本发明专利技术公开了一种抑菌组合物，属于中药领域。抑菌组合物中连翘提取液与水溶性纳米银以比例混合，两种药物的合用对抑制大肠杆菌O157:H7、藤黄微球菌起到协同的作用。本发明专利技术的一种连翘提取物与纳米银抑菌剂与现有的技术相比，解决了常规抑菌方法中连翘抑菌剂用量较大的问题，同时采用两种低剂量的抑菌物质减少了微生物耐药的发生机率、降低了其对人体的毒性，更加的安全。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药领域，尤其涉及一种中药抑菌剂。
技术介绍
连翘又称黄花条、连壳、青翘、落翘、黄奇丹，是中国临床常用传统中药之一，主要生长于山西、河南、山东等地，具有清热解毒、消肿散结之功效。连翘苷类是连翘所含的主要有效的化学成分，经研究表明，连翘具有抗病原微生物、抗炎、解热、护肝等作用，其中对伤寒杆菌、副伤寒杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、白喉杆菌及霍乱弧菌、葡萄球菌、链球菌都有抑制作用。由于连翘具有多种药理作用，且在我国资源丰富，广受人们的关注。中药制剂浓缩液制成口服液或抑菌剂、涂覆剂等一次用剂量大，且长期使用影响人体健康。
技术实现思路
针对连翘抑菌剂一次性使用量大和长期使用影响人体健康问题，本专利技术人经过大量实验，发现纳米银能有效增强连翘提取液抑菌性能，减少连翘抑菌剂的用量，且采用两种低剂量的抑菌组合物，更加的安全。本专利技术的目的在于提供一种连翘纳米银抑菌剂，减少连翘抑菌剂一次的用剂量和降低药品对人体的毒性。本专利技术提供如下技术方案 一种抑菌剂，含有连翘提取液、水溶性纳米银； 连翘提取液的制备包括如下步骤取干药材连翘，加水量为连翘重量的9倍，经95 V水浴提取4 h，再经过减压浓缩得到提取液；所得的提取液经过O. 22 μ m滤膜过滤。最后提取液经高压液相色谱法对提取液中的连翘苷进行标准定量。水溶性纳米银颗粒粒径为3 10 nm,纳米银外表包覆两性聚合物。水溶性纳米银粒径为3 10 nm,外表为羧基，依照下列方法制备取22. 8 g十四烷酸溶于140 mL按2:5比例混合的甲醇和水中，向溶液中加入4 g的氢氧化钠析出沉淀，过滤，将沉淀加入到100 mL浓度为10 mol/L水溶性的硝酸银溶液中得到十四烷酸银；称取6. 7 g浓度为20 mmoL/L十四烧酸银于100 mL烧杯中，向烧杯中加入58 mL浓度为40mmoL/L的三乙胺，80°C下电磁搅拌2 h，白色的十四烷酸银粉末逐渐变成棕色，不溶的前体消失，加入20 mL丙酮沉淀析出，抽滤，用丙酮洗涤沉淀数次后，真空干燥，即得到纳米银粒子粉末。依照本方法制备的水溶性纳米银颗粒与连翘提取液具有良好的协同抗菌作用。抑制大肠杆菌0157:H7时连翘提取液、水溶性纳米银的体积比为75 100: I。为了达到更好的效果，连翘提取液与水溶性纳米银体积比为75-100:1，优选为100:1。抑制藤黄微球菌时连翘提取液、水溶性纳米银的体积比为I 25: I。在算体积比时所用的连翘提取液中连翘苷的浓度为9. 3mg/g，所用的水溶性纳米银浓度为10mg/mL。本专利技术还涉及上述的抑菌组合物在抑制大肠杆菌0157:H7中的应用。本专利技术还涉及上述的抑菌组合物在抑制藤黄微球菌中的应用。本专利技术的有益效果是水溶性纳米银的应用能有效增强连翘抑菌性能，降低连翘抑菌剂的用量，更令人意向不到的是两种药物的合用对抑制大肠杆菌0157:H7和藤黄微球菌起到协同作用，同时本抑菌剂采用两种低剂量的抑菌物质，相对于使用高剂量的连翘或者水溶性纳米银，更加的安全，可以作为安全可靠地外用涂覆剂等。附图说明图I连翘提取液与纳米银之比为100:1对大肠杆菌0157 :H7协同抑菌作用 图Ia 200 μ L连翘提取液对大肠杆菌0157 :Η7的抑制作用，图Ib 2 μ L的纳米银对大肠杆菌0157: Η7的抑制作用，图Ic 100 μ L连翘提取液与I μ L纳米银对大肠杆菌0157 :Η7的协同抑菌作用。 图2连翘提取液与纳米银之比为75:1对大肠杆菌0157 :Η7协同抑菌作用 图2a 150 μL连翘提取液对大肠杆菌0157:H7的抑制作用，图2b 2 μ L的纳米银对大肠杆菌0157:Η7的抑制作用，图2c 75 μ L连翘提取液和I μ L纳米银对大肠杆菌0157:Η7的协同抑菌作用。图3连翘提取液与纳米银之比为25:1对藤黄微球菌协同抑菌作用 图3a 400 μ L连翘提取液对藤黄微球菌的抑制作用，图3b 16 μ L的纳米银对藤黄微球菌的抑制作用，图3c 200 μ L连翘提取液和8 μ L纳米银对藤黄微球菌的协同抑菌作用。图4连翘提取液与纳米银之比为20:1对藤黄微球菌协同抑菌作用 图4a 320 μ L连翘提取液对藤黄微球菌的抑制作用，图4b 16 μ L的纳米银对藤黄微球菌的抑制作用，图4c 160 μ L连翘提取液与8 μ L纳米银对藤黄微球菌的协同抑菌作用。实施例中所用试剂均为常规试剂，依照常规方式配制即可。具体实施例方式实施例I I、连翘提取液的制备过程称取干药材连翘50 g，加水量为450 mL，在95 °C下提取4h，经过真空旋转浓缩仪后，用O. 22 μ m滤膜除去提取液中的杂质和细菌，最后用高效液相色谱法测得提取液中连翘苷含量为9. 3 mg/g。2、水溶性银纳米颗粒制备 a、取22. 8 g十四烷酸溶于140 mL按2:5比例混合的甲醇和水中，向溶液中加入4g的氢氧化钠析出沉淀，过滤，将沉淀加入到100 mL浓度为10 mol/L水溶性的硝酸银溶液中得到十四烷酸银。13、称取6.7 g浓度为20 mmoL/L十四烧酸银于100 mL烧杯中，向烧杯中加入58mL浓度为40 mmoL/L的三乙胺，80°C下电磁搅拌2 h，白色的十四烷酸银粉末逐渐变成棕色，不溶的前体消失，加入20 mL丙酮沉淀析出，抽滤，用丙酮洗涤沉淀数次后，真空干燥，即得到纳米银粒子粉末。3、连翘提取液与水溶性纳米银协同抑菌作用。a细菌的培养 挑取LB琼脂培养基上的大肠杆菌0157:H7的单菌落于10 mL LB肉汤培养基中，置于37 °C培养箱中培养16 h，再按I %的接种量接种于5 mL的LB肉汤培养基中，37 °C培养4h后。取I mL上述菌液用O. 1%的蛋白胨水连续稀释三个梯度，最终的菌液大约为IO6 CFU/mL。b水溶性纳米银与连翘提取液在抑菌性能上的协同作用 分别取I mL上述已稀释好的菌液于I. 5 mL灭菌的离心管中，向I号离心管中分别加入200 μ L连翘提取液，向2号离心管中加入2 μ L浓度为10 mg/mL水溶性纳米银，向3号离心管中加入100 μ L连翘提取液(连翘苷浓度为9. 3 mg/g)和I μ L浓度为10 mg/mL水溶性纳米银，不加入任何上述抑菌剂。为保证每管液体最终体积相等，差量用O. 1%的蛋白胨水补齐。置于37 °C培养2 h。每组实验平行三次。c平板计数 将实验组待测液用PBS连续稀释两个梯度，10°、10'10_2各取出200 μ L分别均匀涂布在LB固体平板上；空白组连续稀释四个梯度，从10_2、10_3、10_4三个梯度分别均涂布在LB固体平板上。平板吹干后，37°C倒置培养12 h，长出菌落后计数，以30-300个菌落形成单位(CFU)为有效的计数范围。每毫升原菌液活菌数=平板计数*稀释倍数*5抑菌物质I加入抑菌剂后能数出来的菌落数空白组_6. 5X IO7CFUZmL_200 μ L 的连翘提取液1.5 X IO6CFUZmL—含2 μ L浓度为lOmg/mL的纳米银H X IO2CFUZmL含100 μ L的连翘提取液和I μ L浓度为IOmgZmL的纳米银溶液 |oCFU/mL 如图I所示，图Ia 150 μ L连翘本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种含连翘提取液的纳米银抑菌剂，其特征在于含有连翘提取液、水溶性纳米银；？所述的连翘提取液的制备包括如下步骤：取干药材连翘，加水量为连翘重量的9倍，经95？℃水浴提取4？h，再经过减压浓缩得到提取液；？所述水溶性纳米银依照下列方法制备：取22.8？g十四烷酸溶于140？mL按2:5比例混合的甲醇和水中，向溶液中加入4？g的氢氧化钠析出沉淀，过滤，将沉淀加入到100？mL浓度为10？mol/L水溶性的硝酸银溶液中得到十四烷酸银；称取6.7？g？浓度为20？mmoL/L？十四烷酸银于100？mL烧杯中，向烧杯中加入58？mL浓度为40？mmoL/L的三乙胺，80℃下电磁搅拌2？h，白色的十四烷酸银粉末逐渐变成棕色，不溶的前体消失，加入20？mL丙酮沉淀析出，抽滤，用丙酮洗涤沉淀数次后，真空干燥，即得到纳米银粒子粉末。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：魏华，熊勇华，许恒毅，王力均，郭亮，徐锋，万翠香，赖卫华，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：
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