分离Tr1细胞的新方法技术

本发明专利技术涉及用于分离Tr1细胞、休眠Tr1细胞和/或活化Tr1细胞的方法，用于在细胞群体中富集或去除Tr1细胞、休眠Tr1细胞和/或活化Tr1细胞的方法，以及用于治疗慢性炎症性疾病、自身免疫疾病、过敏性疾病、癌症和器官移植病症的方法和试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于鉴别和/或分离Trl细胞、休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞的方法，经过富集的Trl细胞、休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞的群体，去除Trl细胞、休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞的群体，以及用于诊断或治疗慢性炎症性疾病、自身免疫疾病、过敏性疾病、癌症和器官移植病症的方法和试剂盒。
技术介绍
免疫系统的体内平衡依赖于针对入侵病原体的免疫应答与针对自身抗原的免疫耐受之间的平衡。中枢和外周耐受都是用于诱导和维持T细胞耐受的重要机制。在过去的十年里，已经对在维持外周免疫耐受方面扮演重要角色的调节性T细胞(Treg)给予了众多关注。现在已经公认Treg可以分成两种不同的亚型天然Treg(nTreg)和诱导型Treg群体，例如TGF-β诱导的Treg细胞、Trl细胞或Th3细胞。因为这些Treg群体在外周免疫 耐受中扮演重要角色，所以能够鉴别、分离或富集这些不同的Treg亚组以便促进对于免疫病症(例如慢性炎症性疾病、自身免疫疾病或过敏性疾病)的诊断、评估或治疗已经变成一个关键议题。举例来说，自nTreg被鉴别以来，其一直是通过⑶25的表达来进行鉴别。然而，⑶25也是常规T细胞(convT)的一种活化标志物，因此不是Treg细胞所专有的。通过鉴别例如 Foxp3、CD127(W02007140472)、CD45RA(W02007/117602)、CD 134 (W02009/036521)和⑶49d(W02009/047003)等细胞表面或细胞内标志物已经在人类nTreg的辨别方面取得了最新进展。关于Trl细胞，其特异性鉴别仍然存在困难且主要基于IL-10分泌辨别。因此需要提供用于更好地且更精确地辨别Trl细胞的方式。此外，Trl细胞已被证实可用于细胞疗法中，Trl细胞注射入患有克罗恩病(Crohn’s disease)的患者体内以改善其状况。鉴于Trl细胞在细胞疗法中的用途，因此需要更精确地鉴别和分离Trl细胞。专利技术人已经发现可使用⑶127和⑶62L细胞表面标志物特异性地鉴别Trl细胞。实际上，除⑶4标志物和任选的⑶25标志物以外，另外使用⑶127和⑶62L这两种标志物允许在常规的休眠和活化T细胞以及休眠和活化nTreg中辨别Trl细胞。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是一种鉴别Trl细胞群体的方法，其包含检测细胞群体上的⑶4、⑶127和⑶62L标志物的细胞表面表达，其中表达-CD4 和-低水平的CD127，和-低水平的CD62L，的细胞是Trl细胞。本专利技术的另一个目的是一种鉴别休眠Trl细胞群体的方法，其包含检测细胞群体上的⑶4、⑶25、以及⑶127和⑶62L标志物中至少一种的细胞表面表达，其中表达-CD4 和-低水平的⑶127和⑶62L中的至少一种，且不表达-CD25，的细胞是休眠Trl细胞。本专利技术的另一个目的是一种鉴别休眠Trl细胞群体的方法，其包含检测细胞群体上的⑶4、⑶25、⑶127和⑶62L标志物的细胞表面表达，其中表达·-CD4 和-低水平的CD 127，-低水平的CD62L，且不表达-CD25，的细胞是休眠Trl细胞。本专利技术的另一个目的是一种鉴别活化Trl细胞群体的方法，其包含检测细胞群体上的⑶4、⑶25、⑶127和⑶62L标志物的细胞表面表达，其中表达-CD4，-CD25，-低水平的CD127，和-低水平的CD62L，的细胞是活化Trl细胞。本专利技术的另一个目的是一种用于分离休眠或活化Trl细胞群体的方法，其包含如上所述鉴别休眠Trl细胞群体或活化Trl细胞群体，和分离所述群体。本专利技术的另一个目的是一种分离的休眠Trl细胞或活化Trl细胞群体，其是通过如上所述的方法获得。本专利技术的另一个目的是一种经过分离的Trl细胞群体，其是通过如上所述的方法获得。本专利技术的另一个目的是一种经过分离的休眠Trl细胞群体，其是通过如上所述的方法获得。本专利技术的另一个目的是一种经过分离的活化Trl细胞群体，其是通过如上所述的方法获得。本专利技术的另一个目的是一种用于富集细胞群体中的Trl细胞的方法，其包含-鉴别表达⑶4、低水平的⑶127和低水平的⑶62L的细胞，-选择所述细胞，从而获得Trl细胞被富集的细胞群体，其中Trl细胞的百分比是富集之前Trl细胞的百分比的至少两倍。本专利技术的另一个目的是一种用于富集细胞群体中的休眠Trl细胞的方法，其包含-鉴别表达⑶4以及低水平的⑶127和⑶62L中的至少一种，且不表达⑶25的细胞，-选择所述细胞，从而获得休眠Trl细胞被富集的细胞群体，其中休眠Trl细胞的百分比是富集之前休眠Trl细胞的百分比的至少两倍。本专利技术的另一个目的是一种用于富集细胞群体中的活化Trl细胞的方法，其包含-鉴别表达⑶4、⑶25且表达低水平的⑶127和低水平的⑶62L的细胞，-选择所述细胞， 从而获得活化Trl细胞被富集的细胞群体，其中活化Trl细胞的百分比是富集之前活化Trl细胞的百分比的至少两倍。本专利技术的另一个目的是一种用于富集细胞群体中的休眠和/或活化Trl细胞的方法，其包含如上所述鉴别休眠和/或活化Trl细胞，和选择所述细胞，从而获得休眠和/或活化Trl细胞被富集的细胞群体，其中休眠和/或活化Trl细胞的百分比是富集之前休眠和/或活化Trl细胞的百分比的至少两倍。本专利技术的另一个目的是一种经过富集的Trl细胞、休眠Trl细胞或活化Trl细胞的群体，其是根据如上所述的方法获得。本专利技术的另一个目的是一种用于去除细胞群体中的Trl细胞、休眠Trl细胞或活化Trl细胞的方法，其包含-根据本专利技术鉴别Trl细胞、休眠Trl细胞或活化Trl细胞，-去除所述细胞，从而获得Trl细胞、休眠Trl细胞或活化Trl细胞被去除的细胞群体，其中Trl细胞、休眠Trl细胞或活化Trl细胞的百分比是去除之前Trl细胞、休眠Trl细胞或活化Trl细胞的百分比的至多O. 5倍。本专利技术的另一个目的是一种用于去除细胞群体中的休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞的方法，其包含如上文所定义那样鉴别休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞，和去除所述细胞，从而获得休眠和/或活化Trl细胞被去除的细胞群体，其中休眠和/或活化Trl的百分比是去除之前休眠和/或活化Trl细胞的百分比的至多O. 75倍。本专利技术的另一个目的是一种休眠和/或活化Trl细胞被去除的细胞群体，其是根据上述方法获得。本专利技术的另一个目的是一种Trl细胞、休眠Trl细胞或活化Trl细胞被去除的细胞群体，其是根据上述方法获得。本专利技术的另一个目的是一种用于鉴别或分离Trl细胞群体、休眠Trl细胞群体或活化Trl细胞群体的试剂盒，其包含用于检测⑶4、⑶25、⑶127和⑶62L的细胞表面表达的工具。本专利技术的另一个目的是一种医药组合物，其包含如上所述的经过分离的休眠和/或活化Trl细胞群体,或如上所述的经过富集的休眠和/或活化Trl细胞群体,或如上所述的休眠和/或活化Trl细胞被去除的细胞群体。在一个实施方案中，包含如上所述的经过分离的休眠和/或活化Trl细胞群体或如上所述的经过富集的休眠和/或活化Trl细胞群体的医药组合物是用于预防或治疗与感染或移植或过敏性疾病有关的免疫应答，或用于预防或治疗炎症性病症或自身免疫病症。本专利技术的另一个目的是一种如上所述的经过分离和/或富集的Trl本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.04.15 EP 10368021.1;2010.04.15 US 61/324,4501.一种鉴别休眠Trl细胞群体的方法，其包括检测细胞群体上的⑶4、⑶25、⑶127和⑶62L标志物的细胞表面表达，其中表达 -CD4 和 -低水平的CD 127， -低水平的⑶62L， 且不表达-CD25, 的细胞是休眠Trl细胞。2.一种鉴别活化Trl细胞群体的方法，其包括检测细胞群体上的⑶4、⑶25、⑶127和⑶62L标志物的细胞表面表达，其中表达-CD4，-CD25, -低水平的⑶127，和 -低水平的⑶62L， 的细胞是活化Trl细胞。3.一种用于分离休眠Trl细胞群体或活化Trl细胞群体的方法,其包括 -根据权利要求I或2鉴别休眠Trl细胞群体或活化Trl细胞群体，和 -分离所述群体。4.一种分离的休眠Trl细胞群体或活化Trl细胞群体，其是通过根据权利要求3所述的方法获得的。5.一种用于富集细胞群体中的休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞的方法，其包括 -根据权利要求I或2鉴别休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞， -选择所述细胞， 从而获得休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞被富集的细胞群体，其中休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞的百分比是富集之前休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞的百分比的至少两倍。6.一种富集的休眠Trl细胞群体，其是根据权利要求5获得的。7.一种用于去除细胞群体中的休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞的方法，其包括 -根据权利要求I鉴别休眠Trl细胞和/或根据权利要求2鉴别活化Trl细胞， -去除所述细胞， 从而获得休眠Trl细胞和/或活化Trl细胞被去...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿尔诺·福萨特，瓦莱丽·布鲁恩，纳萨莉·贝尔蒙特，埃尔韦·巴斯蒂安，布里吉特·夸坦尼恩斯，
申请(专利权)人：特克赛尔公司，
类型：
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