链球菌感染的治疗制造技术

本发明专利技术公开了一种治疗或预防肺炎链球菌感染的方法，其中所述肺炎链球菌感染发生在这样的环境中：其中游离Zn2+和/或Mn2+的浓度低至足以上调至少一种PhtX蛋白（例如PhtD）在肺炎链球菌中的表达；所述方法包括下述步骤：给人患者施用药学有效量的PhtX蛋白。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】链球菌感染的治疗本申请涉及保护免于链球菌疾病的疫苗和免疫原性组合物的领域，具体地，涉及使用疫苗来治疗肺炎链球菌疾病的方法，所述疫苗含有来自多组氨酸三联体家族蛋白的蛋白，具体地，涉及使用这些疫苗和免疫原性组合物的治疗方法。
技术介绍
肺炎链球菌(SirepiococciAs pneumoniae)是世界上的传染性的发病率和死亡率的主要原因之一，其可引起大范围的感染，诸如中耳炎、肺炎、菌血症和脑膜炎{ Hausdorff2005，McCullers 2001 }。该微生物的抗生素抗性株的出现，已经进一步突出了对提供有效的预防性疫苗接种的需要{ Lynch, III 2005，Bridy-Pappas 2005 }。当前的疫苗由以流行病学上占优势的血清型为基础的肺炎球菌荚膜多糖的选择组成，所述多糖与载体蛋白缀合或未缀合{ Dagan 2004, Fedson 2004, Mbelle 1999, Smart 1987 }。但是，所述疫苗制剂没有覆盖该微生物的所有血清型，在全球的具有不同优势血清型的某些区域中，这可能是特别相关的{ Dagan 1992 }。另外，可以预见到，血清型特异性的疫苗的使用，最终允许非疫苗血清型的阳性选择{ Nunes 2008，Singleton 2007 }。一个替代方案涉及靶向共同的肺炎球菌抗原的疫苗的开发。在多种候选物中，Pht蛋白家族(限于链球菌属)构成有希望的候选物，它们在肺炎球菌物种中是十分保守的{ Hamel 2004, Zhang 2001 }，且在受感染的个体中是抗体靶标，在被免疫的小鼠中在激发以后是保护性的{ Beghetto 2006 }。最初，该蛋白家族被3个研究组独立地报道，并使用3个分开的命名Pht (对于肺炎球菌组氨酸三联体){ Adamou 2001 }、Php (对于肺炎球菌组氨酸蛋白){ Zhang 2001 }和BVH { Hamel 2004 }。那些蛋白的特征在于组氨酸三联体基序HxxHxH，该基序在它们的氨基酸序列中重复5-6次。已经描述了该家族的4个成员PhtA (BVH-11-3)、PhtB (PhpA/BVH-11)和 PhtD (BVH-11-2)(它们具有多达 81% 序列同一性)和PhtE (BVH-3)，PhtE与其它3种蛋白不同，与它们仅表现出最多35%同一性。它是一种更长的蛋白，具有组氨酸三联体基序的6次重复的唯一蛋白。在小鼠免疫接种研究中，已经证实Pht家族的所有成员会提供针对许多不同菌株/血清型的随后肺炎球菌感染的高保护水平{ Adamou 2001, Hamel 2004, Ogunniyi 2007, Wizemann 2001, Zhang 2001 }。尽管它们在针对肺炎链球菌的疫苗接种中具有潜在重要性，尚未确定这些蛋白的生物学功能。来自抗体标记实验和流式细胞术实验的结果证实，Pht蛋白暴露于有荚膜的细菌的表面上{ Hamel 2004 },这与它们作为疫苗祀标的相关性相一致。通过标志物标记的诱变，已经提示，PhtA、PhtB和PhtD涉入肺特异性的毒力{ Hava 2002 }，没有关于它们的生物学功能的进一步指示。在它们的假定的作用中，已经提出了补体因子C3b的中和{ Hostetterl999, Ogunniyi 2009 },这暗示，它们会干扰吞卩遼作用。此外，还怀疑在附着中的作用。实际上，已经报道了#切和之间的遗传联系{ Panina 2003 }，所述 编码假定的层粘连蛋白粘着蛋白{ Spellerberg 1999 }。最后，由于组氨酸残基在组氨酸三联体中的高数目，已经提出，Pht蛋白可能参与DNA和/或金属结合{ Adamou 2001}。更具体地，一些研究突出了 Pht家族和锌之间的联系。实际上，已经在基因的上游区域中发现了 AdcR-结合位点，AdcR被描述为调节锌摄入的转录因子{ Panina 2003}。此外，PhtA的一部分的晶体结构揭示了与组氨酸三联体结构域结合的锌离子的存在{Riboldi-Tunnicliffe 2005 }。但是，不清楚锌清扫或运输是否是那些蛋白的功能，或锌是否起构象作用或功能作用。疫苗候选物需要解决的重要方面是，它们的表达水平和有关的调节、它们的出现以及它们的序列变异性。因此，我们已经解决了关于Pht蛋白的这些不同的方面。肺炎链球菌会引起表现出不同病状的不同疾病状态，这取决于肺炎球菌群体的繁殖部位。在肺炎链球菌进入血流中的情况下，产生败血病，而在肺炎链球菌在肺中繁殖的情况下，产生肺炎。肺炎链球菌也是中耳炎感染的一种重要病原体。肺炎链球菌还可以进入脑脊液中，造成脑膜炎。需要开发更好的肺炎球菌疫苗，所述疫苗能够靶向特定的肺炎球菌疾病，并提供针对特定形式的肺炎球菌疾病的最佳保护。·因此，提供了一种治疗或预防肺炎链球菌感染的方法，其中所述肺炎链球菌感染发生在这样的环境中其中Zn2+和/或Mn2+的浓度低至足以上调至少一种PhtX蛋白在肺炎链球菌中的表达；所述方法包括下述步骤给人患者施用药学有效量的PhtX蛋白。在本专利技术的第二个方面，提供了一种用于治疗或预防肺炎链球菌感染的免疫原性组合物，其包含药学有效量的分离的Phtx蛋白，其中所述肺炎链球菌感染发生在处于下述环境的人患者中其中Zn2+和/或Mn2+的浓度低至足以上调至少一种PhtX蛋白在肺炎链球菌中的表达。在本专利技术的第三个方面，提供了药学有效量的分离的Phtx蛋白在药物生产中的用途，所述药物用于治疗或预防肺炎链球菌感染，其中所述肺炎链球菌感染发生在处于下述环境的人患者中其中Zn2+和/或Mn2+的浓度低至足以上调至少一种PhtX蛋白在肺炎链球菌中的表达。附图说明图I.肺炎链球菌血清型4菌株TIGR4中的# 基因的构成。图2. /Ai基因的含有启动子的上游区域。(a)/ A访基因，(b)/7AM基因，(c)#汾基因，(A、Imb基因，(e)yfnA基因。-35和-10区域标有双下划线，用粗体文字和符号(+1)指示转录起始位点，假定的核糖体结合位点(rbs)标有下划线,用箭头表示开放读码框,所述箭头指示在一系列粗体文字上的转录方向。在左侧的数字与GenBank登录号AY569979(a、d和e)和AY569980 (b和c)中的序列位置相对应。图3· 和基因的Rho-非依赖性的转录终止子序列。isdphtE, VcdphtB,U)phtD, (A)PhtA和(Θ)/Λ5 /基因。终止密码子是标有下划线的粗体字，终止子区域标有下划线，用虚线标出下划线的序列指示终止子的发夹区域。用箭头表示开放读码框，所述箭头指示在一系列粗体文字上的转录方向。在(a)中，斜体字区域基因；假定的起始密码子标有双下划线)与#访基因的前481 bp具有78%同一性。但是，标有下划线的终止密码子会阻止重要的基因翻译。数字与GenBank登录号AY569979 (a和c)和AY569980 (b、d和e)中的序列位置相对应。图4. pht转录物的RT-PCR分析。(a)显示RT-PCR产物的1%琼脂糖凝胶，所述RT-PCR使用来自生长至对数中期生长期的细胞的模板RNA。泳道1-8与(b)中的示意图中的区域1-8相对应。使用在图中描绘的侧本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·德诺尔，P·V·赫曼德，S·拉贝，J·普尔曼，S·里奥克斯，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：
国别省市：