一种痢必灵片的制备方法及应用技术

本发明专利技术提供一种痢必灵片的制备方法，由苦参500g、白芍250g、木香150g作为原料药制成，采用超临界萃取和微波萃取制备而成，使得苦参碱含量有很大提高，本发明专利技术还提供了痢必灵片在制备抑制人黑色素瘤细胞MV3细胞增殖药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药制剂
，具体涉及一种痢必灵片的制备方法及应用。
技术介绍
痢必灵片记载于卫生部标准WS3-B-0639-91，由苦参500g、白芍250g、木香150g作为原料药制成，能清热利湿。用于湿热痢疾，泻热，腹痛等症。现有技术中，尚未有痢必灵片在提取制备方面采用超临界和微波技术的报道，而 采用打粉和水煎煮的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。
技术实现思路
专利技术目的为了解决上述问题，本专利技术的目的在于提供一种痢必灵片的制备方法。本专利技术的另一个目的在于提供一种痢必灵片在制备抑制人黑色素瘤细胞MV3细胞增殖药物中的应用。技术方案本专利技术的目的是通过如下的方案实现的一种痢必灵片的制备方法，由苦参500g、白芍250g、木香150g作为原料药制成，所述的方法由下列步骤组成取木香，加入到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30_50°C，C02流量l_3ml/g生药·π η，萃取时间150-180min，得超临界萃取物，备用；取其余中药，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率400600W，萃取2次，每次4-8分钟，合并萃取液，浓缩，加到DlOl大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，备用；将上述超临界萃取物和微波提取物混合，加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成1600片，每片重O. 5g。上述一种痢必灵片的制备方法，所述CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。上述一种痢必灵片的制备方法，所述微波萃取功率500W，每次萃取6分钟。上述一种痢必灵片的制备方法，所述CO2超临界萃取的萃取压力20MPa，温度40°C, CO2 流量 2ml/g 生药· min,萃取时间 160min。上述痢必灵片在制备抑制人黑色素瘤细胞MV3细胞增殖药物中的应用。现有技术中，痢必灵片每片O. 5g，每次8片，一日3次，采用本专利技术制备成的痢必灵片每片O. 5g，每次仅需4片，一日服用2次，在具有更多活性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。试验一、不同方法制备的痢必灵片中苦参碱含量的比较1、仪器及试药本专利技术痢必灵片按实施例3方法制备，使用800g原料药，经提取制成1600片，每片重O. 5g。原痢必灵片，按部颁标准方法制备，使用800g原料药，经提取制成1600片，每片重O. 5g。Agilent 1200高效液相色谱仪；METTLERAE240电子分析天平；苦参喊对照品(中国药品生物制品检定所)。2、方法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(40 60 :0. 2)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按苦参碱峰计算，应不低于3000。对照品溶液的制备精密称取在60°C减压干燥4小时的苦参碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含18 μ g的溶液，即得。供试品溶液的制备取本专利技术痢必灵片和原痢必灵片，研细，混匀，取lg，精密称定，精密加入70%乙醇20ml，密塞，超声处理10分钟，离心，取上清液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。 3、结果结果表明，本专利技术痢必灵片中苦参碱的含量为1.47mg/片；而原痢必灵片中苦参碱的含量为O. 35mg/片，在服用量减少的情况下，苦参碱含量有很大提高。上述研究表明，采用本专利技术制备的痢必灵片，有效成分含量高于部颁标准法制备的痢必灵片。具体实施例方式以下通过实施例形式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例1取苦参500g、白芍250g、木香150g，将木香，加入到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压力15MPa，温度30°C，C02流量lml/g生药·π η，萃取时间150min，得超临界萃取物，备用；取其余中药，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率400W，萃取2次，每次4分钟，合并萃取液，浓缩，加到DlOl大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，备用；将上述超临界萃取物和微波提取物混合，加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成1600片，每片重O. 5g。经检测，成品中苦参碱的含量为1. 5Img/片。实施例2取苦参500g、白芍250g、木香150g，将木香，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为6%，萃取压力30MPa，温度50°C，CO2流量3ml/g生药·π η，萃取时间180min，得超临界萃取物，备用；取其余中药，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率600W，萃取2次，每次8分钟，合并萃取液，浓缩，加到DlOl大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，备用；将上述超临界萃取物和微波提取物混合，加入淀粉，70%乙醇制颗粒,干燥,压片，制成1600片，每片重O. 5g。经检测，成品中苦参碱的含量为1. 54mg/片。实施例3取苦参500g、白芍250g、木香150g，将木香，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力20MPa，温度40°C，CO2流量2ml/g生药·π η，萃取时间160min，得超临界萃取物，备用；取其余中药，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率500W，萃取2次，每次6分钟，合并萃取液，浓缩，加到DlOl大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，备用；将上述超临界萃取物和微波提取物混合，加入淀粉，70%乙醇制颗粒,干燥,压片，制成1600片，每片重O. 5g。经检测，成品中苦参碱的含量为1. 47mg/片。 实施例4 :痢必灵片抑制MV3细胞增殖的实验研究资料I实验材料1.1实验用细胞株人黑色素瘤细胞MV3细胞，南京正宽医药科技有限公司实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。1. 2实验药物研究药物本专利技术痢必灵片按实施例3方法制备。药液储液称取IOOmg痢必灵片，溶于5ml无水乙醇中，O. 2 μ m滤器过滤，500 μ Idoff管分装，-20°C存储，同时O. 2 μ m滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。1. 3实验试剂DMEM (GIBC0 公司 Cat. No. 12100_061Lot. No. 758137);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot. No. 100419)；NaHC03 (上海久亿化学试剂有限公司Cat. No. 11810_033Lot.No. 1088387)；Trypsin (AMRESC0 公司批号2010/04)；EDTA (AMRESC0 公司批号:2009/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种痢必灵片的制备方法，由苦参500g、白芍250g、木香150g作为原料药制成，其特征在于所述的方法由下列步骤组成：取木香，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4?6%，萃取压力15?30MPa，温度30?50℃，CO2流量1?3m1/g生药·min，萃取时间150?180min，得超临界萃取物，备用；取其余中药，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率400?600W，萃取2次，每次4?8分钟，合并萃取液，浓缩，加到D101大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，备用；将上述超临界萃取物和微波提取物混合，加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成1600片，每片重0.5g。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：卞毓平，
类型：发明
国别省市：