430 μ g/mL)，用微量注射器均匀注射，将加标卷烟置于温度为22 土 1°C，湿度为60±3%的环境中平衡48小时，按照GB/T16450《常规分析用吸烟机定义和标准条件》调整检查吸烟机抽吸参数，BORGffALDT-KC 5孔道侧流吸烟机上抽吸平衡后的卷烟，将抽吸后的烟蒂放入IOOmL三角瓶中。加入内标物后，用50mL甲醇振荡20min萃取农药，然后过滤至氮吹瓶中，在40°C下氮吹浓缩至lmL。(2)衍生化采用C18固相萃取小柱净化浓缩液，先用5mL甲醇活化C18固相萃取小柱，移取ImL浓缩液转移至C18小柱上，接收流出液，并用5mL甲醇淋洗固相萃取柱并接收，40°C下将接收液氮吹浓缩近干，加入ImL DMF溶解，然后加入O. 5mL的BSTFA，在75°C下衍生30min，取出放至室温进行GC/MS分析。(3).标准工作溶液的配制准确称取O. OlO Og MH标准品，置于IOOmL容量瓶中，用DMF溶解、定容，得IOOyg/mLMH标准储备液；移取O. 01，O. 02，O. 05，O.1，O. 5和1. OmL MH标准储备液，分别置于IOmL容量瓶中，用DMF稀释定容，得O. 1，O. 2，O. 5，1. 0，5. O和10. O μ g/mL浓度的MH标准工作溶液，分别移取ImL各级工作溶液并分别加入O. 5mL的BSTFA，在75°C下衍生30min，取出放至室温进行GC/MS分析，并以MH衍生物的峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线。(4)气相色谱/质谱(GC/MS)测定将不同浓度梯度的标准工作溶液分别注入GC/MS，以内标法进行马来酰肼含量的定量分析，即以马来酰肼衍生物与内标物特丁基对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卷烟烟蒂中马来酰肼含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）样品前处理挑选重量和吸阻合格的烟支，分别向其中均匀加入马来酰肼农药标样，平衡，收集抽吸后的烟蒂，加内标物后萃取农药，将萃取液氮吹浓缩；（2）衍生化用C18固相萃取小柱净化浓缩液，活化C18固相萃取小柱后，移取步骤（1）的浓缩液转移至C18小柱上，淋洗，接收流出液，将流出液氮吹浓缩之后衍生化；（3）、标准工作溶液的配制在0.1?10.0μg/mL范围内配制至少三个浓度梯度的马来酰肼系列浓度标准工作液，衍生化后备用；（4）气相色谱/质谱（GC/MS）测定将步骤（3）中的各浓度梯度的标准工作液和内标物进行GC/MS测定，以标准工作液与内标物的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤（2）中衍生后的样品液注入GC/MS进行测定，测得样品中马来酰肼衍生物与内标物的色谱峰面积比，代入标准曲线，得到样品中的马来酰肼含量。

【技术特征摘要】
1.一种卷烟烟蒂中马来酰肼含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)样品前处理 挑选重量和吸阻合格的烟支，分别向其中均匀加入马来酰肼农药标样，平衡，收集抽吸后的烟蒂，加内标物后萃取农药，将萃取液氮吹浓缩； (2)衍生化 用C18固相萃取小柱净化浓缩液，活化C18固相萃取小柱后，移取步骤(I)的浓缩液转移至C18小柱上，淋洗，接收流出液，将流出液氮吹浓缩之后衍生化； (3)、标准工作溶液的配制 在O. 1-10. O μ g/mL范围内配制至少三个浓度梯度的马来酰肼系列浓度标准工作液，衍生化后备用； (4)气相色谱/质谱(GC/MS)测定 将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液和内标物进行GC/MS测定，以标准工作液与内标物的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中衍生后的样品液注入GC/MS进行测定，测得样品中马来酰肼衍生物与内标物的色谱峰面积比，代入标准曲线，得到样品中的马来酰肼含量。2.根据权利要求1所述的一种卷烟烟蒂中马来酰肼含量的测定方法，其特征在于，内标物为特丁基对苯二酚。3.根据权利要求1所述的一种卷烟烟蒂中马来酰肼含量的测定方法，其特征在于，步骤(I)中马来酰肼农药标样加入量是10，20和50 μ L (MH浓度1430 μ g/mL)。4.根据权利要求1所述的一种卷烟烟蒂中马来酰肼含量的测定方法，其特征在于，步骤(I)中平衡的温度是22 ± I °C，湿度是60 ± 3 %，平衡时间是48小时。5.根据权利要求1所述的一种卷烟烟蒂中马来酰肼含量的测定方法，其特征在于，步骤(I)中的萃取液为甲醇。6....

【专利技术属性】
技术研发人员：张洪非，唐纲岭，刘楠，边照阳，姜兴益，陈再根，李中皓，杨飞，范子彦，李雪，庞永强，邢军，胡清源，
申请(专利权)人：国家烟草质量监督检验中心，
类型：发明
国别省市：