本发明专利技术提供经合理设计的抗体和多肽，其包含协同地提供针对靶Fc受体的增强的选择性和结合亲和力的多个Fc区氨基酸取代。所述多肽在多个位置上突变，使其当掺入抗体治疗药中时比具有野生型Fc组分的那些更有效。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及抗体、融合蛋白和多肽。具体地讲，本专利技术涉及经设计的抗体和多肽，其包含协同地提供针对靶Fe受体的增强的选择性和结合亲和力的Fe区氨基酸取代。专利技术背景 抗体是对特定抗原具有结合特异性的蛋白质。天然抗体通常是大约150，000道尔顿的杂四聚体糖蛋白，由两条相同的轻(L)链和两条相同的重(H)链组成。每条轻链都通过一个共价二硫键与重链相连，而不同的免疫球蛋白同种型的重链之间二硫键的数量是不同的。每条重链和轻链也具有规律间隔的链内二硫桥。每条重链在其一端具有可变结构域(Vh)，随后是多个恒定结构域。每条轻链在其一端具有可变结构域(')，在其另一端具有恒定结构域；轻链的恒定结构域与重链的第一恒定结构域对齐，轻链可变结构域与重链的可变结构域对齐。据信特定氨基酸残基构成轻链可变结构域和重链可变结构域之间的界面。术语“可变的”是指以下事实可变结构域的某些部分在序列上于抗体之间差异很大并且负责各特定抗体对其特定抗原的结合特异性。然而，可变性并非均匀分布在整个抗体可变结构域内。它集中在轻链可变结构域和重链可变结构域两者中的被称为互补决定区(CDR)的3个区段中。保守性更高的可变结构域部分称为构架区(FR)。天然重链和轻链的可变结构域各自包含4个FR，主要呈P -折叠构象，由3个⑶R连接，所述⑶R形成环连接，并且在某些情况下形成该3 -折叠结构的一部分。每条链的CDR通过FR紧密保持在一起，并与其它链的CDR —起促成形成抗体的抗原结合位点(参见Kabat等，Sequencesof Proteins of Immunological Interest,第5版.Public Health Service, NationalInstitutes of Health, Bethesda, Md. (1991))。恒定结构域不直接参与抗体与抗原的结合，但具有多种效应子功能。根据其重链恒定区的氨基酸序列的不同，可将抗体或免疫球蛋白划分为不同类别。有5大类免疫球蛋白IgA、IgD、IgE、IgG和IgM,并且它们中的若干还可进一步分为亚类(同种型)，例如IgGl、IgG2、IgG3和IgG4 ；IgAl和IgA2。对应于免疫球蛋白不同类别的重链恒定区分别称为a、S、e、Y和ii。在各种人免疫球蛋白类别中，已知仅人IgGl、IgG2、IgG3和IgM激活补体；并且人IgGl和IgG3比IgG2和IgG4更有效地介导ADCC。抗体经木瓜蛋白酶消化产生2个相同的抗原结合片段，称为Fab片段，各有一个抗原结合位点，以及一个残留的“Fe”片段，该名称反映了其易结晶的能力。已经测定了人IgG Fe 区的晶体结构(Deisenhofer, Biochemistry 20:2361-2370 (1981))。在人 IgG 分子中，通过木瓜蛋白酶切割N-端到Cys 226而产生Fe区。Fe区对于抗体的效应子功能而言至关重要。可将由抗体Fe区介导的效应子功能分为2类(1)在抗体与抗原结合之后发挥作用的效应子功能(这些功能涉及补体级联或携带Fe受体(FcR)的细胞的参与)；和(2)不依赖于抗原结合而发挥作用的效应子功能(这些功能赋予循环中的持久性和通过胞转作用而跨越细胞屏障转移的能力)。Ward和Ghetie, Therapeutic Immunology 2:77-94(1995)。尽管抗体与必需抗原的结合具有中和作用，其可阻止外源抗原与其内源靶(例如受体或配体)的结合，但仅靠结合可能不能去除外源抗原。为了有效去除和/或破坏外源抗原，应赋予抗体与其抗原的高亲和力结合和有效的效应子功能两者。Fe 等体(FcR) 抗体和抗体-抗原复合物与免疫系统细胞的相互作用引起各种反应，包括抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)(综述可参见Daeron，Annu.Rev. Tmmun01. 15:203-234 (1997) ;Ward 和 Ghetie, Therapeutic Tmmuno1. 2:77-94(1995);以及 Ravetch 和 Kinet, Annu. Rev. Tmmuno1. 9:457-492 (1991))。若干抗体效应子功能由与抗体Fe区结合的Fe受体(FcR)介导。FcR按其对免疫球蛋白同种型的特异性来定义；IgG抗体的Fe受体称为Fe y R，IgE的称为Fe e R，IgA的称为Fe a R等等。在人类中已经鉴定了 Fe YR的3个亚类Fc YRI (⑶64)、Fe Y RII (⑶32)和Fe Y RIII (⑶16)。因为每一 Fe Y R亚类由2个或3个基因编码，并且由于可变RNA剪接导致形成多种转录物，所以Fe Y R同种型中存在着广泛多样性。编码Fe y RI亚类的3个基因(Fe y RIA、Fe y RIB和Fe y RIC)簇集在I号染色体长臂的lq21. I区；编码Fe y RII同种型的基因(Fe y RIIA, Fe y RIIB 和 Fe y RIIC)和编码 Fe Y RIII 的 2 个基因(Fe y RIIIA和Fe y RIIIB)都簇集在lq22区。这些不同FcR亚类在不同细胞类型上表达(综述可参见Ravetch 和 Bollard, Annu. Rev. Immunol. 19:275-290 (2001)。例如在人类，Fe Y RIIIB仅在嗜中性粒细胞上发现，而Fe YRIIIA则在巨噬细胞、单核细胞、自然杀伤(NK)细胞以及T细胞亚群上发现。要注意的是，Fe Y RIIIA是NK细胞上仅有的FcR，NK细胞是参与ADCC的细胞类型之一。Fe Y RI、Fc Y RII和Fe Y RIII是免疫球蛋白超家族(IgSF)受体;Fc Y RI在其胞夕卜结构域中具有3个IgSF结构域，而Fe Y RII和Fe Y RIII在其胞外结构域中只有2个IgSF结构域。另一类Fe受体是新生儿Fe受体(FcRn)。FcRn在结构上类似于主要组织相容性复合物(MHC)，由与P 2-微球蛋白非共价结合的a-链组成。Fe y RII (CD32)具有若干同种型即IIa, IIbl, IIb2、IIb3和He,并且是最广泛分布的人Fe Y R类型，在大多数种类的白细胞、树突细胞和血小板上都表达。FcyRII是低亲和力受体，仅与聚集IgG结合。它是能与IgG2结合的仅有的Fe Y R类别。Fe Y RIIa在包括单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞在内的多种细胞类型上表达，它可通过其ITAM基序与其它免疫球蛋白受体组合共同活化所述多种细胞类型。Fe y RIIa与细胞上连接的IgG抗体结合并导致这些细胞溶解。该过程称为抗体依赖性细胞介导的细胞毒性。Fe y RIIb也是广泛表达的，但携带免疫受体的基于酪氨酸的抑制性基序(immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif, ITIM),其是Fe Y RIIb 的抑制效应所必需的。当它与表面免疫球蛋白通过Ab-Ag复合物而交联时，Fe YRIIb可通过引发负信号转导(negative signaling)而抑制B细胞激活。巨卩遼细胞和单本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：I德安吉洛，D布莱勒，SAL汤姆尤，E埃斯科巴卡雷拉，PI拉里奥，A奥尔恩，DKY潘，SB迪克西特，
申请(专利权)人：酵活有限公司，
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