一种苦玄参苷IA的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种苦玄参苷IA的制备方法，以苦玄参为原料，经甲醇或乙醇为溶媒提取、浓缩、大孔树脂吸附、脱色、高速逆流色谱法纯化制备苦玄参苷IA。本方法制备的苦玄参苷IA纯度高于95％，且具有简便、快速、制备量大、样品损失少等优点，易于推广使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药领域，涉及一种苦玄参苷I A的制备方法，特别是涉及一种利用高速逆流色谱法纯化苦玄参苷IA的方法。
技术介绍
苦玄参苷I A (Picfeltarraenin IA),为三職类化合物，分子式C41H62O13,分子量762. 92318，分子结构式为 ^ W'e o_/ "V** ο丫 丫 >4 'V人丫人 ν J O OM II 'V … I- ；'J 5 '苦玄参为玄参科植物苦玄参(Picria fel-terrae Lour.)的干燥全草,又名苦草，蛇总管，产于我国广东、广西、云南和贵州南部，在广西作药用历史已久。苦玄参性寒味苦，用于治疗高热、蛇伤及痈疖等，具有清热解毒，凉血消肿之功效。该药已收载于《中国药典》2010年版。现代研究表明，苦玄参的化学成分主要为葫芦苦素三萜成分和黄酮类化合物，药理实验证明，苦玄参干浸膏具有明显的抗炎及镇痛作用。苦玄参苷I A是苦玄参三萜部分中含量最高的成分，在干燥植物中的含量约为O. 25%，有中枢抑制作用和抗补体作用，是苦玄参的主要活性成分。目前学者对苦玄参定量分析方面报道最多的是苦玄参苷IA的含量测定，各地苦玄参药材中苦玄参苷I A的含量差异较大，含量差异与产地、药用部位、采收季节等均有关系。目前分离制备苦玄参苷IA的方法主要是采用大孔树脂和硅胶柱分离，邹节明采用HPD50树脂精制苦玄参提取物；王力生等以TLC为检测手段，利用DlOl大孔树脂对苦玄参总皂苷进行吸附洗脱，把苦玄参总皂苷含量由浸膏中的8. 7%提高至27. 3%，这些方法仅提取得到总皂苷，未涉及单体化合物的分离纯化。潘小娇等发表的文献“从苦玄参中制备苦玄参苷Ia的实验研究”，该文献采用水煮，醇溶，正丁醇萃取，硅胶柱分离得到苦玄参苷IAo在生产实践中，硅胶柱层析成本高、重现性较差且生产周期长。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种苦玄参苷I A的制备方法，应用高速逆流色谱分离纯化苦玄参苷I A，操作简单、生产周期短。为了实现上述目的，本专利技术的技术方案如下一种苦玄参苷I A的制备方法，具体包括提取、总皂苷制备、脱色以及分离纯化四道工序，其特征在于提取工序(I)中，以苦玄参为原料，用甲醇或乙醇微波提取，减压浓缩后获得提取浸膏；总皂苷制备工序(2)中，提取浸膏用热水分散，通过大孔吸附树脂柱，用水和60-90%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；脱色工序(3)中，乙醇洗脱液加活性炭，加热搅拌脱色，过滤，脱色液减压回收乙醇，干燥得粗品；分离纯化工序(4)中，采用高速逆流色谱法对所得粗品进行分离纯化，制备得到苦玄参苷I A。所述总皂苷制备工序(2)中，采用的大孔吸附树脂为AB-8、HPD100、D3520、ADS-7、DA201、SA-I等树脂中的一种或几种混合。 所述分离纯化工序(4)中，采用高速逆流色谱法分离纯化苦玄参苷I A，溶剂系统选用乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-O. 05% TFA，体积比为(5-10) (8-15) (2-5) (15-30)，溶剂系统配制后静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，流动相流速控制在l_4ml/min，主机转速控制在850-1000r/min。本专利技术的有益效果是采用大孔吸附树脂和高速逆流色谱法分离纯化，工艺简单、生产周期短、成本低、产品含量高。下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施例方式实施例I :苦玄参叶粉碎，取3kg，加8倍量60 %乙醇微波提取2次，提取液合并后减压浓缩得到提取浸膏，将提取浸膏用水分散后通过AB-8大孔树脂柱，饱和吸附后，先用水洗脱至无色，再用3BV75 %乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，加入I %活性炭加热搅拌脱色，过滤，脱色液减压回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按体积比5:8:3: 15在分液漏斗中混合充分,分层后取下相作为流动相，上相为固定相,将固定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至900r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速调至2ml/min，将粗品溶于下相由进样阀进样，HPLC检测，根据图谱收集目标成分，减压浓缩干燥流分，制得苦玄参苷I a7. 34g，含量98. 2%。实施例2:苦玄参叶粉碎，取3kg，加10倍量65%甲醇微波提取2次，提取液合并后减压浓缩得到提取浸膏，将提取浸膏用水分散后通过HPD100大孔树脂柱，饱和吸附后，先用水洗脱至无色,再用4BV60%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，加入2 %活性炭加热搅拌脱色，过滤，脱色液减压回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按体积比8 : 13 : 5 : 28在分液漏斗中混合充分,分层后取下相作为流动相，上相为固定相,将固定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至950r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速调至3ml/min，将粗品溶于下相由进样阀进样，HPLC检测，根据图谱收集目标成分，减压浓缩干燥流分，制得苦玄参苷I a5. 18g，含量98. 5%。实施例3:苦玄参叶粉碎，取3kg，加8倍量75 %乙醇微波提取2次，提取液合并后减压浓缩得到提取浸膏，将提取浸膏用水分散后通过SA-I大孔树脂柱，饱和吸附后，先用水洗脱至无色，再用3BV80%甲醇洗脱，收集乙醇洗脱液，加入1%活性炭加热搅拌脱色，过滤，脱色液减压回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按体积比6 10 2 20在分液漏斗中混合充分,分层后取下相作为流动相,上相为固定相,将固定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至850r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速调至4ml/min，将粗品溶于下相由进样阀进样，HPLC检测，根据图谱收集目标成分，减压浓缩干燥流分，制得苦玄参苷I a5. 21g，含量98. 0%。实施例4:苦玄参叶粉碎，取5kg，加6倍量65 %乙醇微波提取2次，提取液合并后减压浓缩得到提取浸膏，将提取浸膏用水分散后通过DA201大孔树脂柱，饱和吸附后，先用水洗脱至无色，再用3BV90%甲醇洗脱，收集乙醇洗脱液，加入3%活性炭加热搅拌脱色，过滤，脱色液减压回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按体积比10 10 3 25在分液漏斗中混合充分，分层后取下相作为流动相，上相为固定相，将固 定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至900r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速调至4ml/min，将粗品溶于下相由进样阀进样，HPLC检测，根据图谱收集目标成分，减压浓缩干燥流分，制得苦玄参苷I A10. 56g，含量98. 6%。实施例5:苦玄参叶粉碎，取5kg，加7倍量60 %甲醇微波提取2次，提取液合并后减压浓缩得到提取浸膏，将提取浸膏用水分散后通过ADS-7大孔树脂柱，饱和吸附后，先用水洗脱至无色，再用4BV70%甲醇洗脱，收集乙醇洗脱液，加入O. 5%活性炭加热搅拌脱色，过滤，脱色液减压回收乙醇，干燥得到粗品；取乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、O. 05% TFA，按体积比7: 15 : 4 : 30在分液漏斗中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苦玄参苷I？A的制备方法，具体包括提取、总皂苷制备、脱色以及分离纯化四道工序，其特征在于提取工序(1)中，以苦玄参为原料，用甲醇或乙醇微波提取，减压浓缩后获得提取浸膏；总皂苷制备工序(2)中，提取浸膏用热水分散，通过大孔吸附树脂柱，用水和60？90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；脱色工序(3)中，乙醇洗脱液加活性炭，加热搅拌脱色，过滤，脱色液减压回收乙醇，干燥得粗品；分离纯化工序(4)中，采用高速逆流色谱法对所得粗品进行分离纯化，制备得到苦玄参苷I？A。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李法庆，刘东锋，
申请(专利权)人：苏州宝泽堂医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：