隐孔菌在制备治疗猪繁殖与呼吸综合征产品中的应用制造技术

技术编号:8314311 阅读:373 留言:0更新日期:2013-02-13 11:27
本发明专利技术公开了隐孔菌的新用途。本发明专利技术所提供的隐孔菌的新用途是下述1)-4)中的至少一种:1)隐孔菌或其提取物在制备治疗猪繁殖与呼吸综合征产品(如药物)中的应用。2)隐孔菌或其提取物在制备提高繁殖与呼吸综合征病毒感染猪存活率产品(如药物)中的应用。3)隐孔菌或其提取物在制备降低猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒的病毒滴度的产品(如药物)中的应用。4)隐孔菌或其提取物在制备降低繁殖与呼吸综合征病毒感染猪的体温的产品(如药物)中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及隐孔菌的新用途,特别涉及隐孔菌在制备治疗猪繁殖与呼吸综合征产品中的应用
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征(俗称蓝耳病)(Porcine Reproductive andRespiratorySyndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus, PRRSV)引起的猪的传染性疾病。各种年龄的猪均易感染该病毒,其主要症状是妊娠母猪感染后引起流产、死胎、木乃伊胎及弱胎,感染仔猪可发生呼吸障碍和高病死率。该病于1987年在美国首次报道,上世纪九十年代中期传入我国。目前,该病发生于世界上几乎所有养猪国家,为我国和世界养猪业造成了极大的经济损失。2006年在我国爆发了由PRRSV变异株引起的高致病猪繁殖与呼吸综合征,其特点为急性高致死,仔猪发病率可达100%,死亡率高达50%,母猪流产率达35%以上,而且母猪和育肥猪死亡率高达30%。此次爆发高致病猪繁殖与呼吸综合征给我国养猪业造成了巨大的经济损失。猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的病毒性传染病。PRRSV属于尼多病毒目动脉炎病毒科动脉炎病毒属,为有囊膜的单股正链RNA病毒,基因组全长约15. 4kb,病毒在细胞浆、内质网和高尔基体组装成熟,并以出芽形式释放聚集在细胞内囊泡中,然后转运到细胞膜释放到细胞外,完成病毒复制周期。目前,预防和控制PRRS病毒感染和传播主要靠疫苗,然而却不成功。针对PRRS病毒的疫苗包括弱毒疫苗和灭活苗已经应用多年,然而和疫苗株几乎一致的毒株引起的繁殖与呼吸综合征仍然发生。非典型或急性繁殖与呼吸综合征在免疫猪群爆发,以及2006年在我国爆发的高致病繁殖与呼吸综合征更是对目前所用疫苗的保护性和安全性提出质疑。因此,开发特异、高效的抗PRRS病毒药物对预防和控制繁殖与呼吸综合征具有重要的现实意义。隐孔菌(Cryptoporus volvatus (Peck) Shear是一种生于松林树干上的野生大型真菌,也有记载生于衰老的冷杉、云杉的树干或枯立木上,我国的云南、广东、广西、海南等多个省份都有分布。隐孔菌子实体较小,无柄或偶尔有柄,一般侧生于基物上,木栓质,扁球形或近球形,I. 5-3. 5cmX 2-4. 5cm,厚l_3cm,盖表面光滑,浅土黄色或深蛋壳色,老后淡红褐色。边缘纯滑而厚,与菌幕相连。菌幕白色至污白色,且与菌盖色调明显不同,厚约1_。菌管层由菌幕所包盖,初期完全封闭,后逐渐在靠近基部出现一个圆形或近圆形的孔口,偶有两个,孔径2-4. 5mm。菌肉纯白至污白色,软木栓质,厚2_8mm。菌管同菌肉色,长2_5mm,管口圆形至近多角形,管口面浅粉灰色或带褐色,每毫米3-5个,壁厚,口缘完整。孢子光滑、无色、长椭圆形,10-13 μ mX 4-6 μ m。云南丽江民间曾作为小儿断奶时的口含物,或水煎服治疗气管炎和哮喘
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供隐孔菌的新用途。本专利技术所提供的隐孔菌的新用途是下述I) -8)中的至少一种I)隐孔菌在制备治疗猪繁殖与呼吸综合征产品(如药物)中的应用。2)隐孔菌在制备提高繁殖与呼吸综合征病毒感染猪存活率产品(如药物)中的应用。3)隐孔菌在制备降低猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒的病毒滴度的产品(如药物)中的应用。4)隐孔菌在制备降低繁殖与呼吸综合征病毒感染猪的体温的产品(如药物)中的应用。 5)隐孔菌提取物在制备治疗猪繁殖与呼吸综合征产品(如药物)中的应用,所述隐孔菌提取物是从隐孔菌子实体中提取的水溶性物质。6)隐孔菌提取物在制备提高繁殖与呼吸综合征病毒感染猪存活率产品(如药物)中的应用,所述隐孔菌提取物是从隐孔菌子实体中提取的水溶性物质。7)隐孔菌提取物在制备降低猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒的病毒滴度的产品(如药物)中的应用,所述隐孔菌提取物是从隐孔菌子实体中提取的水溶性物质。8)隐孔菌提取物在制备降低繁殖与呼吸综合征病毒感染猪的体温的产品(如药物)中的应用,所述隐孔菌提取物是从隐孔菌子实体中提取的水溶性物质。上述I) -8)中,所述隐孔菌可为子实体和/或菌丝体和/或孢子。所述隐孔菌子实体可为新鲜的子实体也可为干燥的子实体。上述应用中,所述隐孔菌提取物可按照如下方法获得将隐孔菌子实体粉碎后用水浸提,收集水溶性物质得到所述隐孔菌提取物。上述隐孔菌提取物的制备方法中,所述隐孔菌子实体可粉碎至50-80目。上述隐孔菌提取物的制备方法中,所述用水浸提可为在4_65°C (如4_10°C、50-65。。、4。。或 50°C)用水浸提 10-14 小时。上述隐孔菌提取物的制备方法中,可采用离心分离所述水溶性物质。所述离心采用的离心力可为8000-10000g,离心时间可为10-20分钟(如10-15分钟或15-20分钟)。本专利技术的实验证明用隐孔菌制备的隐孔菌提取物对仔猪没有明显的毒副作用,能够减轻PRRSV高致病毒株感染仔猪引起的高热,降低仔猪血清病毒滴度,提高感染仔猪的存活率。附图说明图I为MTT法测定0-0. 7mg/L的隐孔菌提取物溶液对PAMs的细胞毒性结果。图2为间接免疫荧光测定0-0. 6mg/L的隐孔菌提取物培养液抑制PRRSV CH-Ia株在MARC-145细胞内的复制结果。Marc-145细胞感染PRRSV CH-Ia株(MOI=O. I) 2小时后,换含有或不含有隐孔菌提取物的培养液,24小时后进行间接免疫荧光,检测病毒在细胞内的复制。图3为0-0. 6mg/L的隐孔菌提取物培养液抑制PRRSV CH-Ia株毒株在MARC-145细胞内的复制。Marc-145细胞感染PRRSV CH-Ia (MOI=O. I) 2小时后,换含有或不含有隐孔菌提取物的培养液,24小时后收集上清测病毒滴度。图4为间接免疫荧光测定0-0. 6mg/L的隐孔菌提取物培养液抑制PRRSV高致病毒株JXwn06在PAMs细胞内的复制结果。HPV表示PRRSV高致病毒株JXwn06。PAMs细胞感染PRRSV高致病毒株JXwn06 (MOI=O. 1)2小时后,换含有或不含有隐孔菌提取物的培养液,24小时后进行间接免疫荧光检测病毒在细胞内的复制。图5为0-0. 6mg/L的隐孔菌提取物培养液抑制PRRSV VR2332株和PRRSV高致病毒株JXwn06在PAMs细胞内的复制。PAMs 分别感染 PRRSV VR2332 株和 PRRSV 高致病毒株 JXwn06(M0I=0. I), 2h 后,换含有或不含有隐孔菌提取物的培养液,37°C培养24h后收上清测病毒滴度。 图6为隐孔菌提取物降低PRRSV高致病毒株JXwn06引起的高热症状。图7为隐孔菌提取物降低PRRSV高致病毒株JXwn06感染仔猪的血清病毒滴度。图8为隐孔菌提取物提高PRRSV高致病毒株JXwn06感染仔猪的存活率。图9为用0-0. 6mg/L的隐孔菌提取物培养液预处理Marc-145细胞,不抑制PRRSV感染。图10为用0-0. 6mg/L的隐孔菌提取物培养液与病毒共孵育,对病毒活性没有明显抑制作用。图11为隐孔菌提取物抑制PRRSV RNA的合成。图12为隐孔菌提取物对PRRSV RNA依赖的RNA聚合酶活性的影本文档来自技高网
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【技术保护点】
隐孔菌在制备治疗猪繁殖与呼吸综合征产品中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王贺祥封文海张薇薇高丽刘金华孙怡朋杨倩朱孟娟冯杉杉耿雪冉袁翔鹤马增强杜芳张瑞
申请(专利权)人:中国农业大学
类型:发明
国别省市:

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