【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然有机化学领域,涉及一种从大兴安岭野生过山蕨里提取黄酮的方法,特别是涉及一种利用酶法提取,高速逆流色谱分离纯化过山蕨总黄酮的新方法。
技术介绍
过山蕨,植株高达20厘米。根状茎短小,直立,先端密被小鳞片;鳞片披针形,黑褐色膜质,全缘。叶簇生;基生叶不育,较小,柄长1-3厘米,叶片长1-2厘米,宽5-8毫米,椭圆形,钝头,基部阔楔形,略下延于叶柄;能育叶较大,柄长1-5厘米叶片长10-15厘米,宽5-10毫米,披针形,全缘或略呈波状,基部楔形或圆楔形以狭翅下延于叶柄,先端渐尖,且延伸成鞭状(长3-8厘米),末端稍卷曲,能着地生根行无性繁殖。叶脉网状,仅上面隐约可见,有网眼1-3行,靠近主脉的I行网眼狭长,与主脉平行,其外的1-2行网眼斜上,网眼外的小脉分离,不达叶边。叶草质干后暗绿色,无毛。孢子囊群线形或椭圆形,在主脉两侧各形成不整齐的1-3行,通常靠近主脉的I行较长,生于网眼向轴的一侧,囊群盖向主脉开口,其外的1-2行如成对地生于网眼内时则囊群盖相对开,如单独地生于网眼内时则囊群盖开向主脉或叶边;囊群盖狭,同形,膜质,灰绿色或浅棕色。国内一般用溶剂法提取总黄酮,存在着操作温度高,得率偏低等缺点,本专利技术的不同之处在于主要采用酶法提 取,后期采用高速逆流色谱法分离纯化总黄酮,产品不仅得率高,而且纯度高。
技术实现思路
本专利技术优点本专利技术主要采用生物酶解技术,采用乙醇做提取剂,后期采用高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化总黄酮。本专利技术方法提取快捷、产品纯度高,得率高,选用食品允许使用的乙醇为提取溶剂回流提取,无化学残留。为实现上述目的 ...
【技术保护点】
一种采用酶法提取并与高速逆流色谱藕联,最终得到高纯度过山蕨总黄酮的方法,其步骤如下:(1)酶解:过山蕨干燥全草粉碎至20?40目,酶浓度0.2?0.3mg/ml,酶解温度45?50℃,酶解时间2?3h;(2)回流提取:加入60?70%乙醇,采用加热回流提取法,料液比1∶12?15,提取温度8090℃,提取两次,每次提取时间1?1.5h;(3)收集:回收乙醇,薄层层析检测分析,收集总黄酮部分;(4)过滤:过滤,合并两次滤液,得总黄酮粗提物;(5)分相:称取一定克数总黄酮粗提物,选择HSCCC溶剂系统按其比例分别将各种溶剂加入分液漏斗中,震荡使溶液充分混合,放置过夜,分相平衡后分出上相和下相;(6)取适量总黄酮粗提物溶于一定量的下相溶液中,震荡使完全溶解,备用;(7)HSCCC分离:以一定流速将溶剂的上相(固定相)和下相(流动相)以一定比例泵入HSCCC螺旋管,调整转速为800r/min,以2?3ml/min的流速泵入流动相,紫外检测器检测流出物;(8)收集各色谱组分,将HSCCC分离的到的流分挥干,得含量为90%以上的总黄酮。
【技术特征摘要】
1.一种采用酶法提取并与高速逆流色谱藕联,最终得到高纯度过山蕨总黄酮的方法,其步骤如下 (1)酶解过山蕨干燥全草粉碎至20-40目,酶浓度O.2-0. 3mg/ml,酶解温度45-50°C,酶解时间2-3h ; (2)回流提取加入60-70%乙醇,采用加热回流提取法,料液比1: 12-15,提取温度8090°C,提取两次,每次提取时间1-1. 5h ; (3)收集回收乙醇,薄层层析检测分析,收集总黄酮部分; (4)过滤过滤,合并两次滤液,得总黄酮粗提物; (5)分相称取一定克数总黄酮粗提物,选择HSCCC溶剂系统按其比例分别将各种溶剂加入分液漏斗中,震荡使溶液充分混合,放置过夜,分相平衡后分出上相和下相; (6)取适量总黄酮粗提物溶于一定量的下相溶液中,震荡使完全溶解,备用; (7)HSCCC分离以一定流速将溶剂的上相(固定相)和下相(流动相)以一定比例泵入HSCCC螺旋管,调整转速为800r/min,以2_3ml/min...
【专利技术属性】
技术研发人员:张亚红,姚德坤,姚德利,万莉,
申请(专利权)人:大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司,
类型:发明
国别省市:
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