一种检测烘烤制品中儿茶素含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种烘烤食品中儿茶素含量的检测方法，包括如下步骤：(1)制备供试品溶液；(2)制备对照品溶液；(3)制作标准曲线；(4)测定供试品溶液；(5)根据标准曲线和供试品溶液的峰面积计算供试品中总儿茶素的含量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，尤指一种检测含有茶或茶提取物的烘烤食品中的儿茶素含量的方法，属于食品分析领域。
技术介绍
现代研究表明茶叶抗菌、降脂、防癌等保健功能是多种成分综合作用的结果，其中起主要作用的有两大类物质，一类是多酚类化合物(简称茶多酚)，另一类是脂多糖类化合物(简称茶多糖)。儿茶素作为茶多酚主要成分，不仅是赋予茶叶感官品质的主要品质成分，同时也是最主要的茶叶药效成分。s. Valcic等比较了 6种儿茶素单体(没食子酸，儿茶素，表儿茶素，表没食子儿茶素，表儿茶素没食子酸酯，表没食子儿茶素没食子酸酯)对多种癌细胞 (乳腺癌细胞MCF-7、克隆癌细胞HT-29、肺癌细胞A-427和黑色素瘤细胞UACC-375)生长的影响，发现EGCG、GC、EGC对四种癌细胞生长均有显著的抑制作用，EGCG对乳腺癌细胞MCF-7、克隆癌细胞HT-29和黑色素瘤细胞UACC-375的抑制作用均高于其他几种儿茶素单体。Levites Y等人对帕金森小鼠模型的研究中发现茶多酚可升高纹状体中超氧化物酶(SOD)水平，降低过氧化氢酶活性，从而抑制多巴胺黑质损伤，抑制纹状体多巴胺衰竭，提高谷氨酸氢化酶水平。朱善瑾研究发现，茶多酚对福氏痢疾杆菌、宋氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、副伤寒及大肠杆菌的抑菌圈大于16mm的质量分数分别为11315%,黄洋等考察单体儿茶素对大肠杆菌抑菌效果的影响，其抑菌圈大小为EGCG > ECG > EGC >EC0由于茶具有较好的保健功效，茶多酚是天然的抗氧化剂，将茶或茶提取物加入到面包中，不仅可以延长保质期，让人们在享用美食的同时也能起到保健功效。但对烘烤产品进行有效成分含量检测时，而由于其提取液中含有油脂、糖类、可溶性蛋白等物质，给检测带来困扰。目前测定茶叶和速溶茶粉中的儿茶素采用GB8313-2008方法，但该方法在检测烘烤食品如茶面包中的儿茶素含量时，只能测定出两种儿茶素单体和咖啡碱，影响了检测结果的准确性。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种准确测定含有茶或茶提取物的烘烤制品(如面包)中儿茶素含量的方法。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案，包括如下步骤(I)制备供试品溶液；(2)制备对照品溶液；(3)制作标准曲线；(4)测定供试品溶液；(5)根据标准曲线和供试品溶液的峰面积计算供试品中总儿茶素的含量。所述步骤(I)制备供试品溶液是指准确称取5_15g(优选IOg)粉碎的烘烤食品样品于50-200ml (优选100ml)提取液中，在60-80°C (优选70°C )水浴锅中振荡水浴20-40min (优选30min),冷却至室温后,摇勻，倒入离心管中，在室温3000-4000r/min (优选3500r/min)离心5_15min (优选IOmin);收集上清液,并用O. 45 μ m滤膜过滤,所得滤液作为供试品溶液；其中提取液由体积百分比含量为60% -80%的甲醇、20% -40 %的水和O. 1% -O. 5%的甲酸组成(优选由70%的甲醇、29. 7%的水和O. 3%的甲酸组成)。所述步骤⑵制备对照品溶液是指分别称取没食子酸3_8mg(优选5. OOmg)，儿茶素3-8mg(优选5. OOmg),表儿茶素3_8mg(优选5. OOmg),表没食子儿茶素3_8mg(优选5. OOmg)，表儿茶素没食子酸酯3-8mg (优选5. OOmg)，表没食子儿茶素没食子酸酯3_8mg (优·选5. OOmg)溶于5-20ml (优选IOml)提取液中，其中提取液由体积百分比含量为60%-80%的甲醇、20% -40%的水和O. 1% -O. 5%的甲酸组成(优选由70%的甲醇、29. 7%的水和O.3%的甲酸组成)。所述步骤(3)制作标准曲线是指取对照品溶液，注入HPLC色谱仪，按色谱条件测定峰面积，并以峰面积I对不同对照品浓度X，mg/ml进行线性回归。回归方程为Y = a · X+b ;式中Y为对照品溶液的峰面积；X为对照品溶液的浓度(mg/ml)；a，b 为常数。所述步骤(4)测定供试品溶液是指精密吸取10-30 μ I (优选20 μ I)试品溶液，注入HPLC色谱仪，按照色谱条件，在250-300nm(优选270nm)下测定测定峰面积。所述步骤(3)和步骤(4)中的色谱条件为采用Angile 1200 色谱仪，用 Agilent SB-C18 (4. 6 X 250mm，5 μ m)作为固定相，流动相洗脱液A 0. 1-0. 3% (优选O. 2% )乙酸乙腈溶液洗脱液B 0. 1-0. 3% (优选O. 2% )乙酸水溶液测定波长250-300nm(优选270nm)柱温30-40°C(优选 35°C )梯度洗脱条件洗脱液A和洗脱液B的体积百分比如下O-Smin洗脱液A的体积百分比为2 % _5 %中的任一值，洗脱液B的体积百分比为98% -95%中的任一值 8-14min洗脱液A的体积百分比从2 % _5 %中的任一值匀速升至8 %，洗脱液B的体积百分比从98% -95%中的任一值匀速降至92%14-25min洗脱液A的体积百分比从8%匀速升至10%，洗脱液B的体积百分比从92%匀速降至90%25-30min洗脱液A的体积百分比从10 %匀速升至15 %，洗脱液B的体积百分比从90%匀速降至85%30-35min洗脱液A的体积百分比从15 %匀速升至20 %，洗脱液B的体积百分比从85%匀速降至80%35-40min洗脱液A的体积百分比从20 %匀速升至30 %，洗脱液B的体积百分比从80%匀速降至70%40-45min洗脱液A的体积百分比为30 %，洗脱液B的体积百分比为70 %45-50min洗脱液A的体积百分比从30%匀速降至2% _5%中的任一值，洗脱液B的体积百分比从70% -匀速升至95% -98%中的任一值50-55min洗脱液A的体积百分比为2 % _5 %中的任一值，洗脱液B的体积百分比为98% -95%中的任一值。优选的梯度洗脱条件洗脱液A和洗脱液B的体积百分比如下O-Smin洗脱液A的体积百分比为2 %，洗脱液B的体积百分比为98 %8-14min洗脱液A的体积百分比从2 %匀速升至8 %,洗脱液B的体积百分比从98%匀速降至92%14-25min洗脱液A的体积百分比从8%匀速升至10%，洗脱液B的体积百分比从92%匀速降至90%25-30min洗脱液A的体积百分比从10 %匀速升至15 %，洗脱液B的体积百分比从90%匀速降至85%30-35min洗脱液A的体积百分比从15 %匀速升至20 %，洗脱液B的体积百分比从85%匀速降至80%35-40min洗脱液A的体积百分比从20 %匀速升至30 %，洗脱液B的体积百分比从80%匀速降至70%40-45min洗脱液A的体积百分比为30 %，洗脱液B的体积百分比为70 %45-50min洗脱液A的体积百分比从30 %匀速降至2 %，洗脱液B的体积百分比从70% -匀速升至98%50-55min洗脱液A的体积百分比为2 %，洗脱液B的体积百分比为98 %。更优选的梯度洗脱条件洗脱液A和洗脱液B的体积百分比如下0-8min洗脱液A的体积百分比为3 %，洗脱液B的体积百分比为97 %8-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种烘烤食品中儿茶素含量的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)制备供试品溶液；(2)制备对照品溶液；(3)制作标准曲线；(4)测定供试品溶液；(5)根据标准曲线和供试品溶液的峰面积计算供试品中总儿茶素的含量。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：李丽维，李长文，徐咏全，
申请(专利权)人：云南天士力帝泊洱生物茶集团有限公司，
类型：发明
国别省市：