沼泽红假单胞菌菌株及应用、菌剂药剂及其制备方法和应用技术

技术编号:8211755 阅读:210 留言:0更新日期:2013-01-17 04:35
本发明专利技术公开了一种沼泽红假单胞菌CCTCC?M?2012224及其在防治水稻稻曲病或提高水稻体内过氧化氢酶活性中的应用,还公开了该菌株经活化、种子培养、生产培养后制得的生防菌剂;用该生防菌剂经发酵、离心后制得的发酵上清液可以作为生防药剂,用该生防菌剂经发酵培养、破碎后制得的菌体破碎液也可作为生防药剂,本发明专利技术的生防菌剂、生防药剂均可用于防治水稻稻曲病或提高水稻体内过氧化氢酶活性。本发明专利技术产品具有生产成本低、无毒、绿色环保、使用方便等优点,可有效防治水稻稻曲病,提高水稻的抗病性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物农药
,尤其涉及一种沼泽红假单胞菌菌株及其药剂在防治水稻病害中的应用。
技术介绍
水稻是我国主要的粮食作物之一,然而水稻病害的持续发生一直影响着水稻生产。稻曲病是水稻主要的病害之一,在世界水稻产区广泛分布并且有逐年加重的趋势,由稻曲病引起的水稻病害每年可造成上亿元的直接经济损失,因此,研究和防治水稻稻曲病刻不容缓。目前,稻曲病的防治主要是采用化学农药防治的方法。化学农药虽具有应用方便、防效较高的优点,但化学农药的过度使用将会产生以下问题①研制新品种化学抗菌药难度加大,费用提高;②抗药性问题越来越严重由于化学杀菌剂的长期使用,使得植物病原菌普遍出现了较高水平的抗药性,其中最常见的是植物病原真菌对杀菌剂的抗药性;抗药性的产生往往导致植物病害的化学防治失败,并且还会给以后的防治带来连锁反应,同时给农业生产带来巨大的损失;③生态污染化学杀菌剂对野生和非靶标生物有毒,环境相容性差,使用甚至滥用化学杀菌剂,将导致大量化学农药流失到生态环境中,对生态系统造成严重的危害;同时,化学农药不易降解,高残留,对人畜极不安全,这些都严重限制了其在将来农业生产上的应用。因此,在推行无公害农药和可持续农业生产的今天,开发研制不易产生抗性、环境相容性较好的生物农药已成为当今农药发展的必然趋势。
技术实现思路
本专利技术针对目前农业生产中稻曲病防治难度大、成本高、农药残留、化学抗药性日益突出等问题,目的是要克服现有技术的不足,提供一种生产成本低、无毒、绿色环保、使用方便的沼泽红假单胞菌菌株及其制备的相应菌剂、药剂,并同时提供相应菌剂、药剂的制备方法和应用,该应用可防治水稻稻曲病、提高水稻的抗病性。为解决上述技术问题,本专利技术提出的技术方案为一株沼泽红假单胞菌菌株,所述沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)菌株的名称为沼泽红假单胞菌CS-1 (即Rhodopseudomonas palustris CS-1),具体为一株光合细菌(Photosynthetic Bacterium)菌株,其在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)的保藏编号为CCTCC No M 2012224,保藏单位地址位于中国武汉大学,保藏日期为2012年6月12日。本专利技术的上述菌株经菌落和形态观察、染色反应、常规生理生化特征实验以及16SrDNA序列分析,鉴定为是沼泽红假单胞菌属中的光合细菌菌株,上述本专利技术的光合细菌菌株具有以下主要特征①在表观形态上,菌落表面光滑,成规则圆形,红色,湿润易挑起在生理生化特性上,淀粉水解试验反应阳性,过氧化氢酶试验反应阳性,柠檬酸盐试验反应阳性,G-, V-P反应阴性,甲基红试验反应阴性,吲哚试验反应阴性,脲酶试验反应阴性,革兰氏染色反应阴性;耐盐性良好,氯化钠浓度低于3%能很好生长,4% 7%生长很缓慢,大于7%时不生长;16S rDNA序列长度为1450bp,在Genbank中的登录号为JQ863308。作为一个总的技术构思,本专利技术提供上述的沼泽红假单胞菌菌株在防治水稻稻曲病或提高水稻体内过氧化氢酶活性中的应用。作为一个总的技术构思,本专利技术还提供一种沼泽红假单胞菌菌株的生防菌剂,所述生防菌剂是由上述沼泽红假单胞菌菌株经活化、种子培养、生产培养后得到。作为一个总的技术构思,本专利技术相应提供上述沼泽红假单胞菌菌株的生防菌剂的制备方法,包括以下步骤 (I)活化将上述本专利技术的沼泽红假单胞菌菌株的保存种按双层平板培养法进行培养,培养至红色单菌落出现;(2)种子培养将步骤(I)培养出的红色单菌落接入至血清瓶中,在温度为30°C 35°C、光照条件为2000Lx 3000Lx条件下,用光合细菌液体培养基培养至对数生长期;(3)生产培养将步骤(2)种子培养后得到的菌液按光合细菌菌株生产培养基总体积的1% 5%的接种量接种到生产瓶中,用光合细菌培养基进行生产培养,在温度为30°C 35°C、光照条件为2000Lx 3000Lx,培养至对数生长期;得到的培养液即为所述沼泽红假单胞菌菌株的生防菌菌剂。作为一个总的技术构思,本专利技术还提供一种沼泽红假单胞菌菌株的生防药剂,所述生防药剂为上述生防菌剂经发酵、离心后制得的发酵上清液。作为一个总的技术构思,本专利技术还提供上述生防药剂的制备方法,包括以下步骤将所述沼泽红假单胞菌菌株的生防菌剂发酵培养5d 7d,培养完成后在6000rpm 8000rpm条件下离心2min 4min,收集离心后的上清液,再经细菌过滤器过滤,得到生防药剂。作为一个总的技术构思,本专利技术还提供另一种沼泽红假单胞菌菌株的生防药剂,所述生防药剂为上述生防菌剂经发酵培养、破碎后制得的菌体破碎液。本专利技术还相应提供上述第二种生防药剂的制备方法,包括以下步骤(I)将上述沼泽红假单胞菌菌株的生防菌剂发酵培养5d 7d,培养完成后在6000rpm 8000rpm条件下离心4min 8min,弃上清,收集菌体;(2)将步骤(I)中收集的菌体用缓冲液清洗后再置于缓冲液中进行超声波破碎;(3)将经过步骤(2)中超声波破碎后的菌液于2°C 6°C、10000rpm HOOOrpm条件下离心8min 12min,收集的上清液即为生防药剂。上述的制备方法中,超声波破碎时的工艺条件优选为超声波强度控制在200W 400W,破碎8s IOs间隔8s IOs,超声波破碎IOmin 15min。作为一个总的技术构思,本专利技术提供上述的生防菌剂或生防药剂在防治水稻稻曲病或提高水稻体内过氧化氢酶活性中的应用。与现有技术相比,本专利技术的优点在于I、本专利技术的沼泽红假单胞菌CS-I的培养方法简单,生产成本低,且该菌株可通过简单、快捷、低成本的操作方法制备得到防治水稻稻曲病的生防菌剂及生防药剂;2、本专利技术菌株制备得到的生防菌剂及药剂不仅对水稻稻曲病害有显著防效,而且具有低毒、对人畜无害、对农作物无药害、绿色环保、使用方便等特点;3、本专利技术的沼泽红假单胞菌CS-I不但对水稻稻曲病有显著的防效,而且,菌株本身具有多种营养成分及活性物质,能够有效促进作物生长,提高作物体内防御酶活性,能在一定程度上提高作物抗病性。一种沼泽红假单胞菌 CS-1 (Rhodopseudomonas palustris CS-1),其在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)的保藏编号为CCTCC No M 2012224,保藏单位地址位于中国武汉大学,保藏日期为2012年6月12日。附图说明 图I为本专利技术实施例I中沼泽红假单胞菌CCTCC M 2012224的双层平板培养图。图2为本专利技术实施例5中沼泽红假单胞菌CS-I生防药剂(发酵上清液)皿内抑制稻曲病菌生长的结果照片,其中a为I : 3,b为I : 2,c为I : l,d为CK,e为3 1,f 为 2 I。图3为本专利技术实施例5中沼泽红假单胞菌CS-I生防药剂(菌体破碎液)皿内抑制稻曲病菌生长的结果照片,其中a为CK,b为CKt^c为I : 3,d为I : 2,e为3 l,f为2: 1, g为 I : I。图4为本专利技术实施例6中沼泽红假单胞菌CS-I生防药剂(发酵上清液)摇瓶内抑制稻曲病菌生长的结果照片,其中a为CK,b为CKtl, c为I : 3,d为I : 2,e为3 1,f 为 2 1,g 为 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株沼泽红假单胞菌菌株,其特征在于:所述沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas?palustris)菌株的名称为沼泽红假单胞菌CS?1,其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC?No:M?2012224。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘勇陈莎张松柏张德咏罗香文彭静程菊娥谭新球成飞雪朱春晖杨春晓
申请(专利权)人:湖南省植物保护研究所
类型:发明
国别省市:

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