尿路表皮癌的检测方法技术

本发明专利技术提供一种尿路表皮癌的检测方法，可以简易且高精度地进行尿路表皮癌的检测。对被检体给药5-氨基乙酰丙酸（ALA）或其衍生物或者它们的盐之后从该被检体中采集尿液，检测所采集的尿液中的细胞内的荧光的存在或者荧光量。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及，具体地说是涉及使用了 5-氨基乙酰丙酸(ALA)或其衍生物或者它们的盐(以下，有时称为“ALA类”)的。
技术介绍
尿路表皮癌的检测，通常是对脱落在尿液中的细胞进行巴氏染色后在显微镜下观察来进行的，诊断要求熟练，还存在细胞漏看多的问题。检测困难会关系到癌症发现的延误，并且也会关系到病症复发的错过。另一方面，已知在膀胱癌患者的内视镜手术中，将ALA类注入膀胱内，观察膀胱内的癌细胞发出的荧光来决定切除部位(例如，参照非专利文献I)，还知道通过口服给药或者 静脉注射ALA类也可以观察膀胱内的荧光(参照专利文献I)。此外，还提出有一种含有ALA类的肿瘤诊断剂，其目的在于，将该肿瘤诊断剂按照一次每Ikg体重给药O. OOlmg IOg后，通过测量血液、体液、组织、尿、粪便、唾液、汗、髓液、精液或者眼泪等从体内或体外采集到的试料中的原卟啉IX、尿卟啉I、粪卟啉I等来判断所诊断的脑、鼻道、鼻腔、气管、支气管、口腔、咽、食道、胃、乳房、结肠直肠、肺、卵巢、中枢神经系统、肝脏、膀胱、尿道、尿管、胰腺、颈管、腹腔、肛门管或者子宫颈等组织中有无肿瘤(例如，参照专利文献2)。此外，现已报告有PDD细胞学(PDDcytology)法，该法以荧光尿中的剥离细胞为对象，进行用于检测ALA诱导荧光阳性细胞的荧光细胞学诊断以及流式细胞术，该荧光尿中的剥离细胞通过将从膀胱癌患者回收的尿液残渣溶解于ALA浓度被调整到200μ g/mL的无血清培养液中，在37°C下在暗室中保温2个小时后再用于检测的体外培养(In vitroincubation)法或者从膀胱癌患者的膀胱内保持了 2个小时后的ALA溶液(I. 5gALA/50mL缓冲液)中回收的尿液残洛用于检测的体内培养(in vivo incubation法)法进行了处理(例如，参照非专利文献2)。现有技术文献专利文献专利文献I :W02009/130893号公报专利文献2 日本特开2006-124372号公报非专利文献非专利文献I :5- 7 S 7 7' V >酸(5-ALA)膀胱内注入t二 J:石蛍光膀胱鏡全用^ &膀胱癌O光力学的診断、井上啓史、辛島尚、鎌田雅行、執印太郎、倉林睦、大础祐治、日本泌尿器科學會雜誌、Vol. 97、pp. 719-729非专利文献2:膀胱癌O光力学的診断-蛍光尿細胞診O有用性_、藤本清秀、三宅牧人、中井清、松村善昭、穴井智、平尾佳彦、日本泌尿器科学界雑誌Vol. 101、No. 2、総会特集号 February、2010如上所述，由于以往的尿路表皮癌的检测要求熟练，而且存在细胞漏看多的问题，所以期待有高精度且简易的新手法。例如，在上述的体外培养(In vitro incubation)法中，需要在暗黑的环境中进行培养的培养装置，而且，在采尿后至结果出来之前，患者需要等待几个小时。在上述体内培养(in vivo incubation)法中,存在着在膀胱内注入ALA溶液时给患者造成了负担，且只能发现膀胱癌的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种不需要特殊的培养装置，在采尿后立刻就能进行判断等，可以简单且高精度地检测出尿路表皮癌的尿路表皮癌检测方法。本专利技术的专利技术者们，在使用上述ALA类的技术是否也可以应用到尿路表皮癌的细胞诊断的构思下，经过反复努力研究的结果，发现通过检测给药ALA类的被检体的排出到体外的尿液中游离的癌细胞中的荧光，可以查出尿路表皮癌，而且，也发现该ALA类的给药量，为过去的用于决定切除部位的用量的一半以下这样的极少量就足够，并据此完成了本专利技术。·也就是说，本专利技术涉及(I) 一种，其特征在于，对被检体给药5-氨基乙酰丙酸(ALA)或其衍生物或者它们的盐之后，从该被检体中采集尿液，检测所采集的尿液中的细胞内的荧光的存在或者荧光量，(2)—种，其特征在于，对从给药了 5-氨基乙酰丙酸(ALA)或其衍生物或者它们的盐后的被检体中采集的尿液进行细胞分离，检测该细胞的荧光的存在或者荧光量，(3)如上述(I)或者(2)所述的，其特征在于，将5-氨基乙酰丙酸(ALA)或其衍生物或者它们的盐，用ALA盐酸盐换算，按每Ikg被检体给药O. 05^20mg, (4)如上述(I)或者(2)所述的，其特征在于，口服给药5-氨基乙酰丙酸(ALA)或其衍生物或者它们的盐，(5)如上述(I)或者(2)所述的，其特征在于，被检体是尿路表皮癌的疑似患者，(6) —种尿路表皮癌检测剂，用于上述(I)或者(2)所述的方法，其特征在于，含有5-氨基乙酰丙酸(ALA)或其衍生物或者它们的盐。技术效果根据本专利技术，不需要特殊的培养装置，可以在采尿后立刻进行判断，而且还可以在检测到尿液中的细胞内的荧光的时候，判定为存在异常，可以立刻转移到用内视镜诊断或者实施尿道摘除措施。例如，在进行用于确认病症有无复发的内视镜检测之前，进行该尿液中细胞的荧光检测，没有可疑点的话则不必进行内视镜检测。这种方法，不仅很大程度上减轻了患者的负担，而且还减少了国民医疗费。像这样，本专利技术的方法，不仅是膀胱癌，所有的尿路表皮癌的检测都可以迅速且简易高精度地进行，是该领域的医疗中划时代的方法。而且，即使少量的ALA类的给药量也可以检测出来，有利于减少成本，并且还收到了不会实质性地引起光损伤这样安全方面的效果。附图说明图I是给药ALA盐酸盐Ig时从尿液中分离出的细胞的荧光显微镜照片。图2是给药ALA盐酸盐500毫克时从尿液中分离的细胞的荧光显微镜照片。具体实施方式作为本专利技术的，只要是对被检体给药5-氨基乙酰丙酸或其衍生物或者它们的盐(ALA类)之后，从该被检体中采集尿液，检测所采集到的尿液中的细胞内的荧光(例如，检测荧光的存在或者荧光量)的方法；和对从给药了 5-氨基乙酰丙酸或其衍生物或者它们的盐(ALA类)后的被检体中采集的尿液进行细胞分离，检测分离后的细胞中的荧光的方法，则没有特别的限制，对于本专利技术的，还包括收集用于检测的数据的方法。此外，作为本专利技术的尿路表皮癌检测剂只要是在上述本专利技术的方法中使用的、含有ALA类的尿路表皮癌检测剂，就没有特别的限制。此外，所谓的本专利技术的检测对象的尿路表皮癌，就是覆盖尿路(肾脏、肾盂、尿管、膀胱、尿道)内腔的转移上皮所发生的恶性肿瘤。此外，本专利技术的被检体，可以是包括人在内的哺乳动物，具体地说，例示了通过问诊等诊察疑似为尿路表皮癌的人。 ALA类中，作为ALA的衍生物，可以例举出含有ALA的酯基和酰基的衍生物，优选例举了甲酯基和甲酰基，甲酯基和乙酰基，甲酯基和正丙醇基，甲酯基和正丁酰基，乙酯基和甲酰基，乙酯基和乙酰基，乙酯基和正丙醇基，乙酯基和正丁酰基的组合。ALA类中，作为ALA或者其衍生物的盐，可列举出例如,盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、醋酸盐、丙酸盐、甲苯磺酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、乙醇酸盐、甲磺酸盐、丁酸盐、戊酸盐、柠檬酸盐、延胡索酸盐、马来酸盐、苹果酸盐等酸附加盐，以及钠盐、钾盐、钙盐等金属盐，铵盐、烷基铵盐等。并且，这些盐在使用时被作为溶液使用，其作用与ALA及其衍生物是同样的。在这些ALA类中，优选为5-氨基乙酰丙酸、或者5-氨基乙酰丙酸的甲酯，乙酯、丙酯、丁酯、戊酯、或者它们的盐酸盐，磷酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：井上启史，执印太郎，降幡睦夫，平尾佳彦，田中徹，
申请(专利权)人：思佰益药业股份有限公司，国立大学法人高知大学，
类型：
国别省市：