一种科氏葡萄球菌选择性培养基及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种科氏葡萄球菌选择性培养基及其制备方法。其特征在于，配制1000ml选择性培养基的配方中含有：麦芽浸粉15g；鸡蛋蛋白液150ml；氯化钠5g；枸橼酸镁0.5g；琼脂15g；假细锥甲素8~12mg；香草乙酮0.5g；磷酸二氢钾0.2g；蒸馏水加至1000ml。最佳优化配方制备方法为：取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸橼酸镁；琼脂；假细锥甲素；香草乙酮；磷酸二氢钾；L-半胱氨酸及硫酸铜溶于百合水煮液中，混匀，定容，灭菌后分装。本发明专利技术与现有技术相比较，具有检出可靠、科氏葡萄球菌分离率高的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学检验领域，具体涉及ー种科氏葡萄球菌选择性培养基及其制备方法。
技术介绍
科氏葡萄球菌(Staphylococcuscohnii)属于葡萄球菌属(Staphylococcus)中的ー种，为低毒力条件致病菌，感染后症状不典型，且呈现多重耐药现象，给临床诊断和治疗带来一定困难，高效可靠的检验方法已是必然需要。目前科氏葡萄球菌的鉴别主要通过API Staph葡萄球菌和微球菌鉴定系统，但是 基于研究和药物试验，则缺乏专门的科氏葡萄球菌选择性培养基。目前临床上普遍使用的葡萄球菌选择性培养基为甘露醇高盐琼脂(Manitol SaltAgar)，用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。培养基成分为蛋白胨、鸡蛋蛋白液、D-甘露醇、氯化钠、酚红、琼脂。金黄色葡萄球菌菌落为黄色，大肠杆菌和沙门氏菌菌落为无色。但是，该种培养基并不能选择性培养科氏葡萄球菌，其原因在于在目前的选择性培养基中，如果标本中混有其他葡萄球菌，则金葡菌比科氏葡萄球菌生长更快，很快覆盖了培养基，科氏葡萄球菌无法生长。
技术实现思路
本专利技术的技术任务是针对以上现有技术的不足，提供一种对科氏葡萄球菌分离率高的选择性培养基。本专利技术解决其技术问题的技术方案是一种科氏葡萄球菌选择性培养基，其特征在，配制1000ml选择性培养基的配方中含有 麦芽浸粉15g ； 鸡蛋蛋白液150ml ； 氯化钠5g ； 枸櫞酸镁0. 5g ； 琼脂15g ； 假细锥甲素8 12mg; 香草こ酮0. 5 g; 磷酸ニ氢钾0. 2g ； 蒸馏水加至1000ml。优化方案中，每1000ml选择性培养基还含有硫酸铜5mg。优化方案中，每1000ml选择性培养基还含有L-半胱氨酸0. lg。优化方案中，每1000ml选择性培养基还含有浓度200g/L的百合水煮液200 300ml。最优化方案中，姆IOOOrnl选择性培养基还含有硫酸铜5mg ；L-半胱氨酸0.1g ;浓度200g/L的百合水煮液20(T300ml。一种科氏葡萄球菌选择性培养基的制备方法，其特征在于包括以下步骤 (1)取百合加水煮沸I小时，过滤，取滤液，调整体积到浓度为200g/L，得百合水煮液； (2)取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸櫞酸镁；琼脂；假细锥甲素；香草こ酮；磷酸ニ氢钾山-半胱氨酸及硫酸铜溶于步骤I所得百合水煮液中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，每次45 min,灭菌后分装。其中所述的麦芽浸粉、鸡蛋蛋白液提供碳氮源和能量；枸櫞酸镁和磷酸ニ氢钾为缓冲剂，并可以抑制杂菌生长；香草こ酮、L-半胱氨酸属氨基酸类，为营养剂，其中，香草こ酮为科氏葡萄球菌特异性营养剂，可以特异性的促进科氏葡萄球菌繁殖。；琼脂是选择性培养基的凝固剂；假细锥甲素对于金葡菌具有特异的抑菌作用，对于科氏葡萄球菌无效；鸡蛋蛋白液含有各种多肽、脂肪、生长因子、激素等，这些物质对促进科氏葡萄球菌的繁殖和生长都是很重要的因素，此外鸡蛋蛋白液还具有維持选择性培养基PH值恒定的作用。铜离 子属于重金属离子，在5mg/L这个浓度剂量下，沉积于金葡菌内部，导致胞壁消失或变薄，核糖体聚集成团块，最终导致细菌变形及破裂，呈现重金属源性损伤，而科氏葡萄球菌对重金属的运输能力和滲透能力低于金葡菌，也即重金属的抗性较高，故而加入硫酸铜可以有效地抑制金葡菌生长。百合为百合科植物卷丹Lilium lancifolium Thunb 、百合Liliumbrownii F. E. Brown var. viridulum Baker 或细叶百合Lilium pumilum DC.的干燥肉质鳞叶，含有蛋白质、脂肪、淀粉、还元糖、维生素B1、B2、泛酸、维生素C、￠-胡萝卜素等多种成分，可以提供能量代谢、细胞发育、新陈代谢因子，有助于促进科氏葡萄球菌生长，尤其是重金属环境下菌落的生长。本专利技术与现有技术相比较，具有检出可靠、科氏葡萄球菌分离率高的特点。具体实施例方式以下结合实际情况，对本专利技术的具体实施方式作详细说明。实施例1，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸橼酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素8mg ;香草こ酮0. 5 g ;磷酸ニ氢钟0. 2g ;蒸懼水加至1000ml。制备方法取麦牙浸粉；鸡蛋蛋白液；氣化纳；构橡Ife续；琼脂；假细锥甲素；香草こ酮；磷酸ニ氢钾溶于蒸馏水中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，每次45 min，灭菌后分装。实施例2，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸橼酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素12mg ;香草こ酮0. 5 g ;磷酸ニ氢钾0. 2g ;硫酸铜5mg ;蒸懼水加至1000ml。制备方法取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸橼酸镁；琼脂；假细锥甲素；香草こ酮；磷酸ニ氢钾；硫酸铜溶于蒸馏水中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，每次45 min,灭菌后分装。实施例3，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸橼酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素IOmg ;香草こ酮0. 5 g ;磷酸ニ氢钾0. 2g ;L-半胱氨酸0.1g ;蒸懼水加至1000ml。制备方法取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸橼酸镁；琼脂；假细锥甲素；香草こ酮；磷酸ニ氢钾；L-半胱氨酸溶于蒸馏水中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，毎次45 min，灭菌后分装。实施例4，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸櫞酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素9mg ;香草こ酮0. 5 g ;磷酸ニ氢钾0. 2g ;浓度200g/L的百合水煮液200ml ;蒸懼水加至1000ml。制备方法 (1)取百合加水煮沸I小时，过滤，取滤液，调整体积到浓度为200g/L，得百合水煮液； (2)取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸櫞酸镁；琼脂；假细锥甲素；香草こ酮；磷酸ニ氢钾；溶于步骤I所得百合水煮液中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，毎次45min,灭菌后分装。实施例5，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸櫞酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素Ilmg ;香草こ酮0.5 g ;磷酸ニ氢钾0. 2g ;硫酸铜5mg ；L-半胱氨酸0.1g ;浓度200g/L的百合水煮液300ml ;蒸懼水加至1000ml。制备方法为 (1)取百合加水煮沸I小时，过滤，取滤液，调整体积到浓度为200g/L，得百合水煮液； (2)取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸櫞酸镁；琼脂；假细锥甲素；香草こ酮；磷酸ニ氢钾山-半胱氨酸及硫酸铜溶于步骤I所得百合水煮液中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，每次45 min,灭菌后分装。所述的百合水煮液浓度为200g/L，指的是每升百合水煮液中含有生药200g。本专利技术所得科氏葡萄球菌选择性培养基具有检出可靠、科氏葡萄球菌分离率高的特点，为临床资料充分证明，有关资料如下。I对象与方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种科氏葡萄球菌选择性培养基，其特征在，配制1000ml选择性培养基的配方中含有：麦芽浸粉15g；鸡蛋蛋白液150ml；氯化钠5g；枸橼酸镁0.5g；琼脂15g；假细锥甲素8~12mg；香草乙酮?0.5?g；磷酸二氢钾0.2g；蒸馏水加至1000ml。

【技术特征摘要】
1.一种科氏葡萄球菌选择性培养基，其特征在，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有 麦芽浸粉15g ； 鸡蛋蛋白液150ml ； 氯化钠5g ； 枸橼酸镁O. 5g ； 琼脂15g ； 假细锥甲素8 12mg; 香草乙酮O. 5 g ; 磷酸二氢钾O. 2g ； 蒸馏水加至1000ml。2.根据权利要求1所述的一种科氏葡萄球菌选择性培养基，其特征在每IOOOml选择性培养基还含有硫酸铜5mg。3.根据权利要求1所述的一种科氏葡萄球菌选择性培养基，其特征在每IOOOml选择性培养基还含有L-半胱氨酸O. lg。4.根据权利要求1所述的一种科氏葡萄球菌选择性培养基，其特征在每IOO...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈淑香，
申请(专利权)人：陈淑香，
类型：发明
国别省市：