一种卤地菊多糖及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种卤地菊多糖及其制备方法和应用，卤地菊多糖的主要结构为：以2→6连接的β-D-果聚糖为主链，以与主链1→2连接的α-D-葡萄糖为端基。该多糖具有优良保湿效果的卤地菊多糖，可作为卷烟烟丝的保湿剂。本发明专利技术还公开了一种卤地菊多糖的制备方法，提取步骤包括：样品干燥、粉碎→浸提→离心、过滤→浓缩→醇沉→冻干→粗多糖，分离纯化步骤包括：粗多糖→离子交换柱层析→收集→冻干→凝胶柱层析→收集→冻干→纯多糖，操作简单，无污染，分离纯化效果好，杂质去除率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物多糖领域，具体涉及一种卤地菊多糖及其制备方法和应用。
技术介绍
齒地菊Wedelia prostrata (Hook. Et Am. ) Hems I.为菊科膨蜞菊属植物，在浙江有广泛分布，全草药用，具有清热凉血、祛痰止咳的作用。目前主要是对卤地菊的二萜、倍半萜、黄酮类、有机酸类化合物的研究，对其多糖的研究及应用报道还没有出现。多糖是由10个以上的单糖通过糖苷键连接而成的高分子聚合物，糖类化合物的分离和纯化是糖类研究中的难点之一，不同的提取纯化方法不仅会直接影响提取的多糖的性质不同，也可能导致活性结构的变化，因此选择合适的方法是至关重要的，应在尽可能少 的破坏原有多糖的结构构象的基础上得到较高的提取效率，又需要尽可能的分离纯化得到较均匀的单一多糖组分。现有的多糖制备方法较多，其中以提取法居多。如中国专利ZL200410020591. 5中公开了一种木耳多糖的提取方法，它是以木耳为原料，采用醇提、微波或超声波处理，并结合复合酶法酶解，将木耳中的多糖物质充分溶解出来，提高了木耳多糖的得率，保持了多糖物质的生物活性，有利于人体的吸收；同时，利用木耳多糖加工过程中剩余的残渣提取碱性木耳多糖，最大限度地利用了原料、节约了资源，从而降低了成本；该方法对多糖结构破坏小，多糖得率高，能最大程度地发挥出抗肿瘤、降血压、降血脂、降血糖等功效。中国专利申请CN201110236229. I中公开了一种西洋参多糖的提取方法，按下述步骤进行的一、将西洋参在水中浸泡，煎煮，趁热过滤；二、再用水煎煮两次，合并水煎液后浓缩，放置冷却；三、醇沉，过滤，滤渣挥发至无醇味，在60 90°C条件下烘干，粉碎，即得西洋参多糖；该方法采用水提取西洋参多糖，降低成本，提取西洋参多糖的纯度高且收率高，多糖纯度在38. 8%以上，多糖收率在4. 7%以上，解决了现有工艺中经醇提后再水提制备西洋参多糖而存在的纯度低、成本高、收率低的技术问题。可见，不同的多糖应对应适合的制备方法进行制备。多糖的化学结构是其生物活性的基础，也是多糖化学研究的难点和关键。多糖化学结构复杂，单糖可以多重连接位点连接，构成不同构型的直链和支链，还可以通过硫酸化、乙酰化、磷酸化、甲基化等衍生形式形成糖衍生物。多糖的结构分类可分为一级结构和高级结构(包括二级、三级和四级结构)，这种分类是沿用蛋白质结构的分类方法。鉴于多糖结构的复杂性，目前对多糖具体结构的研究也较少。
技术实现思路
本专利技术提供了一种具有优良保湿效果的卤地菊多糖，可作为卷烟烟丝的保湿剂。本专利技术还提供了一种卤地菊多糖的制备方法，该方法操作简单、工艺环保，适于工业化生产。—种卤地菊多糖，其主要结构为以2 —6连接的β-D-果聚糖为主链，以与主链I —2连接的a-D-葡萄糖为端基。即所述的卤地菊多糖的主要结构为a-D-Glc-(I —2)-n，其中，β-D-Fru 为 β-D-果聚糖，a-D-Glc 为 a-D-葡萄糖。所述的卤地菊多糖的制备方法，包括步骤a.将干燥的卤地菊样品粉碎，得到卤地菊粉体；b.将卤地菊粉体在水中提取，得到提取液，其中，卤地菊粉体与水的质量比为I :15-50 ；c.提取液冷却后经离心和真空抽滤得到滤液，滤液真空浓缩至提取液体积的三十分之一至十分之一，得到浓缩液； d.向浓缩液中加入体积分数为95%_100%的乙醇，使体系中乙醇体积分数达到50%-70%，搅拌，静置8h-12h，离心，收集沉淀，冷冻干燥后即得粗多糖；e.将粗多糖用水溶解，上二乙氨乙基琼脂糖凝胶离子交换柱，以水洗脱，收集洗脱液浓缩，冻干，再用水溶解，上凝胶柱层析，以水洗脱，收集洗脱液浓缩，冻干，得到卤地菊多糖。步骤a中,所述的卤地菊样品选用卤地菊全株。为进一步保证提取的效果，优选步骤a中，卤地菊粉体的目数为20目-100目。步骤b中，卤地菊粉体在100°C沸水中提取2小时-3小时。步骤b中，卤地菊粉体在水中提取2次-5次，每次卤地菊粉体与水的质量比为I :15-50。所述的体积分数为95%_100%的乙醇可采用市售产品。所述的离心的条件优选为转速为lOOOOrmp，时间为15min，温度为25°C。在此条件下，沉淀比较完全。步骤e中，所述的二乙氨乙基琼脂糖凝胶离子交换柱可选用市售产品，如DEAE-Sepharose Fast Flow 离子柱,柱型为)(K 26 X 100cm。所述的凝胶柱可选用市售产品，如为S^hacryl S-200系列柱，柱型为XK26XIOOcm0所述的卤地菊多糖可作为卷烟烟丝保湿剂应用于卷烟中，应用时不需要改变卷烟原有的加工工艺。所述的卤地菊多糖的用量优选为卷烟烟丝质量的0. 02%。-0. 2%0。所述的卤地菊多糖在卷烟中的应用方法包括将所述的卤地菊多糖经水溶解，配制成0. 08mg/ml-0. 8mg/ml的溶液喷加到卷烟烟丝上,制备卷烟。卷烟的制备采用现有的卷烟的制备方法如经混丝、平衡、卷烟等工序后，将含卤地菊多糖的烟丝制成卷烟。本专利技术结构鉴别时采用以下仪器高效液相为Waters 1525高效液相仪，红外全扫描采用Nicolet 6700型傅立叶红外光谱仪，气相采用Agilent7890A气相色谱，气质联用采用 Finnigan Trace Ultra-DSQ II 气-质联用色谱仪,核磁采用 AVANCE III (500MHz)傅立叶超导核磁共振谱仪。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点本专利技术卤地菊多糖具有优良的保湿性能，实验证明，卤地菊多糖对卷烟有较好的保湿性。本专利技术卤地菊多糖的制备方法，提取步骤包括样品干燥、粉碎一浸提一离心、过滤一浓缩一醇沉一冻干一粗多糖，分离纯化步骤包括粗多糖一离子交换柱层析一收集一冻干一凝胶柱层析一收集一冻干一纯多糖，操作简单，无污染，分离纯化效果好，杂质去除率高。结构分析运用多重手段，确保结果的准确性。对卷烟运用研究也具有实际生产意义和价值。附图表说明图I为实施例2中成品的高效液相谱图；图2为实施例2中成品的红外全扫描谱图； 图3为实施例2中成品的气相分析谱图；图4为实施例2中成品的气质联用分析谱图；图5为实施例2中成品的1H核磁谱图；图6为实施例2中成品的C谱核磁谱图；图7为实施例4中成品卤地菊多糖、蒸馏水及丙二醇的保湿率随时间变化图。具体实施例方式本专利技术结合以下实施例做进一步描述。保湿率(％)=M/M0 X 100% ；其中，Μ。为样品放置前水溶液重量，M为某时刻样品的即时重量。实施例I将干燥的卤地菊全株样品粉碎至40目，按料液比(质量比)I 20加入一定量的蒸馏水，100°C沸水提取2次，每次3小时，合并2次提取液得到总提取液；总提取液冷却后经25°C高速(10000转/分)离心15min和真空抽滤后，真空浓缩至原总提取液体积的1/10，向浓缩液中加入体积分数95%的乙醇水溶液，使体系中乙醇体积分数达50%，搅拌，静置10h，离心，收集沉淀，冷冻干燥后即得粗多糖；将粗多糖用水溶解,上DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱(柱型为XK 26 X IOOcm的二乙氨乙基琼脂糖凝胶离子交换柱)，以蒸馏水洗脱，收集洗脱液浓缩，冻干，再用水溶解，上S印hacryl S-200系列凝胶柱(柱型为XK 26 X 100cm)层析，以蒸馏水洗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卤地菊多糖，其特征在于，所述的卤地菊多糖的主要结构为：以2→6连接的β？D？果聚糖为主链，以与主链1→2连接的α？D？葡萄糖为端基。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨君，储国海，黄芳芳，蒋健，张安强，
申请(专利权)人：浙江中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：