miRNA-874及其反义核苷酸的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种miRNA-874及其反义核苷酸的用途，具体为miRNA-874反义核苷酸在制备用于治疗和预防重大心脏疾病（心肌肥大，心肌纤维化）的药物组合物中的作用，以及miRNA-874核苷酸在制备用于诊断或预后上述心脏疾病的药物组合物或试剂盒中的作用。miRNA-874的反义核苷酸能够抑制心脏肥厚及心肌细胞肥大，同时也具有改善心功能、抑制心脏结构重塑及心脏纤维化的功能。miRNA-874的反义核苷酸可以作为一种新型的药物作用靶点，对心肌肥大起到防治作用，对于由心肌肥大引起的心肌纤维化、冠心病及心衰等心脏疾病的预防及治疗在临床上具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种内源性的非编码小RNAs的新药用途，具体涉及miRNA-874及其反义核苷酸的用途，尤其涉及其miRNA-874及其反义核苷酸在制备用于诊断、防治心脏疾病的药物中的用途，属于心脏疾病的诊断、预防和治疗领域。
技术介绍
心血管疾病主要包括高血压、冠心病、充血性心力衰竭等。目前,心血管疾病仍然是人类健康的头号杀手，全世界范围内每年有一千七百万人死于心血管疾病，其死亡率已接近所有癌症死亡率的总和。在我国，随着人民生活水平日益提高和饮食结构的改变，心血管疾病死亡率呈明显上升趋势，已超过癌症成为第一大致死原因。毫无疑问，预防和治疗心血管疾病仍然是医学与生物学的重大任务。心肌肥大是指组织水平上心肌组织的增厚和细胞水平上心肌细胞体积的增大的总称。它是由于心肌细胞体积增大而导致心脏体积增大所发生的一种疾病。该病是由一些生理和病理因素的共同刺激而发生的，它是许多心血管疾病的综合性表现。心肌肥大是心肌病的一种，是心肌细胞针对于血液动力学增加的一种应答反应。多种情况可以引起人体内血液动力的增加，比如高血压，心脏瓣膜疾病。长期的超负荷血液动力刺激会引起以心肌细胞体积增大为特征的心肌细胞重塑过程，也就是心肌肥大。现在一般认为存在两种情况的心肌肥大，一种是正常的生理性肥大，比如出生后伴随者发育发生的心肌肥大，还有体育锻炼引起的心肌肥大；另外一种是病理性心肌肥大，其早期特征是室壁和室间隔增厚，心肌收缩功能增强，因此被视为代偿性肥大，如果病情一直未得到缓解，心肌肥大后期会发生心室壁间质纤维化、心肌细胞收缩功能失调以及能量代谢，基因表达和电生理特征的异常， 最终导致心脏功能衰竭。鉴于心肌肥大的发生是一个进行性不可逆过程，而且最终会引起心力衰竭，现代医学已经把它作为心脏发生临床病变的一个里程碑式的心肌形态变化，认为它是导致心脏疾病和心脏猝死的一个危险因素。随着近来miRNA研究的热潮，这种内源性非编码小RNAs已经作为一个基因表达调节的中心因子显露，参加许多重要的生理过程。对于miRNA来说，它调控方式的特点决定了它的靶基因不会只有一个，而是一对多的方式，这就是使得miRNA的功能研究内容非常丰富。许多研究表明miRNA对于维持心脏正常生理功能具有重要作用，心脏中的miRNA异常表达与许多心脏疾病的发生相关。因此，将miRNA作为心脏疾病治疗的靶点，开发相关药物具有潜在的临床应用价值。尽管越来越多的miRNA作为人类疾病的生物标志物及治疗靶点被发现，但在心脏肥厚和心肌纤维化心脏疾病中的关键miRNA仍没有确定，其所发挥的功能是对该领域科研人员的挑战。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是确定或发现调控心肌细胞肥大的在心脏中表达的miRNA，进一步确定其在心肌肥厚、冠心病、心肌纤维化等心脏疾病中的关键作用，将其应用到这些心脏疾病的诊断、防治中。除非特别指明，本文中的“miR-874”均指“miRNA-874”，其序列为下述SEQ ID NO: I 所示的核苷酸序列5，-CUGCCCUGGCCCGAGGGACCGA-3，。除非特别指明，本文中的“miR-874反义核苷酸”、“874反义核苷酸”和“anta_874” 均指“miRNA-874反义核苷酸”，其序列为下述SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列5’-UCGGUCCCUCGGGCCAGGGCAG-3’ 。 除非特别指明，本文中的“anta-NC”均指“miRNA-874反义核苷酸的阴性对照”，其序列为下述SEQ ID N0:7所示的核苷酸序列5，-CAGUACUUUUGUGUAGUACAA-3，。除非特别指明，本文中的“PE”均指“苯肾上腺素”。除非特别指明，本文中的“ET-1 ”均指“内皮素”。针对上目的，本专利技术提供的技术方案如下。一方面，本专利技术提供一种miRNA-874的反义核苷酸在制备用于预防或治疗心脏疾病的药物中的用途，其中，所述miRNA-874反义核苷酸的序列为下述SEQ ID N0:2的核苷酸序列5’ -UCGGUCCCUCGGGCCAGGGCAG-3’。优选地，所述miRNA-874反义核苷酸的核苷酸序列在每个碱基均进行了 2’ -甲氧基修饰。优选地，所述的心脏疾病选自心肌肥厚、心肌纤维化、冠心病及心衰中的一种或多种。还一方面，本专利技术还提供一种用于预防或治疗心脏疾病的药物组合物，其中，所述药物包含上述本专利技术所述的miRNA-874反义核苷酸序列和药学上可接受的载体、病毒或辅料。优选地，所述载体选自胆固醇、纳米颗粒和脂质体中的一种或多种。优选地，所述药物组合物的给药方式选自口服、静脉注射和肌肉注射。另一方面，本专利技术还提供一种miRNA-874核苷酸在制备用于诊断或预后心脏疾病的药物或试剂盒中的用途，其中，所述miRNA-874的序列为下述SEQ ID N0:1的核苷酸序列5，-CUGCCCUGGCCCGAGGGACCGA-3，。优选地，所述的心脏疾病选自心肌肥厚、心肌纤维化、冠心病及心衰中的一种或多种。本专利技术还提供一种用于诊断或预后心脏疾病的药物组合物或试剂盒，其中，所述药物组合物或试剂盒包含上述本专利技术所述的miRNA-874核苷酸和药学上可接受的载体、病毒或辅料。优选地，所述载体选自胆固醇、纳米颗粒和脂质体中的一种或多种。本专利技术人通过实验发现miRNA-874在肥大的心肌细胞和心脏肥厚中表达显著上调。通过构建miRNA-874过表达腺病毒或miRNA-874转基因小鼠加强miRNA-874的表达发现，miRNA-874过表达在细胞水平能诱导心肌细胞肥大的发生，miRNA-874的转基因小鼠的心脏在用肥大刺激因子处理后与对照组相比有了明显的肥大表型及纤维化程度，同时一些肥大基因的表达也与对照组相比有了明显的增加。具体的，本专利技术人发现miRNA-874在肥大的心肌细胞中与对照组相比有了明显的提高，对其进行肥大指标的检测发现，心肌肥大的指标如细胞表面积，蛋白/DAN的比值及肌小节的重组也与对照组相比都有了明显的增加。miRNA-874的转基因小鼠在用肥大刺激因子(苯肾上腺素)后的心脏表型，心脏体重比，边缘区的心肌细胞横截面积(WGA染色)及心肌纤维化(Masson染色)与野生型相比都有了明显的增加。以上实验说明miRNA-874能够诱导心肌肥大的发生，这意味着miRNA-874可作为一种早期诊断预防心肌肥大，心肌纤维化等心脏疾病的生物标志物。另外，本专利技术人通过大量的试验证明miRNA-874的反义核苷酸对心肌肥厚，心肌纤维化具有保护作用。具体的，本专利技术人在细胞水平通过转染miRNA-874的反义核苷酸发现，它能够抑制肥大刺激因子所诱导的心肌细胞肥大，包括肥大指标如细胞表面积，蛋白/ DAN的比值及肌小节的重组也与刺激组相比都有了明显的降低。在动物水平通过注射外源 miRNA-874的反义核苷酸也能够抑制肥大模型的肥大效应包括心脏表型，心脏体重比，边缘区的心肌细胞横截面积(WGA染色)及心肌纤维化(Masson染色)都有了明显的降低，同时心功能也有了明显的改善。以上实验说明miRNA-874的反义核苷酸通过抑制心肌细胞肥大对心脏具有保护作用，它对许多心脏疾病具有潜在的预防和治疗价值，可成为一种治疗心肌肥大，预防心肌纤维化的药物。具体的，可以合成反本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种miRNA?874的反义核苷酸在制备用于预防或治疗心脏疾病的药物中的用途，其中，所述miRNA?874反义核苷酸的序列为下述SEQ?IDNO:2的核苷酸序列：5“?UCGGUCCCUCGGGCCAGGGCAG?3“。

【技术特征摘要】
1.一种miRNA-874的反义核苷酸在制备用于预防或治疗心脏疾病的药物中的用途，其中，所述miRNA-874反义核苷酸的序列为下述SEQ IDNO:2的核苷酸序列5，-UCGGUCCCUCGGGCCAGGGCAG-3，。2.根据权利要求I所述的用途，其特征在于，所述miRNA-874反义核苷酸的核苷酸序列在每个碱基均进行了 2’ -甲氧基修饰。3.根据权利要求I或2所述的用途，其特征在于，所述的心脏疾病选自心肌肥厚、心肌纤维化、冠心病及心衰中的一种或多种。4.一种用于预防或治疗心脏疾病的药物组合物，其特征在于，所述药物包含权利要求I至3中任一项中所述的miRNA-874反义核苷酸序列和药学上可接受的载体、病毒或辅料。5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述载体选自胆固醇、纳米颗粒和脂质体中的一种或...

【专利技术属性】
技术研发人员：李培峰，王昆，
申请(专利权)人：中国科学院动物研究所，
类型：发明
国别省市：