本发明专利技术公开了一种以海藻糖为原料的皮肤保存液，含海藻糖45~165g/L，含小牛血清4.5~16.5g/L。所述皮肤保存液的制备方法，包括以下步骤：取海藻糖干粉，与蒸馏水混合搅拌并使之溶解，配制成为浓度为45-165g/L海藻糖溶液；加入小牛血清，搅拌均匀；将搅拌均匀的溶液调节pH值至7.0-7.2。本发明专利技术所述皮肤保存方法为：把新鲜同种异体皮肤经无菌生理盐水清洗2-5次，甩干后放入已配制好海藻糖保存液中浸泡8小时以上。本发明专利技术取材容易，操作过程相对简单，可适应长途运输，保存时间较长；减少缺血对离体皮肤造成的各种损伤，使离体皮肤保持有效活力，以便完成运输，临床手术。使异体皮肤在移植手术后迅速恢复功能。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种以海藻糖为原料的人体皮肤保存液及其制备方法。
技术介绍
目前国内多采用低温冷冻保存皮肤，其主要缺陷在于，复温过程中生产的重结晶对皮肤产生有害的冰晶损伤。研究表明只有复温速度达到3. 3^17°C /s时，才能避免冰晶损伤，如此快的复温速度在临床应用时难以达到。在深低温冷冻保存皮肤时常会加入二甲基亚砜作为细胞的保护剂。因其抗冻的作用，用于细胞冻存的保护，二甲基亚砜能够降低细胞 冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢的通透性。但有研究表明二甲基亚砜存在一定的毒性作用，与蛋白质疏水集团发生作用，导致蛋白质变性，具有血管毒性和肝肾毒性。冷冻皮肤用于临床复温时，可能对皮肤造成污染。专利号为89105183. X的专利公开了一种用蜂蜜保存皮肤的方法，对异体皮肤用蜂蜜浸泡进行保存。利用蜂蜜作为保存介质。可以较长时间保存皮肤。方法是把异体皮肤进行消毒、浸泡之后放入盛有蜂蜜的容器内保存。蜂蜜中含有大量糖，二十余种氨基酸，十余种酶、维生素、激素、抗菌素、高效醇、树脂矿物质等，具有杀菌，抗菌特性。用蜂蜜保存皮肤方法的处理过程比较简单，但蜂蜜因蜂种、蜂源、环境之不同，其化学组成有很大差异，质量难以保证，在实践中较难把握。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种保存离体皮肤活力明显高于传统皮肤保存的以海藻糖为原料的皮肤保存液。本专利技术的另一目的在于提供一种制备工艺简单、操作方法简便、运输方便，取材简单的所述以海藻糖为原料的皮肤保存液保存液制备方法。本专利技术的另一目的在于提供一种保存离体皮肤活力、时间较长、安全可靠的皮肤保存方法。本专利技术所述以海藻糖为原料的皮肤保存液，含海藻糖45 165g/L，含小牛血清4.5 16. 5g/L。本专利技术所述以海藻糖为原料的皮肤保存液的制备方法，包括以下步骤(1)取海藻糖干粉，与蒸馏水混合搅拌并使之溶解，配制成为浓度为45-165g/L海藻糖溶液； (2)加入小牛血清，搅拌均匀； (3)将搅拌均匀的溶液调节PH值至7.0-7. 2。本专利技术所述以海藻糖为原料的皮肤保存液的制备方法中蒸馏水温度在250C ±2°C时，加入海藻糖干粉并进行搅拌，并使其充分溶解。本专利技术所述皮肤保存方法为把新鲜同种异体皮肤经无菌生理盐水清洗2-5次，甩干后放入已配制好海藻糖保存液中浸泡8小时以上，用量以浸没保存物为准。本专利技术取材容易，操作过程相对简单，可适应长途运输，保存时间较长；减少缺血对离体皮肤造成的各种损伤，使离体皮肤保持有效活力，以便完成运输，临床手术。使异体皮肤在移植手术后迅速恢复功能。具体实施例方式海藻糖是一种安全，可靠的天然糖类，自身性质非常稳定，并对多种生物活性物质有神奇的保护作用。科学家们发现，沙漠植物卷叶柏在干旱近枯死遇水后却又可以奇迹复活；高山植物复活草能够耐过冰雪严寒；一些昆虫在高寒，高温和干燥失水等条件下不冻结，不干死，就是他们体内海藻糖创造的生命奇迹。海藻糖对生物体具有神奇保护作用，是因为海藻糖在高温、高寒、高渗透压及干燥失水等恶劣条件下在细胞表面能形成独特的保护膜，有效地保护蛋白质分子不变性失活，从而维持生命体的生命过程和生产特征。而自然界中如蔗糖、葡萄糖等其他糖类均不具有这一功能。小牛血清中含有蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等营养成分，对离体缺血的皮肤细胞起到某种保护作用。摘要海藻糖对生物体具有神奇的保护作用，是因为海藻糖在高温、高寒、高渗透压及干燥失水等恶劣环境下在细胞表面形成独特的保护膜，有效地保护蛋白质分子不变性失活。从而维持对皮肤的生物特 征保护。皮肤保存的目的是减少缺血对离体皮肤造成的各种损伤，以便完成贮存，运输期间保持有效活力。本专利技术提供一种不同以往技术的贮存方法，利用海藻糖溶液作为保存介质，可在普通冰箱(rio°c)较长时间保存皮肤，方法是把同种异体皮肤经无菌生理盐水清洗后，放入海藻糖溶液浸泡，经钴-60 Y射线辐照灭菌即可。以下结合实施例对本专利技术进行详细说明。实施例1 : 本专利技术方法包括以下步骤海藻糖溶液的配置取干净的容器，导入IOOOml蒸馏水(25°C )，缓缓加入45g海藻糖干粉，边加边用玻璃棒搅拌,使干粉完全溶解,加适量NaHC03，调节PH值至7. O过滤除菌。(2)新买的小牛血清存储在_20°C冰箱中，使用前至于4°C冰箱解冻10小时左右，然后至于56°C恒温水浴锅中灭活补体30分钟，水浴中不断摇动血清瓶使受热均匀，过滤除菌。(3)在常温下(25°C)加入小牛血清4. 5g制好后放入保存物(皮肤)加盖密封，即配即用让其自由冷却约2小时。放入4°C冰箱保存 (4)容器内的保存液以浸没皮肤为准。实施例2: 取干净的容器，导入IOOOml蒸馏水(26°C)，缓缓加入IOOg海藻糖干粉，边加便用玻璃棒搅拌，使干粉完全溶解，加适量NaHC03，调节PH值至7.1过滤除菌。(2)新买的小牛血清存储在_20°C冰箱中，使用前至于4°C冰箱解冻10小时左右，然后至于56°C恒温水浴锅中灭活补体30分钟，水浴中不断摇动血清瓶使受热均匀，过滤除菌。(3)在常温下(24°C)加入小牛血清IOg制好后放入保存物(皮肤)加盖密封，即配即用让其自由冷却约2小时。放入4°C冰箱保存 (4)容器内的保存液以浸没皮肤为准。实施例3 取干净的容器，导入IOOOml蒸馏水(25°C)，缓缓加入165g海藻糖干粉，边加便用玻璃棒搅拌，使干粉完全溶解，加适量NaHC03，调节PH值至7. 2过滤除菌。(2)新买的小牛血清存储在-2(T-30°C冰箱中，使用前至于4±2°C冰箱解冻l(Tll小时，然后至于58±2°C恒温水浴锅中灭活补体30分钟，水浴中不断摇动血清瓶使受热均匀，过滤除菌。(3)在常温下(25°C)加入小牛血清16. 5g配制好后放入保存物(皮肤)加盖密封，即配即用让其自由冷却约2 3小时。放入4±2°C冰箱保存 (4)容器内的保存液以浸没皮肤为准。同种异体皮肤选择标准(1)取皮取健康捐献者的新鲜尸体皮，用手动取皮刀取厚度为O.4mm的断层皮片 (2)年龄18-50周岁 (3)取材时间常温下不超过8小时，4°C以下不超过24小时。(4)无结核、肝炎、梅毒、艾滋病或风湿病史。(5)无严重创伤，主要包括大面积烧伤，多发性刺伤。(6)血清检测HIV、HbsAg, HCV和梅毒血清检测反映阴性。以下提供采用MTT皮肤细胞活性的检测方法对传统方法与本专利技术采用方法进行比对。MTT测定时设置阳性对照(新鲜皮肤)和阴性对照。应用MTT法检测皮肤活性(新鲜皮肤值为100)权利要求1.一种以海藻糖为原料的皮肤保存液，其特征在于含海藻糖45 165g/L，含小牛血清4.5 16. 5g/L。2.如权利要求1所述的皮肤保存液的制备方法，其特征在于 (1)取海藻糖干粉，与蒸馏水混合搅拌并使之溶解，配制成为浓度为45-165g/L海藻糖溶液； (2)加入小牛血清，搅拌均匀； (3)将搅拌均匀的溶液调节PH值至7.0-7. 2。3.如权利要求2所述的皮肤保存液的制备方法，其特征在于蒸馏水温度在250C ±2°C时，加入海藻糖干粉并进行搅拌，并使其充分溶解。4.一种皮肤保存方法，其特征在于把新鲜同种异体皮肤经无菌生理盐水清洗2-5次，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种以海藻糖为原料的皮肤保存液，其特征在于：含海藻糖45~165g/L，含小牛血清4.5~16.5g/L。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：雷良伟，曾爱林，韩新，雷金，谈慧，
申请(专利权)人：江西省科星生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。