变应原微阵列制造技术

本发明专利技术涉及用于评估对象是否已发生哮喘、结膜炎或鼻炎或者具有其发生风险的方法。本发明专利技术还涉及用于此类方法的抗原集合，所述方法包括鉴定与哮喘、结膜炎或鼻炎相关的其他合适抗原。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】变应原微阵列本专利技术涉及一种用于评估对象是否已发生哮喘、结膜炎或鼻炎或具有其发生风险的方法。本专利技术还涉及用于所述方法的抗原集合，所述方法包括鉴定与此类风险相关的抗原。
技术介绍
哮喘被普遍认为是一种主要的全球性健康问题。在过去的五十年中，它是影响成人和儿童的最常见的疾病之一，其导致了全世界多达3亿个病例，并且令人担忧的是它出现频率在逐年上升。遗传因素(细胞因子和免疫应答基因)和环境因素(如病毒性感染、变应原和职业性暴露)均与哮喘易感性、发作年龄和严重程度有关。但是，该疾病的发病机理还未被完全阐明。·一个主要的风险因素是发生对外源抗原的免疫应答，所述免疫应答的特征在于产生抗原-特异性IgE。此概念最先来自于下述现象，哮喘的患病率与血清IgE水平紧密相关。现在，压倒性的证据已经确证IgE在特应性哮喘中的作用，而数个研究还揭示了 IgE和非特应性哮喘之间的关联性。更多的争论是抗原特异性IgE在决定疾病的发作和严重程度中的作用。因为发现房尘螨是灰尘中变应原的主要来源，所以数个研究将抗特异性螨变应原的血清IgE的存在与哮喘相联系。但是，在世界范围内有大量个体(尤其生活在美国和斯堪的纳维亚的一些地区的那些)通常在他们的生活中不与螨抗原接触。有意思的是，这些个体在哮喘的患病率和严重程度的方面不会显示出任何降低。因此，很有可能另一些抗原单独地或组合地在该疾病的发病中起重要的作用。遗憾的是，抗原接触、IgE产生与哮喘的发生和/或严重程度之间的任何关联性似乎都涉及出乎意料地大量的因素，并且接触与应答之间似乎存在非线性关系。迄今为止，试图确定特异性IgE和哮喘之间关联性的研究集中在要么分析一种抗原要么同时分析少数几种抗原，如描述房尘螨作用的那些研究。与此相反，目前尚没有针对IgE对大抗原库的应答和哮喘发生进行调查的研究。已知变应原的数目和已经分析的抗原的数目之间的不均衡性可很好地解释在建立特异性IgE在哮喘的发病中作用之中所遇到的困难。例如，大多数患有哮喘的患者具有针对多于一种变应原的血清IgE，并且其每一种在疾病表现和症状中的相对贡献仍然是未知的。因而，尽管通过针对常见变应原的特异性IgE的存在所定义的特应性与哮喘相关联，但是特异性IgE的高血清水平并不总是与特应性相关联。结果，全部的或特异性的IgE与哮喘应答模式之间的相关性仍是不清楚的。因此，尽管确定患者或对象是否显示对特定抗原的免疫应答是相对直接的，但是并没有简单的方式来确定同一患者或对象是否具有发生更严重病症(如哮喘、结膜炎或鼻炎)的风险。目前，本专利技术人出人意料地发现预测发生此类病症的风险是可能的。
技术实现思路
在本专利技术的第一个方面中，提供鉴定生物标志物集合的方法，更特别地鉴定与哮喘、结膜炎或鼻炎显著相关的抗原集合。所述方法包括(a)在分离自一组无症状对象的多个第一样品中测量IgE对多种抗原反应性的水平，(b)在分离自一组患有哮喘、结膜炎或鼻炎的对象的多个第二样品中测量IgE对多种抗原反应性的水平，(C)鉴定对象组之间IgE反应性水平显示出显著差异的所述多种抗原的子集，其中IgE对所述子集反应性的水平与哮喘、结膜炎或鼻炎的临床诊断相关。在某些实施方案中，尽管可对每个个体样品分开进行评估，但基本上同时测量每个样品内的所述多种抗原的反应性水平。 优选地，在第一和/或多个第二样品中的样品数目为30至800个样品，优选为50至800个样品。因此，样品的数目可以是30至800之间的任何数目；例如，30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、600、700或800，或者其中的任何范围。优选地，所述多种抗原包含30至400种抗原，优选为50至400种抗原。因此，抗原的数目可以是30至400之间的任何数目，例如30、40、50、60、70、80、90、100、200、300或400，或者其中的任何范围。在一些具体的实施方案中，抗原被选择为在特定地区出现率最高的抗原。在一个实施方案中，通过将所述多种抗原与分离自所述对象组的血清相接触以及使用抗IgE抗体测定与每种抗原结合的IgE的量来确定IgE反应性的水平。在一些具体的实施方案中，所述抗IgE抗体是带标记的抗体。在另一些实施方案中，所述抗IgE抗体是未标记的并且通过使用带标记的抗体进行检测。所述带标记的抗体可包含荧光标记。在一些优选的实施方案中，通过使用荧光检测来确定与每个抗原结合的IgE的量。在某些实施方案中，所述多种抗原结合于至少一个具有多个地址的固体支持物，其中每个地址具有一种独特的抗原布置于其上。在一个实施方案中，所述固体支持物包含多个可分开识别的珠子(separately identifiable bead)。在另一个实施方案中，所述固体支持物是微阵列。当所述固体支持物是微阵列时，抗原的点样浓度为O. 008mg/ml至3mg/ml ο在第二个方面中，本专利技术提供用于评估对象是否已经发生哮喘、结膜炎或鼻炎或者具有其发生风险的方法。在某些实施方案中，所述方法包括测量在分离自对象的样品中IgE对生物标志物集合的反应性水平。优选地，所述生物标志物是预先确定与哮喘、结膜炎或鼻炎的临床诊断相关联的抗原，例如通过本专利技术的第一个方面预先确定的。在一些具体的实施方案中，IgE对生物标志物集合中的至少75%的反应性水平高于3. 511U/ml，这表明该对象可能发生或已经发生哮喘、结膜炎或鼻炎。在某些实施方案中，所述生物标志物集合包含9至51种抗原。在一些具体的实施方案中，所述生物标志物集合选自以下抗原C2、DU D2、D3、D70、D71、D72、D73、EU E3、E81、E82、F4、F16、F25、F35、F49、F84、F95、Gl、G2、G3、G4、G5、G6、G8、G12、G14、G15、G18、16、K87、Ml、M3、M4、M5、M6、T4、Τ6、Τ7、T9、Τ14、Τ901、Wl、W6、Χ902、Χ903、Χ904、Χ905、Χ907和 Χ910。在一个实施方案中，通过将所述多种抗原与分离自所述对象的血清相接触以及使用抗IgE抗体测定与每种抗原结合的IgE的量来确定IgE反应性的水平。在某些实施方案中，所述抗IgE抗体是带标记的抗体。在另一些实施方案中，所述抗IgE抗体是未标记的并且通过使用带标记的抗体对其进行检测。所述带标记的抗体可包含荧光标记并且通过荧光检测确定与每种抗原结合的IgE的量。在一些优选的实施方案中，所述抗原与固体支持物结合。在一个实施方案中，所述固体支持物是微阵列。在某些实施方案中，所述抗原的点样浓度为O. 008mg/ml至3mg/ml。优选地，基本上同时测量与生物标志物集合中每种抗原结合的IgE的量。在第三个方面中，本专利技术提供用于诊断哮喘、结膜炎或鼻炎或者确定其发生风险的抗原微阵列。所述微阵列包含与哮喘、结膜炎或鼻炎相关联的生物标志物集合。在某些实施方案中，所述微阵列包含抗原F95、Gl、G3、G4、G12、G14、G15和G18以及任选地一种或更多种选自以下的抗原C2、D1、D2、D3、D70、D71、D72、D73、E1、E3、E81、E82、F4、F16、F25、F35、F49、F84、G2、G5、G6、G8、16、K87、Ml、M3、M4、M5、M6、T本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：安德烈亚·克里桑蒂，塔尼亚·多托里尼，
申请(专利权)人：微测试矩阵有限公司，
类型：
国别省市：