本发明专利技术的目的是建立昆虫病原线虫虫尸剂制作方法，提供一种新的田间应用昆虫病原线虫的方法。鉴于直接在田间施用昆虫病原线虫存在活力低下、线虫不耐干燥紫外照射等局限性，本发明专利技术通过以昆虫(大蜡螟等)为载体，在实验室用昆虫病原线虫水悬液侵染宿主昆虫大蜡螟等，36h后大蜡螟全部死亡制成虫尸剂，再在室温下至少扩繁4天后，直接在田间施用以防治植物地下害虫(韭菜韭蛆，迟眼蕈蚊)以代替传统化学农药对地下害虫防治，减少农药投入。本发明专利技术有效解决了直接施用昆虫病原线虫的不足，且制作简单，施用方便，效果明显，利于推广。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用昆虫病原线虫-昆虫宿主形成的昆虫病原线虫虫尸剂，对土壤有害昆虫进行有效控制的方法。
技术介绍
据世界卫生组织和联合国环境署报告，全世界每年有100多万人农药中毒，其中2万人死亡。美国每年发生6. 7万起农药中毒事故，在发展中国家情况更为严重。我国蔬菜农药污染已经成为一个居民强烈关注的民生问题，尤其是我国韭菜上农药检出率和超标率都在50%以上，屡有农药中毒事故发生，食品安全令人担忧。总所周知，长期高频次使用化学农药的大量使用会加速使昆虫产生抗药性，反而造成农户只能过量使用或使用高毒性，从而陷入防治害虫的恶性循环。韭菜蛆是迟眼蕈蚊(Bradysia Odoriphaga)的幼虫,常群集于韭菜根部,姓食其假茎和鳞茎，导致菜叶发黄甚至植株死亡。由于韭蛆栖息部位和危害场所隐蔽，抗药性强，力口之害虫发生世代严重重叠，一般的化学农药很难达到理想的防治效果。为了防治韭蛆，菜农于每年清明前后和秋末初冬一次甚至多次喷洒辛硫磷和毒死蜱等农药，有的菜农甚至错误使用国家违禁的高毒农药。例如，2010年我国青岛检出1930公斤毒韭菜9名市民中毒(2010-04-0923:42:43来源中国广播网)。原因是农民错误使用高毒有机磷农药，引起食物中毒。2011年河南南阳发现农药超标韭菜10人中毒来源不清楚(来源大河网，2011年03月29日11:10)。检测结果为三唑磷农药残留超标引起中毒。该农药具有强烈的触杀和胃毒作用。2011年,青岛连现三起韭菜中毒事件,确为农药中毒(http://www. tech-food.com 2011-4-27 8:01:01中国食品科技网)。经查明为有机磷类和氨基甲酸酯类(呋喃丹)农药中毒，氨基甲酸酯类 (呋喃丹)属于国家禁止在蔬菜上使用的高毒农药。因此，为了保护环境和我国居民蔬菜食用安全，寻找高效的生物防治措施来代替化学农药防治地下害虫韭菜蛆等，生产质量合格达标的韭菜等，是当前韭菜等蔬菜生产中亟待解决的问题。昆虫病原线虫(Entomopathogenic Nematodes EPNs)作为一种理想的生物杀虫齐Li，具有以下优点对昆虫专性寄生；寄主范围广；对寄主昆虫具有主动搜寻能力；能够从寄主昆虫的自然开口(如口器、气门和肛门)、伤口或节间膜进入寄主昆虫体内，并且能够迅速杀死寄主昆虫；能够以人工培养基低成本大量培养；田间施用时可和许多化学农药混合使用，对人畜、植物及有益生物及环境安全。由于昆虫病原线虫属于环境友好的生物天敌，欧美一些国家已经豁免注册生产和生产销售，并已经广泛应用于地下害虫甚至地下害虫的防治之中。目前昆虫病原线虫的施用方法主要为将通过固体液体培养出来的线虫悬液喷洒到农作物或果树上。固体介质和液体介质培养的线虫经过生产、淋洗、贮藏、运输、田间喷洒多个步骤，严重影响昆虫病原线虫的活性和毒力。同时昆虫病原线虫通常被喷洒到土壤表面，而昆虫病原线虫又不耐干燥，紫外照射，进一步影响昆虫病原线虫的活性和毒力，而昆虫病原线虫田间作用效果和持续时间与投放线虫存活时间相关，由于在田间直接施用昆虫病原线虫溶液进行地下害虫防治存在以上所述局限性，因而田间防治效果不稳定，大大限制了昆虫病原线虫的田间应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是接种昆虫病原线虫形成昆虫病原线虫昆虫尸体的复合体，即昆虫病原线虫虫尸剂，并在田间应用昆虫病原线虫虫尸剂防治有害昆虫。鉴于直接在田间施用昆虫病原线虫存在活力低下、线虫不耐干燥紫外照射等局限性，本专利技术通过以昆虫(大蜡螟、黄粉虫等)为载体,用昆虫病原线虫水悬液侵染宿主昆虫(如大蜡螟和黄粉虫)，36h大蜡螟全部死亡后，再在室温下扩繁4天以上，4-6°C低温储藏。直接在田间施用昆虫病原线虫虫尸剂以防治地下害虫如韭蛆、蛴螬，从而部分代替传统农药，最终减少防治有害昆虫的化学农药的用量。本专利技术有效解决了直接施用昆虫病原线虫的不足，且制作简单，施用方便，效果稳定，有利于推广。本专利技术包括虫尸剂的制作方法以及虫尸剂用于防治田间地下有害昆虫。本专利技术所述的线虫为昆虫病原线虫。本专利技术所述的大蜡螟为实验室培养。本专利技术昆虫病原线虫虫尸剂的探索具体包括以下步骤A、尼龙网避免昆虫结茧，提高线虫杀死率，降低人工除茧的成本投入。在培养皿中铺入一层尼龙网，加入昆虫病原线虫线虫悬液，使尼龙网全部润湿，但培养皿中没有明水，能够保证昆虫病原线虫能顺利侵染大蜡螟，结茧率降低了 90%以上？减少人力成本投入。每个 培养皿中放入20-30条昆虫，每只昆虫的接种量为I条以上昆虫病原线虫，将以上装置放于室温下培养，36h后大蜡螟全部死亡。上述昆虫病原线虫和死亡的昆虫构成的复合体，称为虫尸剂。处理il结茧大蜡螟个数M结茧率(％)尼龙膜 iO20O- 2220103I205 4I205 平均值5对照I132065.5 2122060 31420704132065.5平均值65.3B、虫尸剂在室温培养2天以上，保障昆虫病原线虫在昆虫体内繁殖一代。昆虫病原线虫刚侵染的昆虫，线虫基数很少，外界条件容易干扰甚至阻断线虫在昆虫体内的繁殖，本专利技术中使昆虫病原线虫侵染的昆虫在室温下培养5天以上，保障线虫在昆虫体内发育产生一代侵染期线虫，能够保障线虫在田间应用效果，甚至线虫继续利用昆虫尸体在昆虫体内发育,产生更过侵染期线虫。如表一,培养5天后，昆虫体内含有4万多条线虫/只。表1、不同培养天数昆虫体内的侵染期线虫数本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种昆虫病原线虫虫尸剂制作及其田间应用的方法，其特征在于将感染昆虫病原线虫的昆虫尸体用于植物有害昆虫的防治。
【技术特征摘要】
1.一种昆虫病原线虫虫尸剂制作及其田间应用的方法，其特征在于将感染昆虫病原线虫的昆虫尸体用于植物有害昆虫的防治。2.按照权利要求1所述的昆虫病原线虫虫尸剂制作及其田间应用，其特征在于用昆虫病原线虫侵染昆虫导致昆虫死亡，形成昆虫病原线虫和昆虫尸体的复合体。3.按照权利要求1和2所述的昆虫病原线虫虫尸剂制作方法，其特征在于在侵染装置内铺有一层尼龙网，加入昆虫病原线虫悬液。4.按照权利要求3所述侵染装置，其特征在于使昆虫...
【专利技术属性】
技术研发人员：阮维斌，宋东民，王欣，赵东辰，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：
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