本发明专利技术涉及一种克鲁维毕赤酵母克鲁维变种菌株及其培养方法与应用，克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia?kluyveri?var.kluyveri)菌株SS1-5，在2010年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中科院微生物研究所，保藏号CGMCC?NO：4494。该菌株可以酿造低醇饮料，该饮料果香味浓，酒精含量低，口感甜润，风味和营养与无醇啤酒接近；此外，该低醇饮料，能够更好地保留麦芽汁中的有机营养，生产工艺简化，成本和能耗降低，减轻环境污染。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种克鲁维毕赤酵母克鲁维变种菌株及其培养方法与应用，特别涉及一种产香的克鲁维毕赤氏酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5 及其培养方法与应用，属于微生物
技术介绍
我国是啤酒饮料生产和消费大国，啤酒饮料消费人数众多，但酒中乙醇及微量甲醇、甲醛对消费者健康的危害引起社会的普遍关注，特别是过量嗜酒习惯对消费者危害极大，易因酒驾导致交通肇事，醉酒引发家庭矛盾等。为此，开发无醇或低醇饮品，提高营养水平，既满足消费者需求，也有利于人体健康，又可扩大消费人群，符合我国食品发展方向和世界饮料发展潮流。为此低醇或无醇啤酒饮料应运而生，具有广阔的发展市场。低醇饮料需要在保持普通啤酒风味品质的同时，还要求乙醇含量应低于O. 5%vol。目前无醇啤酒饮料生产方法主要有脱醇法、控制发酵法和路德类酵母发酵法，但随之带来工艺流程和生产成本的增加，使得其推广受到限制。如中国专利文献CN86104029A (申请号86104029)公开了生产低醇饮料的方法，是使高醇饮料，加入的水和再循环的滞留液之混合物通过反渗透系统，形成渗透物和滞留物。 从系统中排除主要含有醇和水的渗透物，小部分滞留物经回收后作为产品，同时将大部分滞留物再循环到反渗透系统，与新加入的饮料和水混合，这一技术工序复杂，能耗高。因此， 通过筛选新的菌株，优化生产工艺来生产低醇饮料是解决上述问题的经济而有效途径。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提供一种克鲁维毕赤酵母克鲁维变种菌株及其培养方法与应用。术语说明 低醇饮料乙醇含量低于O. 5% (w/w)的啤酒饮料。本专利技术的技术方案如下一种克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5， 2010年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号中科院微生物研究所，保藏号CGMCC NO :4494。上述克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5 分离自新压榨的鲜葡萄汁中，菌落边缘及中心都呈奶油色，球状突起，表面皱褶粗糙，不透明，不反光，边缘不整齐，毛绒状，白色暗淡；细胞呈椭圆形。液体Yro培养基培养2-3d，有沉淀和绒状膜出现。该菌株耐45°c，耐ρΗ2· 5-12. O,耐SO2 400mg/L,耐酒精8%(vol)，耐NaCl 为 100. Og/L，耐葡萄糖 500. Og/Lo上述克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5 的培养方法，步骤如下(I)取克鲁维毕赤酵母克鲁维变种菌株SS1-5，接种于YEro固体培养基，在25 281条件下，活化培养40 48h，制得活化菌株；(2)将步骤(I)制得的活化菌株接种于YEro液体培养基中，在25 28°C条件下， 培养15 20h，制得种子液；(3)将步骤(2)制得的种子液按照体积比2% 5%接种于麦芽汁液体培养基中，在25 28°C条件下，培养32 40h，即得生产用种子液。根据本专利技术优选的，所述步骤(I)中的YEro固体培养基每升组分如下葡萄糖20 克，酵母粉10克，蛋白胨10克，琼脂20克，用蒸馏水定容至1000毫升，pH值自然，115°C灭菌 30min。根据本专利技术优选的，所述步骤(2)中的YEro液体培养基每升组分如下葡萄糖20 克，酵母粉10克，蛋白胨10克，用蒸馏水定容至1000毫升，pH值自然，115°C灭菌30min。根据本专利技术优选的，所述步骤(3)中的麦芽汁液体培养基组分如下麦芽汁浓度 11 13。P，115°C灭菌 30min，pH 值自然。上述克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5 在制备低醇饮料中的应用。上述应用，步骤如下(i)将原料大麦芽经糖化后，按照2 4g/kg的添加量添加酒花，静置20 40min， 分离酒花糟及热凝固物，冷却，制得糖度为11 13° P的麦芽汁；(ii)按照体积比为2% 5%的添加量向步骤(I)制得的麦芽汁中添加克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株 SS1-5,在 20 24°C、通氧量 100L/ min的条件下发酵培养7 9d，制得发酵液； (iii)将步骤(I)制得的发酵液，经过滤、杀菌后，制得低醇饮料。根据本专利技术优选的，所述步骤(i)中的糖化，步骤如下将原料大麦芽在50 55°C条件下投料至水中，保持35 45min ;升温至63 68°C，保持55 65min ;然后升温至70 75°C，保持12 18min，碘验；75 80°C保持8 12min ;煮沸时间65 75min，煮沸强度不低于8%。进一步优选的，所述大麦芽与水的质量比为1: (4. 5 5. 5)。有益效果本专利技术所述克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株 SS1-5可以酿造低醇饮料，该饮料果香味浓，酒精含量低，口感甜润，风味和营养与无醇啤酒接近；此外，该低醇饮料，能够最大限度地保留麦芽汁中的有机营养成分，生产工艺简化， 成本和能显著耗低，减轻环境污染。附图说明图1是实施例3制得的低醇饮料中挥发性物质的GC-MS总离子流气相色谱图2是实施例3制得的低醇饮料中氨基酸分析色谱图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步阐述，但本专利技术所保护范围不限于此。本实施例中所述大麦芽购自兰州黄河麦芽有限公司，该麦芽质量符合啤酒麦芽国家标准(GB/T1686-2008)；啤酒花购自新疆绿宝酒花有限公司；克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5，在 2010年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号中科院微生物研究所，保藏号CGMCC NO 4494 ；其他原料均为本行业常规市售产品。实施例1一种克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5， 在2010年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号中科院微生物研究所，保藏号CGMCC NO :4494。上述克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5 分离自新压榨的鲜葡萄汁中，菌落边缘及中心都呈奶油色，球状突起，表面皱褶粗糙，不透明，不反光，边缘不整齐，毛绒状，白色暗淡；细胞呈椭圆形。·YEH)液体培养2-3d，有沉淀和绒状膜出现。该菌株耐温450C，耐ρΗ2· 5 12. O,耐SO2 400mg/L,耐乙醇8%(vol)，耐NaCl 为100g/L,耐葡萄糖500g/L。实施例2实施例1所述克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5的培养方法，步骤如下(I)用接种针取克鲁维毕赤酵母克鲁维变种菌株SS1-本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia?kluyveri?var.kluyveri)菌株SS1?5，在2010年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中科院微生物研究所，保藏号CGMCC?NO：4494。
【技术特征摘要】
1.一种克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Pichia kluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5，在2010年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号中科院微生物研究所，保藏号CGMCC NO :4494。2.权利要求1所述克鲁维毕赤酵母克鲁维变种(Picchiakluyveri var. kluyveri)菌株SS1-5的培养方法，其特征在于，步骤如下 (O用接种环取克鲁维毕赤酵母克鲁维变种菌株SS1-5，接种于YEH)固体培养基，在25 28 °C条件下，活化培养40 48h，制得活化菌株； (2)将步骤(I)制得的活化菌株接种于YEH)液体培养基中，在25 28°C条件下，培养15 20h，制得种子液； (3)将步骤(2)制得的种子液按照2 5%(v/v)接种于麦芽汁液体培养基中，在25 28°C条件下，培养32 40h，即得生产用种子液。3.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述步骤(I)中的YEro固体培养基每升组分如下葡萄糖20克，酵母粉10克，蛋白胨10克，琼脂20克，用蒸馏水定容至1000毫升，pH值自然，115°C灭菌30min。4.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述步骤(2)中的YEH)液体培养基每升组分如下葡萄糖20克，酵母粉10克，蛋白胨10克，用蒸馏水定容至1000毫升，pH值自然，115°C灭菌 30min。5.如权利要求2...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘天明，赵修报，王会会，
申请(专利权)人：山东轻工业学院，
类型：发明
国别省市：
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