本发明专利技术公开了一种中成药在制备抑制BGC-823细胞增殖药物中的应用,该中成药为双虎清肝颗粒,双虎清肝颗粒主要成分乌灵菌粉,内含腺苷、多糖、甾醇类及谷氨酸、Y-氨基丁酸、赖氨酸等19种氨基酸,还含有维生素(VitE、B1、B6、K1等)和微量元素(Zn、Fe、Ca等)等多种成份,补肾健脑,养心安神,适用于神经衰弱的心肾不交证,症见失眠,健忘,神疲乏力,腰膝酸软,脉细或沉无力等,口服,一次3粒,一日3次,或遵医嘱,每粒装0.33克,现发现其能抑制BGC-823细胞增殖。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种中成药的新用途,尤其涉及双虎清肝颗粒在制备抑制BGC-823细胞增殖药物中的应用。
技术介绍
胃腺癌是胃癌的一种,是由胃腺体细胞恶变来的,所以叫做腺癌。胃腺癌的发生率占胃恶性肿瘤的95%,相对少见的是淋巴瘤(只能主要位于胃一类)和平滑肌肉瘤。.世界各地胃癌的发生率各不相同;例如,日本,智利和冰岛发病率非常高。在美国,胃癌最常见于北方人,穷人和黑人,但其发病率已降低到约810万,是引起癌肿死亡的第七位原因,然而,在日本,胃癌发病率已有降低,但仍是最常见的恶性肿瘤,它的发病率随年龄增长而增加,75% 以上的患者年龄大于50岁。双虎清肝颗粒是北京华神药业股份有限公司的独家产品,目前还没有其抑制胃腺癌(BGC-823)细胞增殖的文献报道。
技术实现思路
专利技术目的本专利技术的目的在于提供双虎清肝颗粒在制备抑制BGC-823细胞增殖药物中的应用。技术方案双虎清肝颗粒在制备抑制BGC-823细胞增殖药物中的应用。双虎清肝颗粒主要成分金银花、虎杖、黄连、白花蛇舌草、蒲公英、丹参、野菊花、紫花地丁、法半夏、甘草、瓜萎、枳实,每袋装12g,口服,开水冲服。一次1-2袋,一日2次,现发现其能抑制BGC-823细胞增殖。有益效果双虎清肝颗粒抑制BGC-823细胞增殖,效果良好。具体实施例方式双虎清肝颗粒抑制BGC-823细胞增殖的实验研究资料I实验材料I. I实验用细胞株胃腺癌(BGC-823),来自本公司实验室细胞库,DMEM+10%FBS常规培养。I. 2实验药物研究药物双虎清肝颗粒,北京华神药业股份有限公司,批号20110613药液储液称取IOOmg双虎清肝颗粒内容物,溶于5ml无水乙醇中,O. 2 μ m滤器过滤,500 μ Idoff管分装,-20°c存储,同时O. 2 μ m滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。I. 3实验试剂DMEM(GIBC0 公司 Cat. No. 12100-061 Lot. No. 758137);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot. No. 100419);NaHC03(上海久亿化学试剂有限公司Cat. No. 11810-033 Lot.No. 1088387);Trypsin (AMRESC0 公司批号2010/04);EDTA (AMRESC0 公司批号2009/10);Penicillin G Sodium Salt (AMRESCO 公司批号2010242) ;Streptomycin Sulfate(AMRESCO公司批号2010382);无水乙醇(南京化学试剂有限公司批号080310182);MTT (Biosharp 批号0793) ;PBS (实验室自配);I. 4实验器材莱卡倒置显微镜(德国Leica型号DM1L);可见-紫外光微孔板检测仪(美国MD公司型号SPECTRAMAX 190) ;C02培养箱(FORMA型号3111);超净台(苏净集团安泰公司制造型号SW-CJ-ZFD);纯水仪(美国Spring公司型号S/N 020579);精密移液器(法国吉尔森公司型号P2);电子天平(德国赛多利斯有限公司型号BT323S);全自动高压灭菌锅(日本SANK)公司型号MLS-3020);台式电热鼓风干燥箱(上海精密实验设备公司型号DHG9123A);冰箱(西门子公司型号KG18V21TI);液氮罐(CBS型号2001);低速离心机(上海安亭科学仪器厂型号ΚΑ-1000) ;0. 2μπι滤器(MILLIP0RE2实验方法 I) BGC-823 细胞用 DMEM+10%FBS 于 37 °C、5%C02 进行常规培养(IOcm 培养皿),当细胞生长至对数期时,收集细胞,弃去培养液,PBS轻洗3遍,加入3ml O. 25%胰蛋白酶-O. 049ffiDTA,37°C消化2min后,向其中加入5ml完全培养基中和反应,吹打细胞后将其转入离心管中,IOOOrpm离心5min,调整细胞悬液浓度3X 104个/ml。2)将细胞种入96孔培养板中,每孔加入细胞悬液180 μ 1,培养板放入细胞培养箱中(37 °C,5%C02 )常规培养。3)根据细胞生长情况,一般长至50%_70%,加入双虎清肝颗粒溶液,继续培养24h。4) 24h 后加入 20 μ I MTT 溶液(5mg/ml,即 O. 5%MTT),继续培养 4h。5) 4h后扣板法倒去上清,用吸水纸轻轻拍干,每孔加入200 μ I 二甲基亚砜,置摇床上低速振荡lOmin,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。6)同时设置本底(不加细胞,只加培养液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜),每组设定6个复孔。7)结果以药物对细胞的抑制率表示细胞增值抑制率(%)=(对照孔OD值-给药孔OD值)/对照孔OD值X 100%。实验重复3次。3统计处理采用Microsoft Excel 2003软件中的相关分析和Student t检验,数据以mean + S. D.表不。4实验结果MTT法实验后统计结果显示,与对照组比较,当剂量达到5mg/ml时,对BGC-823细胞增殖抑制有差异(p〈0. 05),剂量在10mg/ml时该差异具有显著性(P〈0. 01),当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异(Ρ〈0· 001)。表I双虎清肝颗粒对BGC-823细胞增殖抑制影响研究(X土 SD)权利要求1.一种中成药在制备抑制BGC-823细胞增殖药物中的应用。全文摘要本专利技术公开了一种中成药在制备抑制BGC-823细胞增殖药物中的应用,该中成药为双虎清肝颗粒,双虎清肝颗粒主要成分乌灵菌粉,内含腺苷、多糖、甾醇类及谷氨酸、Y-氨基丁酸、赖氨酸等19种氨基酸,还含有维生素(VitE、B1、B6、K1等)和微量元素(Zn、Fe、Ca等)等多种成份,补肾健脑,养心安神,适用于神经衰弱的心肾不交证,症见失眠,健忘,神疲乏力,腰膝酸软,脉细或沉无力等,口服,一次3粒,一日3次,或遵医嘱,每粒装0.33克,现发现其能抑制BGC-823细胞增殖。文档编号A61K36/8888GK102885949SQ201210355718公开日2013年1月23日 申请日期2012年9月24日 优先权日2012年9月24日专利技术者不公告专利技术人 申请人:南京正亮医药科技有限公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种中成药在制备抑制BGC?823细胞增殖药物中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:不公告发明人,
申请(专利权)人:南京正亮医药科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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