本发明专利技术涉及鸡腿菇菌株的筛选及制备方法，属于微生物技术领域。本发明专利技术的菌株CopyindscomatusKMSX-978已于2012年10月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.6702。利用该菌株制备的液体及固体优良菌种，应用于鸡腿菇的促繁有着显著的社会、经济效益和广阔的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属微生物
，具体涉及鸡腿菇菌株KMSX-978及制备方法。
技术介绍
鸡腿COffiaiw1S营养丰富、味道鲜美，口感极好,经常食用有助于增进食欲、消化、增强人体免疫力，具有很高的营养价值。鸡腿蘑还是一种药用蕈菌，味甘性平，有益脾胃、清心安神、治痔等功效，经常食用有助消化、增进食欲和治疗痔疮的作用。20世纪70年代西方国家已开始人工栽培，中国于80年代人工栽培成功。由于鸡腿菇袋生长周期短，生物转化率较高，易于栽培，特别适合中国农村种植。近年来种植规模迅猛扩大，已成为伞菌目中国大宗栽培的食用菌之一 在鸡腿菇栽培技术中，优良菌种的获得是关键技术环节。鸡腿菇菌株的获得通常是利用子实体或孢子进行分离、纯化，直接应用于鸡腿菇的栽培或菌丝体生产。现有技术的不足 在于其生物学特性目前仍处于试验研究阶段，生物转化率较低，而且还要用熟料栽培，生产工艺及技术要素要求较高，因而制约了鸡腿菇商品经济的发展。另外只能根据菌丝形态及分离物来初步确定是否为鸡腿菇纯培养物；生产的菌种一般用固体菌种。目前在国内采用液体菌种进行鸡腿菇资源的保护应用不广泛。
技术实现思路
本专利技术的主要目的就是克服现有技术不足，利用云南原产地鸡腿菇子实体筛选出优良菌株，采用生物技术进行菌种鉴定，制备鸡腿菇液体及固体优良菌种，为鸡腿菇资源保护提供优良菌种 本专利技术采用的真菌是鸡腿comatus KMSX-978 ;保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；地址中国北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所；保藏日期=2012年10月11日；保藏登记入册的编号CGMCC No. 6702 鸡腿菇的子实体为中大型，群生，菇蕾期菌盖圆柱形，后期钟形。高7 20厘米，菌盖幼时近光滑，后有平伏的鳞片或表面有裂纹。幼嫩子实体的菌盖、菌肉、菌褶菌柄均白色，菌柄粗达I 2. 5厘米，上有菌环。菌盖由圆柱形向钟形伸展时菌褶开始变色，由浅褐色直至黑色，子实体也随之变软变黑，完全丧失食用价值本专利技术的技术方案 ①采集野生鸡腿菇子实体； ②组织分离或孢子分离； ③纯化菌株及菌株鉴定； ④生物学特性比较及生产性状比较； ⑤确定优良菌株； ⑥菌种生产及菌种应用； 经过反复筛选，获得菌丝体产量高、抗污染的鸡腿菇液体菌种专用菌株KMSX-978本专利技术真菌Copyinds comatus培养方法(以下为重量百分比): 菌种分离纯化培养基2%鸡腿菇下脚料、O. 001%VB1、2%葡萄糖、2%琼脂； 鸡腿菇菌株分离及鉴定方法 1、将鸡腿菇子实体组织块或孢子液接种到上述试管琼脂培养基斜面上，于18-24°C下培养5-10天，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好的菌株，获得鸡腿燕分尚试管种 2、将分离试管种菌丝块接种到上述琼脂培养基的平板培养皿上进行菌种纯化，2天后取尖端菌丝块接种在培养基斜面上，于18-24°C下培养5-7天，获得鸡腿菇纯化试管种 3、采用供试子实体与对应菌丝分离物，分别按SDS方法提取总DNA，进行PCR扩增及ITS序列测定,通过Blast对比样品的ITS序列与GENBANK中的鸡腿燕(Copyinds comatus)Identities=539/567 (95%)，Gaps=8/567 (1%)，分析确定分离得到的纯培养物为鸡腿菇菌丝 体 本专利技术鸡腿燕菌种的制备方法分为液体培养和固体培养两种 液体菌种制备方法 液体培养基配方为10 20%麸皮、10 20% 土豆、O. 5 1%蔗糖、10%玉米粉，余下为水，pH自然 1、将鸡腿菇的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，培养基配方为PDA培养基，于18-24°C下培养5-7天，获得试管菌种 2、将试管种接种到500ml三角瓶(每瓶装200ml)液体培养基中，培养基配方为前述液体培养基配方，于20-26°C下摇床培养，转速为120-160r/min，培养时间5_7天 3、将摇瓶菌种接种到25L自动发酵生产线的发酵罐中，通气量为1:0. 8ν/(ν ·π η);搅拌转速为120-160r/min ;接种量为5-10% ;罐压0. 04Mpa ； pH为6. O ;温度为20-26°C ;通气培养72-96小时，获得鸡腿菇液体菌种 固体菌种制备方法 固体培养基配方为棉籽壳90%、麸皮9%、碳酸钙1%、ρΗ自然 1、将鸡腿菇的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，培养基配方为PDA培养基，于18-24°C下培养5-7天，获得试管菌种 2、将试管种接种到500ml三角瓶(每瓶装200ml)液体培养基中，培养基配方为前述液体培养基配方，于20-26°C下摇床培养，转速为120-160 r/min，培养时间5_7天 2、采用前述固体培养基配方。将培养料混合后，加水拌均匀后，装入750ml的大口瓶中，压紧封口后在120°C灭菌60分钟，接入液体菌种，于20-26°C培养15-20天，直到菌丝长满具体实施例方式 实施例一 1、将鸡腿菇子实体组织块接种到上述菌种分离纯化培养基斜面上，于18°C下培养10天，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好的菌株，获得鸡腿燕分离试管种 2、将分离试管种菌丝块接种到上述琼脂培养基的平板培养皿上进行菌种纯化，2天后取菌丝块接种在培养基斜面上，于18°C下培养7天，获得鸡腿菇纯化试管种 3、采用供试子实体与对应菌丝分离物，分别按SDS方法提取总DNA，进行PCR扩增及ITS序列测定,通过Blast对比样品的ITS序列与GENBANK中的鸡腿燕(Copyinds comatus)Identities=560/565 (99%)，Gaps=2/565 (0%)，分析确定分离得到的纯培养物为鸡腿菇菌丝体 4、将CbAFiflifecomatus KMSX-978的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，培养基配方为PDA培养基，18°C下培养7天，获得试管种 5、将试管种接种到500ml三角瓶中(每瓶装200ml)液体培养基中，培养基配方为10%麸皮、10% 土豆、O. 5%蔗糖、10%玉米粉，余下为水，pH自然。于20°C下摇床培养，转速为120rpm,培养时间7天，获得一级液体菌种 将一级液体菌种接种到25L自动发酵生产线的发酵罐中，通气量为1:0. 8v/(v *min)；搅拌转速为120r/min ;接种量为5% ;罐压0. 04Mpa ； pH为6. O ;温度为22°C ;通气培养96小时，获得鸡腿菇液体菌种 实施例二 菌种制备的步骤与实施例一相同 1、将鸡腿菇子实体组织块接种到上述菌种分离纯化培养基斜面上，于22°C下培养6天，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好的菌株，获得鸡腿燕分离试管种 2、将分离试管种菌丝块接种到上述琼脂培养基的平板培养皿上进行菌种纯化，2天后取尖端菌丝块接种在培养基斜面上，于22°C下培养6天，获得鸡腿菇纯化试管种 3、采用供试子实体与对应菌丝分离物，分别按SDS方法提取总DNA，进行PCR扩增及ITS序列测定,通过Blast对比样品的ITS序列与GENBANK中的鸡腿燕(Cop本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种鸡腿菇菌株，其特征在于所述菌株为（Copyinds?comatus）?KMSX?978，该菌株的保藏号为CGMCC??NO.6702。
【技术特征摘要】
1.一种鸡腿燕菌株，其特征在于所述菌株为(CbAFifltfe comatus) KMSX-978,该菌株的保藏号为 CGMCC NO. 6702。2.根据权利要求1所述的鸡腿菇菌株的制备方法，所述菌株是经过常规的液体和固体发酵培养获得的，其特征在于所述液体和...
【专利技术属性】
技术研发人员：张微思，郭永红，罗孝坤，罗晓莉，田永生，何容，
申请(专利权)人：中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所，云南省供销合作社科学研究所，昆明菌苑食品有限公司，
类型：发明
国别省市：
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